Fail Khaziakhmetov

1 Departamentul de fiziologie, biochimie și hrănirea animalelor, Înființarea bugetară de stat federală Învățământul superior al „Universității agrare de stat din Bashkir”, Ufa, Federația Rusă

probioticelor

Airat Khabirov

1 Departamentul de fiziologie, biochimie și hrănirea animalelor, Înființarea bugetară de stat federală Învățământul superior „Universitatea agrară de stat din Bashkir”, Ufa, Federația Rusă

Khamit Tagirov

2 Departamentul de tehnologie a cărnii, produselor lactate și chimie, Înființarea bugetară de stat federală Învățământul superior „Universitatea agrară de stat din Bashkir”, Ufa, Federația Rusă

Ruzil Avzalov

1 Departamentul de fiziologie, biochimie și hrănirea animalelor, Înființarea bugetară de stat federală Învățământul superior „Universitatea agrară de stat din Bashkir”, Ufa, Federația Rusă

Gulnara Tsapalova

1 Departamentul de fiziologie, biochimie și hrănirea animalelor, Înființarea bugetară de stat federală Învățământul superior al „Universității agrare de stat din Bashkir”, Ufa, Federația Rusă

Almaz Basharov

1 Departamentul de fiziologie, biochimie și hrănirea animalelor, Înființarea bugetară de stat federală Învățământul superior „Universitatea agrară de stat din Bashkir”, Ufa, Federația Rusă

Abstract

Această lucrare prezintă rezultatele studiilor privind probioticele „Stimix Zoostim” și „Normosil” și influența lor asupra microflorei fecale, indicatorii hematologici, imunorezistența, digestibilitatea nutrienților și intensitatea creșterii vițeilor legați de mamă.

Materiale și metode:

Vițeii grupului de control au fost hrăniți cu dieta lor de bază (BD) fără „Stimix Zoostim” sau „Normosil”, în timp ce vițeii din grupul experimental au fost hrăniți cu BD-ul lor suplimentat cu „Stimix Zoostim” și Normosil. ” Pentru vițeii în vârstă de 10-20 de zile, doza zilnică a fost de 10 ml pe cap, în timp ce vițeii în vârstă de 21-90 de zile au primit 15 ml de probiotice pe cap pe zi. Vițeilor grupului experimental li s-au administrat probiotice în fiecare zi. Vițeii cu vârsta cuprinsă între 10 și 60 de zile au primit probiotice cu lapte, iar apoi la vârsta de 61 până la 90 de zile, au primit probiotice cu apă. (Acesta este un proces secvențial. La vârsta de 60 de zile, creșterea vițelului cu lapte se oprește și, după aceea, folosim probiotice adăugate în apă pentru a le crește). Ambelor grupuri li s-au administrat probiotice de două ori pe zi, în special 50% din doza zilnică la fiecare timp de hrănire.

Rezultate:

Rezultatele acestui studiu au demonstrat că probioticele „Stimix Zoostim” și „Normosil” prezintă activitate probiotică ridicată și au un efect pozitiv asupra microflorei fecale a vițeilor. Hrănirea vițeilor cu probiotice a dus la o creștere semnificativă a numărului de flori normale, cum ar fi bacteriile lactice și bifidobacteriile, și o scădere a cantității de Escherichia. De asemenea, a dus la o creștere a globulelor roșii din sânge, a hemoglobinei și a γ-globulinelor în intervalul fiziologic. În studiul nostru, am constatat că reacția fagocitară din serul sanguin al grupului experimental a fost ușor îmbunătățită, sugerând un răspuns ridicat al organismului la agenții infecțioși.

Concluzie:

Astfel, grupul de vițe care a primit probiotice „Stimix Zoostim” a prezentat o depășire a activității fagocitice cu 4,8% și grupul care a primit „Normosil” cu 4,4%, în comparație cu grupul martor. Doza zilnică de 10 mL de probiotice pe cap pentru vițeii de 10-20 de zile și 15 mL pe cap pentru vițeii de 21-90 de zile a avut, de asemenea, un efect pozitiv asupra digestibilității nutrienților, creșterii și consumului de furaje. Beneficiul economic pe animal a fost de 149,23 și respectiv 157,0 ruble.

Introducere

În ultimii ani, interesul științific și practic pentru probiotice a crescut semnificativ în creșterea animalelor, în special în creșterea puilor și a păsărilor de curte, unde probioticele sunt utilizate ca aditivi pentru hrana animalelor care previn bolile și stimulează creșterea [1-5].

Un nou aditiv probiotic, „Normosil”, este un amestec de culturi vii și tulpini de bacterii lactice, cum ar fi Lactobacillus brevis B-3, L. plantarum 8 TIMES, L. acidophilus 457, Enterococcus faecium UDS 86 și enterosorbenți. Următoarele microorganisme cuprind probioticul „Stimix Testim”: E. coli, L. acidophilus, Saccharomyces cerevisiae, Bacillus subtilis, Azotobacter vinelandii și Azotobacter chroococcum. Acestea sunt toate obiecte microbiologice noi în creșterea bovinelor. Influența acestor microorganisme asupra microbiocenozei, a parametrilor hematologici ai sângelui, a rezistenței imune, a digestibilității nutrienților și a creșterii vițeilor trebuie examinată îndeaproape.

