Nefrologia este publicația oficială a Societății Spaniole de Nefrologie. Jurnalul publică articole despre cercetări de bază sau clinice referitoare la nefrologie, hipertensiune arterială, dializă și transplanturi de rinichi. Este guvernat de sistemul de evaluare inter pares și toate lucrările originale sunt supuse evaluării interne și revizuirilor externe. Jurnalul acceptă trimiteri de articole în limbile engleză și spaniolă. Nefrologia respectă cerințele de publicare ale Comitetului internațional al editorilor de reviste medicale (ICMJE) și ale Comitetului pentru etica publicațiilor (COPE).

insuficiență

Indexat în:

MEDLINE, EMBASE, IME, IBEC, Scopus și SCIE/JCR

Urmează-ne:

Factorul de impact măsoară numărul mediu de citări primite într-un anumit an de lucrările publicate în jurnal în ultimii doi ani.

CiteScore măsoară citările medii primite pentru fiecare document publicat. Citeste mai mult

FRY este o valoare de prestigiu bazată pe ideea că nu toate citatele sunt la fel. SJR folosește un algoritm similar cu cel al paginii Google; oferă o măsură cantitativă și calitativă a impactului revistei.

SNIP măsoară impactul contextului de citare contextual prin citări importante pe baza numărului total de citații dintr-un domeniu.

Glomeruloscleroza focală segmentară (FSGS) este leziunea histologică întâlnită la 10-20% din proteinurie sau sindrom nefrotic la copii și 25% la adulții albi 1. Pe lângă proteinurie, hematuria microscopică, hipertensiunea și insuficiența renală sunt caracteristici comune la prezentarea 1. Se observă ocazional cazuri de FSGS în care funcția renală este stabilă de câțiva ani, dar în general arată un declin mai mult sau mai puțin rapid spre insuficiența renală cronică 2,3. Cu toate acestea, informațiile exacte despre mecanismele implicate în evoluția clinică a bolii încă lipsesc și nu sunt cunoscute, de asemenea, etiologia precisă și patogeneza FSGS 4. Formele familiale ale FSGS au sugerat un rol genetic în patogeneza FSGS. Recent, studiile FSGS familiale au demonstrat mutații ale diafragmei cu fante și ale proteinelor podocite care sunt critice în formarea și menținerea barierei de filtrare glomerulară 5 .

Deși FSGS este predominant idiopatic, acesta poate fi, de asemenea, secundar anumitor boli, cum ar fi nefropatia asociată cu heroina sau nefropatia de reflux, infecția cu HIV 1 sau masa musculară crescută 6, cu o prezentare care nu se distinge de FSGS idiopatică (I-FSGS). Mai mult, în ultimele trei decenii, FSGS a fost considerată în mod obișnuit ca o formă de glomerulopatie legată de obezitate (O-FSGS) 7. Prevalența obezității în întreaga lume a crescut constant, ca urmare a creșterii aportului alimentar și a stilului de viață sedentar 8. Mecanismele de afectare a rinichilor în obezitate includ hiperfiltrarea glomerulară, remodelarea renală și proliferarea matricei extracelulare implică probabil factori neurohumorali, factori de creștere locală și citokine 9. În special, rolul TGF-beta-1, al monocitelor/macrofagelor, al limfocitelor T și al miofibroblastelor este subliniat 10-13. Mai mult, studiul fundamental al grupului D’Agati asupra glomerulopatiei legate de obezitate 14 a sugerat că această entitate diferă de I-FSGS în unii parametri clinici și histologici. Prin urmare, studiul de față a fost întreprins pentru a compara parametrii morfometrici glomerulari și interstițiali în O-FSGS și I-FSGS, precum și pentru a evalua profilul imunohistochimic al TGF-beta-1, monocitelor/macrofagelor, limfocitelor T și a-SMA în aceste grupuri.

