Editat de Nancy A. Moran, Universitatea din Arizona, Tucson, AZ și aprobat pe 8 mai 2008

luminiscenței

Caracteristici ale dezvoltării timpurii a gazdei în simbioza calamar-vibrio. Țesuturile organelor luminoase suferă o serie de evenimente de dezvoltare induse de simbiont (a se vedea textul pentru detalii), vizualizate aici prin microscopie electronică cu scanare (superioară) și microscopie confocală (inferioară). După agregarea în mucusul gazdei, la 4 ore, celulele V. fischeri marcate cu GFP (verzi) pătrund în țesuturile gazdei (roșu). La 12 h, simbionții induc pierderea epiteliului ciliar superficial care facilitează colonizarea, proces care este complet cu 96 h. Până la 18 ore, momentul în care au fost caracterizate răspunsurile transcripționale ale gazdei, bacteriile umple criptele căptușite cu epiteliu (roșu) și sunt foarte luminoase. Până la 48 de ore, simbionții induc umflarea celulelor criptă, un fenotip care nu este observat în colonizări de către mutanții luxA și luxI și care se corelează cu incapacitatea lor de a persista.

Profiluri transcripționale ale organelor ușoare expuse la diferite condiții de colonizare. Calmarul juvenil a fost fie lăsat neinoculat (apo), fie inoculat cu tulpini de tip sălbatic, luxA sau luxI de V. fischeri, în prezența sau absența AI adăugat. Similitudinile relative ale modelelor de exprimare a genelor în diferite condiții au fost mapate utilizând corelația medie a corelației de schimbare. Numerele de la noduri reprezintă procentajul de încredere din analiza bootstrapping (n = 1.000). Sunt indicate și nivelurile relative de luminescență produse în organele luminoase în fiecare condiție.

Localizarea EsLBP în cripte juvenile de organe ușoare folosind imunocitochimie confocală (ICC) (36). (A) La animalele aposimbiotice, anticorpii secundari marcați FITC au localizat EsLBP (verde) pe suprafețele apicale ale epiteliei criptelor. (B) La animalele simbiotice, epitelia a rămas etichetată; cu toate acestea, o mare cantitate de etichetare apăruse și în spațiile criptelor. Colorarea nu a fost rezultatul legării directe de către celulele V. fischeri a anticorpului EsLBP. (Inset) Când aceste bacterii (± 1 μm), contracolorate cu iodură de propidiu (roșu; Stânga Inset), au fost tratate cu anticorpul EsLBP, nu a existat nicio legare (Dreapta). (C) Controalele preimune ale criptelor aposimbiotice și simbiotice nu au arătat nici o colorare nespecifică. În toate imaginile, contracolorarea țesuturilor animale a inclus TOTO3 (albastru), care etichetează acizii nucleici; și falamina de rodamină (roșie), care etichetează actina filamentoasă. Numerotarea indică cele două cele mai mari dintre cele trei cripte din fiecare imagine; „Este” indică sacul de cerneală. Vezi detalii în textul SI.