Acest studiu a avut ca scop investigarea influenței probioticelor „Normosil” și „Stimix Zoostim” asupra microflorei fecale, parametrii hematologici, imunorezistența, digestibilitatea nutrienților și intensitatea creșterii vițeilor legați de mamă.

Materiale și metode

Aprobare etică

Studiul a fost realizat în conformitate cu principiile etice aprobate de Comitetul de etică al experimentelor pe animale, instituția educațională bugetară de stat federală pentru învățământul profesional superior „Universitatea agrară de stat din Bashkir” (Protocolul nr. 8 din 28.07.2019).

Perioada de studiu și locația

Experimente pe probioticul „Stimix Zoostim” au fost efectuate la ferma Bairamgul din Uchaly, Republica Bashkortostan. Toate studiile au fost efectuate de la 1 octombrie 2017 până la 2 mai 2018. Un studiu privind „Normosil” a fost realizat la ferma comercială de lapte Kultaban din Baimak, Republica Bashkortostan. Viței alb-negru Holstein legați de mamă au fost subiectele experimentelor care au durat 83-90 de zile. Au fost asigurate condiții confortabile pentru păstrarea și hrănirea vițeilor. Probioticul „Normosil” a fost furnizat de Compania de Cercetare și Inovare LLC BashInkom, Rusia, iar „Stimix Zoostim” a fost obținut de la Asociația Științifică și de Producție „Stavropol” (Nevinnomyssk, Rusia).

Formarea grupului experimental și condițiile de hrănire a vițeilor

Vițeii au fost grupați utilizând metoda analogică (sex, data nașterii, greutatea vie etc.), cu 10 animale la vârsta de 7-10 zile din fiecare grup (50% viței și 50% viței). Condițiile de adăpostire și hrănire a animalelor au fost aceleași, conform protocolului fermei. Schema de hrănire a vițeilor pentru perioada experimentală este prezentată în Tabelul-1 .

Tabelul 1

Schema de hrănire a vițeilor pentru perioada experimentului.

Vârstă, zile, deceniu Hrănire, kg/1 cap/ziLapte integral starter pentru vițel furaj concentrat KK-62 fân de pajiște fân de ovăz
1-75.0Perioada de introducere---
8-305.50,1-Perioada de introducere-
Pentru prima lună161,52.3---
Al patrulea interval de 10 zile5.00,20,10,3Perioada de introducere
Al cincilea interval de 10 zile4.00,60,30,40,5
Al șaselea interval de 10 zile2.50,70,60,81.5
Pentru a 2-a lună115,015.010.015.020.0
Al șaptelea interval de 10 zile1,350,70,70,91.8
Al optulea interval de 10 zile-0,60,80,92.2
Al nouălea interval de 10 zile-0,270,91.03.5
Pentru a 3-a lună13.515.72428.075,0
Per total în 3 luni290,033.089.043,095,0

Vițeii grupului de control au fost hrăniți cu dieta de bază (BD) fără probiotice, în timp ce vițeii din grupul experimental au fost hrăniți cu BD care a inclus probiotice „Stimix Zoostim” și „Normosil”. Pentru vițeii în vârstă de 10-20 de zile, doza zilnică a fost de 10 ml probiotice pe cap, iar vițeii în vârstă de 21-90 de zile au fost administrați cu 15 ml probiotice pe cap. Vițeii acestui grup primeau probiotice în fiecare zi. Mai mult, vițeii de 10 până la 60 de zile au primit probiotice cu lapte, în timp ce vițeii de 61 până la 90 de zile au primit probiotice cu apă. Ambele grupuri au primit probiotice de două ori pe zi, în special 50% din doza zilnică la fiecare timp de hrănire. Vițeii au fost hrăniți în conformitate cu câștigul așteptat și schema de hrănire adoptată care a fost dezvoltată pe baza valorii nutritive reale a alimentelor și în conformitate cu standardele de vârstă-hrană. În timpul experimentului, vițeilor în vârstă de 3 luni și mai tineri li s-au administrat 290 L de lapte integral, 43 kg de fân de luncă, 95 kg de amestec de veșcă și ovăz, 33 kg de hrană mixtă pre-starter și 89 kg de KK- 62 amestec de furaje. Consumul de proteine ​​digerabile a fost de 127 g/1 unitate energetică de alimentare.