Material si metode

Nouăsprezece pacienți cu O-FSGS și 16 cu I-FSGS au fost examinați prin biopsie renală percutanată. Toate biopsiile au fost efectuate exclusiv în scop diagnostic. Toți pacienții noștri erau adulți: vârsta medie în grupul O-FSGS a fost de 34 ± 11,8 ani (12 bărbați și 7 femei) și 36,2 ± 10,6 ani (10 bărbați și 6 femei) în grupul I-FSGS. Obezitatea a fost definită ca IMC> 30 kg/m2. Biopsiile renale de la pacienții cu FSGS secundar, altul decât O-FSGS și cu nefropatie diabetică, au fost excluse cu atenție.

Rezultatele clinice și de laborator la momentul biopsiei în cazurile cu O-FSGS și I-FSGS sunt rezumate în Tabelul I. La momentul biopsiei renale, un procent ridicat de pacienți din ambele grupuri prezentau sindrom nefrotic sau proteinurie severă. Insuficiența renală clinică (creatinină serică mai mare de 1,5 mg/dl) a fost observată la 4 pacienți cu O-FSGS și la 6 pacienți cu I-FSGS. Tensiunea arterială crescută a fost observată în 10 cazuri de O-FSGS și 5 I-FSGS. Hematuria a însoțit proteinuria la 3 pacienți cu O-FSGS și 6 I-FSGS.

În toate cazurile, diagnosticul FSGS s-a bazat pe constatări caracteristice prin microscopie ușoară (secțiuni colorate cu hematoxilină și eozină, Masson-Trichrome, impregnarea cu argint a lui Jones și acid periodic-Schiff urmat de Alcian Blue), precum și microscopie electronică și imunofluorescență folosind protocoale standard. Grosimea fiecărei secțiuni a fost controlată conform metodei descrise de Weibel 15 .

Au fost examinate numai glomeruli non-sclerotici. Morfometria a fost realizată prin intermediul unui sistem de analiză a imaginii format dintr-un computer PC echipat cu o tabletă grafică Pentagram, card Indeo Fast (frame grabber, true-color, în timp real), produs de Indeo (Taiwan), și cameră TV color Panasonic Japonia ) cuplat cu microscopul Carl Zeiss (Germania). Acest sistem a fost programat (software-ul MultiScan 8.08, produs de Computer Scanning Systems, Polonia) pentru a calcula:

-suprafața unei structuri al cărei perimetru a fost trasat

-numărul de obiecte (funcție automată cu corecție manuală)

-suprafața unei structuri utilizând rețea stereologică.

S-au măsurat toți glomerulii din secțiunile colorate în albastru PAS-alcian, cu excepția celor care au fost sclerotice sau evident tăiate tangențial. Ca secțiune tangențială a fost definită o secțiune în care diametrul aparent a fost de 16 Imaginile microscopice colorate au fost salvate serial în memoria unui computer și apoi au fost efectuate examinări cantitative. Examenul cantitativ a inclus următorii parametri glomerulari:

- Suprafața glomerulară totală (limita interioară a capsulei Bowman a fost trasată-funcția semiautomatică.)

- Total nuclee glomerulare pe suprafață totală glomerulară: nuclee epiteliale mezangiale, endoteliale și viscerale (aceste obiecte au fost numărate automat și urmărite cu corecție manuală, după cum este necesar.) Aceeași metodă a fost utilizată pentru numărarea celulelor glomerulare CD3 + și CD68 + per cruce glomerulară secțiune.

- Suprafața mesangială la sută din suprafața glomerulară totală (în colorarea albastră PASalciană) și a-SMA procentul suprafeței glomerulare totale. Acești parametri au fost măsurați folosind o metodă de numărare a punctelor, care este o adaptare a principiilor Weibel. 15 Distanța punctuală este de 16μm. Numărul total al punctelor unei rețele a fost de 169, iar suprafața totală a fost de 36864 mp. μm. Procentul de colorare a-SMA și suprafața mezangială a fost o expresie a numărului de puncte care acoperă aceste structuri ca procent din totalul punctelor numărate.

