4.1. Cum se diluează o soluție stoc de proteine?

Albumina serică bovină (BSA) este un lanț polipeptidic unic format din aproximativ 583 de resturi de aminoacizi și fără carbohidrați. La pH 5-7 conține 17 punți disulfură intracaten și 1 grup sulfhidril. Masa moleculară relativă teoretică BSA din secvența de aminoacizi este 66 399. Albumină este una dintre cele mai utilizate proteine ​​în cercetarea biologică în prezent. Acționează ca un antioxidant puternic în cultura celulară.

soluției

Pentru a măsura și a trasa o curbă standard a concentrației de proteine ​​versus absorbanță la 595 nm, trebuie pregătite o serie de diluții ale soluției stoc standard de proteine ​​BSA. Soluțiile stoc sunt folosite pentru a economisi timp de pregătire, pentru a conserva materialele, pentru a reduce spațiul de depozitare și pentru a îmbunătăți precizia cu care sunt pregătite soluțiile de lucru cu concentrație mai mică. Cea mai ușoară modalitate de a rezolva volumul de soluție stoc de proteine ​​necesar pentru fiecare diluție este utilizarea formulei C1V1 = C2V2.

Problemă: Construiți o curbă de calibrare trasând absorbanța medie pentru fiecare concentrație standard față de concentrația țintă de proteină. Concentrația soluției stoc (C1) este de 100 mg/L, iar volumul probei diluate este fixat la 2 ml (V2). Standardele proteice trebuie preparate în același tampon ca probele care urmează a fi testate. O curbă standard convenabilă poate fi realizată utilizând ser albumină bovină cu concentrații de 0, 10, 20, 30, 40, 50 mg/L.

Citând această pagină:

General, Eni. „SolCalc Help: Diluarea soluției de proteine.” EniG. Tabelul periodic al elementelor. KTF-Split, 30 aug. 2017. Web. . .