Metode de analiză a proprietăților morfologice și a creșterii vițeilor

O dată pe lună, toți vițeii au fost cântăriți în mod constant simultan, adică cu 2 ore înainte de hrănire. Probele de sânge au fost obținute din venele jugulare în a 90-a zi, la 3 ore după hrănirea de dimineață. Apoi, probele de sânge au fost livrate la laborator. Pentru a determina nivelul de metabolism și pentru a evalua starea imună a vițeilor experimentali, s-au obținut probe de sânge de la patru viței de 3 luni din fiecare grup înainte de cântărire. Probele de sânge au fost prelevate din vena jugulară folosind tuburi Vacutainer. Tuburi separate pentru sânge integral și pentru ser au fost utilizate pentru analize biochimice și imunologice.

Serul a fost separat de sânge prin centrifugare timp de 10 minute la viteza de 2000 r.p.m.

Analiza biochimică a serului sanguin a fost efectuată utilizând un analizor semiautomatic Stat Fax. Un analizor automat de hematologie, Abacus Junior B, împreună cu kituri de testare „Olveks”, a fost utilizat pentru a obține parametrii hematologici. Fiecare indicator analizat a fost testat separat în conformitate cu metodele aprobate de analizor.

Activitatea fagocitară a neutrofilelor a fost determinată folosind particule inerte de latex de polistiren (Sigma-Aldrich, SUA), cu un diametru de 0,80 microni dizolvat în soluția Hanks la un raport de concentrație de 1:10.

Nivelurile de imunoglobulină A, G și M au fost determinate folosind metoda difuziei radiale Mancini. Serul imun împotriva anticorpilor (Abs) dintr-o anumită clasă (IgG, IgM sau IgA) a fost introdus într-o soluție de agar topită. După ce soluția de agar topit a fost înghețată, Abs au fost distribuite uniform pe ea. Materialul (antigenul [Ag]) introdus în bazin s-a difuzat radial în coloana de gel. În zona echivalenței în reacția Ag-Ab (în loc de benzile de precipitină), inelele de precipitină s-au format în jurul bazinului Ag, deoarece concentrația de Ab este aceeași peste tot. Diametrul inelului de precipitină este direct proporțional cu concentrația de Ag din fluidul testat.

Cuantificarea complexelor imune circulante

Probele de sânge obținute din vena jugulară a vițeilor au fost păstrate timp de 30 de minute la temperatura camerei. Serul de sânge obținut a fost centrifugat timp de 10-15 minute la o viteză de 400 r.p.m. Această metodă s-a bazat pe precipitarea selectivă a complexelor Ag-Ab în soluție 3,75% de polietilen glicol M-6000, cu determinarea fotometrică ulterioară a densității precipitatului la 450 nm.

Examenul microbiologic al fecalelor

Examinarea microbiologică a fecalelor vițeilor a fost efectuată în a 90-a zi a experimentului pentru a determina compoziția microflorei și clasificarea microorganismelor (lacto- și bifidobacterii sau Escherichia). Cercetătorii, folosind mănuși de cauciuc sterile, au colectat probele fecale din rect și le-au plasat în tuburi de plastic sterile. Înainte de analiza bacteriilor coliforme, lactobacili și bifidobacterii, probele au fost depozitate într-un congelator la -20 ° C.

Microbiocenoza fecalelor vițeilor

Microbiocenoza fecalelor vițeilor implică numărarea și clasificarea microorganismelor în fecalele vițeilor. Cercetătorii, folosind mănuși de cauciuc sterile, au colectat probele fecale din rect și le-au plasat în tuburi de plastic sterile.

Pentru o evaluare comparativă a microbiocenozei intestinale, în funcție de starea clinică a vițeilor, s-au efectuat o serie de analize bacteriologice ale conținutului intestinal al vițeilor nou-născuți clinic sănătoși (n = 12). Studiile microbiologice au fost efectuate folosind metode standard.

Pentru a izola microflora aerobă și anaerobă facultativă de fecale, au fost pregătite o serie de diluții de zece ori, care sunt semănate pe medii nutritive dense. Culturile au fost incubate într-un termostat la o temperatură de 37 ° C timp de 24-48 ore. Proprietățile morfologice ale culturilor izolate de microorganisme au fost studiate cu ajutorul microscopiei cu lumină.

Pentru diagnosticarea bacteriologică pe tot parcursul vieții a tulburărilor intestinale, fecalele vițeilor care nu au fost tratați cu medicamente antibacteriene au fost trimise la laborator. Aici, 2-3 g de probe fecale au fost obținute direct din rectul a 5-6 animale bolnave dintr-o fermă folosind un cateter de cauciuc fiert. Apoi, probele au fost plasate în eprubete sterile. Tuburile etichetate au fost ambalate într-o pungă sau cutii de plastic. Dacă a fost imposibilă livrarea rapidă a probelor fecale la laborator (3-4 ore după prelevarea lor), acestea au fost conservate cu soluție sterilă de glicerină 30% într-un raport de 1: 2.

Nivelul E. coli a fost calculat utilizând medii diferențiale de agar Endo, Levin sau MacConkey și un mediu cu sorbitol. Culturile au fost incubate la 37 ° C timp de 18-24 ore. La sfârșitul perioadei de însămânțare, a fost calculată cantitatea de E. coli din coloniile roșii închise cu un luciu metalic.