Expresia interstițială a-SMA a fost măsurată ca o fracție de suprafață folosind, de asemenea, metoda de numărare a punctelor. Sub plasa descrisă mai sus au fost investigate 10 câmpuri adiacente selectate aleatoriu ale cortexului renal. Glomerulii și vasele mari de sânge au fost neglijate. Deoarece majoritatea imunomarcării α-SMA a fost în cadrul proceselor citoplasmatice, aceste structuri au fost incluse în calcul. Colorarea α-SMA-pozitivă a fost exprimată ca procentul de puncte care depășesc suprafețele α-SMA-pozitive. Aceeași metodă a fost utilizată pentru a estima volumul interstițial în secțiunile colorate cu tricrom Masson: a fost exprimat ca procentul de puncte care se află peste interstitiu cortical renal.

Limfocitele T interstițiale și monocitele/macrofagele au fost determinate prin numărarea celulelor CD3 +, precum și a celulelor CD68 + (funcție semiautomatică) într-o secvență de zece imagini computerizate consecutive de 400 x câmpuri de putere mare -0,0047mm 2 fiecare. Singurele ajustări ale câmpului au fost făcute pentru a evita glomerulii și vasele mari. Rezultatele au fost exprimate ca numărul mediu de celule imunopozitive CD3 și CD68 per mm2 .

Diferențele dintre grupuri au fost testate folosind testul t al Studentului nepereche, precedat de evaluarea normalității și testul lui Levene. Testul Mann-Whitney U a fost utilizat acolo unde este cazul. Coeficienții de corelație au fost calculați utilizând metoda Spearman. Rezultatele au fost considerate semnificative statistic dacă p REZULTATE

Datele morfometrice ale parametrilor glomerulari apar din tabelul 2. Valorile medii ale celulelor glomerulare totale pe suprafața totală glomerulară, mezangiu (% din suprafața totală glomerulară), colorare glomerulară a-SMA, monocite/macrofage glomerulare și celule T glomerulare au fost în IFSGS crescute în comparație cu O-FSGS, majoritatea în mod semnificativ, în timp ce valoarea medie a suprafeței glomerulare totale a fost semnificativ mai mare la pacienții cu O-FSGS.

Datele semiquantitative referitoare la imunoexprimarea TGF-β-1 în tubulii renali și datele morfometrice privind volumul interstițial, colorarea α-SMA interstițială și celulele CD68 + interstițiale, precum și celulele CD3 + sunt prezentate în tabelul 3.

În celulele epiteliale tubulare renale (figurile 1 și 2.) s-au detectat probe de biopsie renală obținute de la pacienții cu OFSGS și I-FSGS în celulele epiteliale tubulare renale (figurile 1 și 2.). în infiltratele inflamatorii interstițiale. Aceste celule au fost excluse din analiză. Atât în ​​grupurile O-FSGS, cât și în cele I-FSGS, expresia TGF-β-1 a fost absentă din zonele glomerulare.

Valorile medii ale imunoexprimării TGF-β-1, volumului interstițial și colorării α-SMA (figurile 3 și 4) au fost semnificativ crescute la pacienții cu I-FSGS în comparație cu grupul O-FSGS. Valorile medii ale celulelor CD68 + interstițiale și ale celulelor CD 3+ au fost, de asemenea, crescute la pacienții cu I-FSGS, însă aceste diferențe nu au fost semnificative.

Corelațiile dintre parametrii glomerulari și interstițiali selectați la pacienții cu O-FSGS și I-FSGS sunt prezentate în Tabelul 4. În ambele grupuri O-FSGS și I-FSGS a existat o corelație pozitivă semnificativă între imunoexpresia glomerulară a α-SMA și celulele CD68 + glomerulare . Mai mult, imunoexpresia tubulară a TGF-β-1 și imunoexpresia interstițială a α-SMA, precum și imunoexprimarea tubulară a TGF-β-1 și volumul interstițial au fost, de asemenea, corelate pozitiv și semnificativ în aceste grupuri, în timp ce corelația negativă între imunoexpresia tubulară a TGF-β -1 și celulele CD3 + interstițiale au fost semnificative numai în grupul I-FSGS. Corelațiile dintre imunoexprimarea glomerulară a celulelor α-SMA și CD 3+ glomerulare, precum și între imunoexpresia tubulară a celulelor TGF-β-1 și celulele CD68 + interstițiale au fost săptămânale și nu au fost semnificative.

