Articolul de cercetare - Cercetare biomedicală (2018) Volumul 29, numărul 14

Detectarea sibutraminei în suplimentele alimentare pe bază de plante prin UHPLC/HRMS și UHPLC/MS-MS

1 Departamentul de Științe Farmaceutice, Facultatea de Farmacie, Universitatea de Medicină din Plovdiv, Plovdiv, Bulgaria

2 Departamentul de Farmacognozie și Chimie Farmaceutică, Facultatea de Farmacie, Universitatea de Medicină din Plovdiv, Plovdiv, Bulgaria

3 Universitatea de Medicină din Plovdiv, Colegiul de Medicină, Plovdiv, B-dul Vasil Aprilov. 15-A, Bulgaria

* Autor corespondent: Anna Mihaylova
Universitatea de Medicină din Plovdiv
Colegiul Medical, Plovdiv
B-dul Vasil Aprilov. 15-A, Bulgaria

Data acceptată: 17 iulie 2018

Vizitați pentru mai multe articole similare la Cercetări biomedicale

Abstract

Studii recente au anunțat că multe suplimente alimentare pentru scăderea în greutate conțineau sibutramină nedeclarată. Am analizat 10 eșantioane de suplimente alimentare pe bază de plante pentru slăbit (FS) prin HPLC/HRMS și UHPLC/MS-MS. Am stabilit că două dintre probele analizate conțineau sibutramină: 5 μg/per capsulă și respectiv 20 μg/per capsulă. Includerea ilegală a acestei substanțe în FS poate provoca efecte secundare grave și consecințe pe termen lung asupra sănătății. Cerințele de reglementare pentru FS ar trebui îmbunătățite pentru o protecție mai cuprinzătoare a consumatorilor. Necesitatea unui control obligatoriu al calității acestor produse și sensibilizarea publicului este incontestabilă.

Cuvinte cheie

Sibutramină, HPLC, Suplimente alimentare, Analize, Substanțe nedeclarate, WADA.

Introducere

sibutraminei

Figura 1: Sibutramină.

Material si metode

Materiale

Standard de referință: Clorhidrat de sibutramină monohidrat cu puritate> 98%.

Reactivi: Acetonitril pentru HPLC, (Sigma Aldrich), apă distilată.

Mostre: 10 suplimente alimentare pe bază de plante pentru scăderea în greutate. Probele au fost achiziționate din magazinele de suplimente alimentare, farmacii și online.

Metode

UHPLC/HRMS și UHPLC/MS-MS.

Instrumentaţie: „Accela UHPLC” cu detectare spectrală de masă HRMS „Q-Exative” cu interfață H-ESI („Thermo Fisher Scientific”, Waltham, MA, SUA) și coloană EVO C18 100 × 3 mm 2,6 μm; baie cu ultrasunete (Branson Wilmington, NC, SUA); aparat pentru apă ultra-pură: "Milli- Q", "Milipore" (Bedford, MA, SUA) și "Elga" (VWR International, Randor, PA, SUA).

pregătirea unei mostre

Conținutul unei capsule (sau a unei pilule măcinate) a fost introdus într-o eprubetă de polipropilenă de 15 ml și extras cu 10 ml, 80% acetonitril în apă și tratat cu ultrasunete și centrifugare. O parte alicotă din extract a fost filtrată printr-un filtru cu membrană de 0,45 μm și filtratul a fost diluat de 100 de ori cu 50% acetonitril/50% apă. Extractele obținute din probele prezentate au fost analizate până la 3 ore după prepararea lor.

Faza mobila

Faza mobilă A: 95% apă/5% acetonitril (pH = 4,3; 10 mm formiat de amoniu).

Faza mobilă B: 95% acetonitril/5% apă (pH = 4,3; 10 mm formiat de amoniu).

Gradient: 50% fază mobilă A/50% fază mobilă B.

Viteză: 600 μL/min.

Rezultate si discutii

Conform studiilor recente, majoritatea clienților consideră FS ca fiind produse sigure, chiar mai sigure decât medicamentele convenționale. Clienții nu se așteaptă să aibă efecte secundare din utilizarea FS și multe efecte benefice, cum ar fi: slăbirea sau controlul greutății, creșterea imunității și altele. Majoritatea clienților acceptă FS ca produse farmaceutice de înaltă calitate. Majoritatea clienților au încredere, de asemenea, în eticheta FS și în „Reclamațiile de sănătate” ale acestor produse.

De fapt, controlul analitic pentru FS nu este obligatoriu. Majoritatea cercetătorilor și specialiștilor în sănătate susțin că legislația privind FS este liberală și nu este suficient de strictă. Este de netăgăduit că, pentru protecția finală a consumatorilor, controlul calității ar trebui aplicat în toate etapele de procesare a FS-de la materia primă la produsul finit [19].

