Afiliere Marseille Cancer Research Centre (CRCM), U1068 Inserm, UMR7258 CNRS, Aix Marseille University, Institut Paoli-Calmettes, LNCC (Equipe labellisée), Marseille, France

facilitată

Afiliere Marseille Cancer Research Centre (CRCM), U1068 Inserm, UMR7258 CNRS, Aix Marseille University, Institut Paoli-Calmettes, LNCC (Equipe labellisée), Marseille, France

Afiliere Marseille Cancer Research Centre (CRCM), U1068 Inserm, UMR7258 CNRS, Aix Marseille University, Institut Paoli-Calmettes, LNCC (Equipe labellisée), Marseille, France

Afiliere Marseille Cancer Research Centre (CRCM), U1068 Inserm, UMR7258 CNRS, Aix Marseille University, Institut Paoli-Calmettes, LNCC (Equipe labellisée), Marseille, France

  • Dmitri Churikov,
  • Ferose Charifi,
  • Marie-Noëlle Simon,
  • Vincent Gelli

Cifre

Abstract

Rezumatul autorului

Citare: Churikov D, Charifi F, Simon M-N, Géli V (2014) Rad59-Facilitated Acquisition of Y ′ Elements by Short Telomeres întârzie debutul senescenței. PLoS Genet 10 (11): e1004736. https://doi.org/10.1371/journal.pgen.1004736

Editor: Michael J. McEachern, Universitatea din Georgia, Statele Unite ale Americii

Primit: 19 aprilie 2014; Admis: 5 septembrie 2014; Publicat: 6 noiembrie 2014

Disponibilitatea datelor: Autorii confirmă că toate datele care stau la baza constatărilor sunt pe deplin disponibile fără restricții. Toate datele relevante se află în hârtie și în fișierele sale de informații de suport.

Finanțarea: Această lucrare a fost susținută de „Ligue Nationale Contre le Cancer” și de „L’Institut National Du Cancer (INCA), programul TELOCHROM”. DC a fost susținut de „Association for La Recherche sur le Cancer” (ARC). Finanțatorii nu au avut niciun rol în proiectarea studiului, colectarea și analiza datelor, decizia de publicare sau pregătirea manuscrisului.

Interese concurente: Autorii au declarat că nu există interese concurente.

Introducere

Telomerii sunt structuri nucleoproteice găsite la capetele fizice ale cromozomilor. Localizarea lor terminală definește cele două funcții principale ale acestora: protecția cromozomului se termină de reacțiile de reparare nelegitime și prevenirea pierderii ADN-ului terminal fie din cauza degradării, fie a replicării incomplete [1]. În Saccharomyces cerevisiae, prima funcție este îndeplinită în primul rând de Rap1, care înfășoară ADN-ul telomeric tandem pentru a inhiba NHEJ [2] și recrutează Rif1 și Rif2 pentru a restrânge rezecția finală 3 'mediată de MRX [3], [4], limitând astfel recrutarea factorilor HR și semnalizarea punctelor de control [5]. Cea de-a doua funcție este mediată de Cdc13 legat de surplombul 3 ′ bogat în G cu o singură catenă la capătul extrem al unui telomer. Cdc13 formează complexe alternative fie cu Est1, fie cu Stn1-Ten1 pentru a coordona sinteza mediată de telomerază a catenei bogate în G cu sinteza catenei complementare de ADN polimerază α [6].

La fel ca la mamifere, telomerii din celulele de drojdie cu activitate redusă a telomerazei se scurtează progresiv cu fiecare diviziune celulară până când sunt recunoscuți ca deteriorare a ADN-ului și recrutează kinaza Mec1 care inițiază un stop ireversibil G2/M [7] - [9]. La nivelul populației celulare, disfuncția telomerilor se manifestă ca o criză, când majoritatea celulelor se opresc ireversibil în G2/M [7]. Majoritatea celulelor mor, dar la o frecvență scăzută apar supraviețuitori, care își mențin telomerii prin recombinare [10], [11], ceea ce înseamnă că recombinarea omologă (HR) poate servi ca o cale de ocolire pentru a susține viabilitatea în absența telomerazei.

Rezultate

Telomerul VII-L scurtat dincolo de 60 pb devine instabil și provoacă o arestare tranzitorie

Pentru a aborda procesarea unui telomer scurt fără elemente Y ′ în absența telomerazei, am folosit sistemul de recombinare specific site-ului pentru a induce scurtarea bruscă a unui singur telomer [31]. În acest sistem, inducția Cre determină excizia porțiunii bazale a telomerului VII-L (TelVII-L) flancată de situsuri loxP (Figura 1A). În prezența telomerazei, telomerul scurtat este extins până când lungimea acestuia revine la echilibru [32]. Pentru a examina modul în care acest telomer va fi procesat în absența telomerazei, am combinat scurtarea bruscă a TelVII-L cu o ștergere inductibilă a EST2 suportată de plasmidă [33].