În 1974 a fost raportată pentru prima dată o asociere între obezitate masivă și proteinurie severă. 17 De atunci, o serie de studii au raportat o creștere alarmantă a incidenței glomerulopatiei legate de obezitate și au subliniat că obezitatea este un factor de risc semnificativ pentru apariția bolii renale de ultimă etapă. 18-22 Glomeruloscleroza segmentară focală sa dovedit recent a fi o leziune cheie care duce la boala renală în stadiu final în aceste cazuri. 7 Deși au fost raportate recent unele diferențe clinice și morfologice între O-FSGS și I-FSGS14, prezentul studiu este, din cunoștințele noastre, prima comparație morfometrică și imunohistochimică a acestor glomerulopatii.

În ceea ce privește volumul interstițial renal, am constatat că în I-FSGS crește semnificativ în comparație cu O-FSGS.

În consecință, studiul nostru morfometric a arătat că expresia interstițială a α-SMA a fost la pacienții cu I-FSGS crescut semnificativ în comparație cu grupul O-FSGS. Am observat colorare interstițială pentru α-SMA într-o distribuție comparabilă cu cea a țesutului interstițial conjunctiv. În plus, în ambele grupuri O-FSGS și I-FSGS au existat corelații puternice pozitive între imunoexprimarea interstițială a TGF-β-1 și a-SMA. S-a demonstrat că citokinele precum TGF-β-1 eliberate de celulele tubulare și macrofage 28, care joacă un rol cheie în inducerea fibrozei, pot induce fenotipul miofibroblastului în fibroblaste în repaus sau trans-diferențierea celulelor epiteliale tubulare. 11,29 Cu toate acestea, nu am găsit o corelație pozitivă semnificativă între imunoexprimarea TGF-β-1 și celulele CD68 + interstițiale. Această observație susține punctul de vedere al lui Nishida și colab. 30 care sugerează că rolul monocitelor/macrofagelor în acest proces poate fi foarte complex. Acești autori au prezentat dovezi că infiltrarea monocitelor/macrofagelor în țesutul renal poate juca un rol antifibrotic benefic care surprinde în mod surprinzător acțiunea angiotensinei.

Deși celulele CD3 + interstițiale nu au diferit semnificativ în cazurile O-FSGS și I-FSGS, în ambele grupuri au existat corelații negative investigate între imunocolorarea TGF-β-1 și celulele CD 3+. Cu toate acestea, este de remarcat faptul că doar la pacienții cu I-FSGS această corelație a fost semnificativă statistic. Acest lucru este în concordanță cu concluziile că TGF-β-1 inhibă proliferarea celulelor T, iar acest efect biologic poate fi relevant în limitarea răspunsului inflamator acut. 31 Cu toate acestea, TGF-β-1 are probabil efecte variabile asupra sistemului imunitar, atât inhibând proliferarea celulară, cât și promovând memoria celulelor T și funcția citotoxică. 32 Prin urmare, relația dintre limfocitele TGF-β-1 și T în patologia renală nu este până acum complet elucidată.

În concluzie, studiul nostru morfometric și imunohistochimic sugerează că O-FSGS și I-FSGS sunt entități morfologice separate și subliniază că acesta din urmă este o glomerulopatie mai agresivă și mai distructivă. Pe de altă parte, mecanismele leziunii glomerulare și interstițiale în aceste cazuri par a fi destul de similare.

Sprijin financiar: subvenția Universității de Medicină din Lodz nr. 503-6038-1.