Rezultatele analizelor noastre au arătat că două din cele zece FS studiate conțineau ingredientul nedeclarat sibutramină-eșantionul nr. 5 și eșantionul nr. 8.

Figura 2 prezintă o cromatogramă extrasă de 1 μl extract al probei nr. 5 la intervalul de scanare al detectorului spectrometric de masă de la 279,68 la 280,68 m/z (mai sus) și spectrul de masă al vârfului cu timp de retenție 1,48 min (mai jos).

Figura 2: Cromatograma referinței sibutraminei și eșantionul nr. 5.

Figura 3 prezintă datele pentru eșantionul nr. 5 ca o comparație între cromatografia ionică totală în intervalul de scanare 200-300 m/z (mai sus), cromatograma extrasă a analitului (a doua linie), transmisiile de semnale electronice 280> 125 m/z și 280> 139 m/z, caracteristică pentru analit (linia trei și patru) și spectrul de masă ESI (mai jos), respectiv, la stânga - pentru soluția referentă (standard) și la dreapta - pentru proba analizată (eșantionul nr. 5 ).

Figura 3: Cromatograma sibutraminei standard (partea stângă) și a probei analizate nr. 5 (partea dreaptă).

Timpii de retenție și zonele vârfurilor respective sunt marcate pe vârfurile analitului (sibutramină cu masă monoizotopică 279.175 Da).

Rezultatele analitice permit concluzia că proba 5 conține 5 μg/per capsulă de sibutramină.

Figura 4 prezintă datele pentru eșantionul nr. 8 ca o comparație între cromatografia ionică totală în intervalul de scanare 200-300 m/z (mai sus), cromatograma extrasă a analitului (a doua linie), transmisiile de semnale electronice 280> 125 m/z și 280> 139 m/z, caracteristică pentru analit (linia trei și patru) și spectrul de masă ESI (mai jos), respectiv - la stânga - pentru soluția referentă (standard) și la dreapta - pentru proba analizată (eșantionul nr. 8 ).

Figura 4: Cromatograma sibutraminei standard și proba analizată nr. 8.

Timpii de retenție și zonele vârfurilor respective sunt marcate pe vârfurile analitului (sibutramină cu masă monoizotopică 279.175 Da).

Cantitatea de sibutramină din proba 8 a fost stabilită pentru a depăși 20 mg pe comprimat.

Medicamentele care conțin 10 mg sibutramină sub diferite denumiri comerciale au fost recomandate pentru administrarea o dată pe zi de către pacienții cu vârsta peste 16 ani.

Reclamele pe internet pentru eșantionul 8 afirmă că produsul este inovator, special formulat pentru a ajuta la procesul de slăbire fără a forța consumatorii să-și schimbe viața de zi cu zi. Mențiuni de sănătate - „produsul va reduce greutatea cu mai puține eforturi; efectul va fi permanent, deoarece acționează extrem de precis, într-un mod natural și sigur pentru organism. Efectul său este realizat datorită unei combinații speciale de extracte și ierburi absolut neutre legate sinergic.

Suprimă apetitul într-un mod natural. Aport recomandat: dimineața pe stomacul gol cu ​​un pahar de apă. Produs absolut sigur, fără efecte secundare; proba de supliment alimentar nr. 8 conține un ingredient nedeclarat în concentrație (> 20 mg), de două ori mai mare decât concentrația într-un medicament, care conține sibutramină (10 mg) (interzisă administrarea în 2010).

Mostrele 5 și 8 sunt FS extrem de periculoase și nu ar trebui comercializate în FS. Rezultatele analitice au confirmat tezele altor cercetători conform cărora numeroase suplimente alimentare conțin substanțe nedeclarate.

La nivel global, studiile au arătat că aproximativ 20% din suplimentele alimentare conțin substanțe nedeclarate. S-a stabilit că conținutul cantitativ și calitativ declarat nu corespundea frecvent formulării reale [20-27].

Concluzie

Majoritatea clienților consideră FS ca produse sigure fără efecte secundare și contraindicații. Clienții nu se așteaptă la prezența unui medicament în FS. Pentru un pacient cu boli cardiovasculare, aportul de FS pe bază de plante care conține sibutramină nedeclarată poate provoca consecințe grave și chiar fatale. Conform studiilor recente, mai mult de 20% din FS pe bază de plante conțin sibutramină nedeclarată. Am organizat un screening al diferitelor FS de scădere în greutate pentru sibutramină prin UHPLC/HRMS și UHPLC/MS-MS: 20% din probele analizate conțineau sibutramină nedeclarată. Necesitatea unui control mai bun al calității FS și conștientizarea publicului este incontestabilă.

Confirmare

Universitatea de Medicină din Plovdiv, doctorand de proiect 2.