1 Departamentul de Parodontologie, Laboratorul cheie de Medicină Orală, Institutul de Boli Orale din Guangzhou, Spitalul de Stomatologie al Universității de Medicină din Guangzhou, Guangzhou, China

sistemic

2 Departamentul de prostodontie, Școala de stomatologie Guanghua, Universitatea Sun Yat-sen, Laboratorul de cheie provincial de stomatologie din Guangdong, Guangzhou, China

3 Departamentul de Parodontologie, Școala de Medicină Dentară Guanghua, Universitatea Sun Yat-sen, Laboratorul cheie de medicină dentară din Guangdong, Guangzhou, China

4 Secția de laborator, Spitalul de stomatologie afiliat, Universitatea de Medicină din Sud, Guangzhou, China

5 Școala de medicină Savaid, Universitatea Academiei de Științe din China, Beijing, China

6 Departamentul de Parodontologie, Spitalul Dental Hangzhou, Școala de Medicină Savaid, Universitatea Academiei Chineze de Științe, Hangzhou, China

Abstract

Acest studiu a avut ca scop explorarea răspunsului imun parodontal și sistemic al gazdelor supraponderale la parodontită. Patruzeci de șoareci masculi C57 BL/6J au fost împărțiți în grupuri de dietă cu conținut ridicat (HF) sau cu conținut scăzut de grăsimi (LF) și hrăniți cu cele două diete, respectiv, timp de 8 săptămâni. Fiecare grup de dietă a fost apoi împărțit în parodontite (P) sau grupuri de control (C) (n = 10 per grup) pentru ligatură de 10 zile sau fals-ligare. Au fost măsurați parametrii legați de supraponderalitate, inclusiv greutatea corporală. Pierderea osoasă alveolară (ABL) a fost analizată morfometric și osteoclastele parodontale au fost colorate. Răspunsul imun parodontal incluzând numărul leucocitelor și macrofagelor și citokinele inflamatorii au fost analizate prin histologie și PCR cantitativă. Nivelurile serice de citokine și lipide au fost cuantificate utilizând teste de imuno-electrochiluminiscență, teste imunosorbente legate de enzime și biochimie. S-a constatat că grupul HF avea 14,4% creștere în greutate corporală în comparație cu grupul LF (P

1. Introducere

Obezitatea și parodontita, ambele ca boli inflamatorii cronice, au multe comorbidități sistemice, inclusiv boli cardiovasculare și diabet [1]. Studiile clinice în creștere indică legătura potențială dintre cele două boli [2], ceea ce i-ar putea pune pe cei cu comorbidități sistemice sau boli parodontale la un risc mai mare. De exemplu, indicele de masă corporală (IMC) ≥ 30 a fost legat de mai mult de 3 ori incidența parodontitei comparativ cu celulele IMC + (adică osteoclastele) în apropierea suprafeței osoase în jurul celui de-al doilea molar au fost numărate (200 ×) așa cum s-a descris anterior [ 29].

2.6. Analiza imunohistochimică a macrofagelor și citokinelor inflamatorii în periodonțiu
2.7. Analiza PCR cantitativă a IL-6 în Gingiva

Gingiva a fost dezbrăcată de maxilarul superior. ARN-ul total a fost extras, tradus invers și semiquantificat prin PCR cantitativ fluorescent (kit reactiv RNAiso Plus/PrimeScript RT/kit SYBR Premix Ex Taq PCR, Takara Bio, Otsu, Japonia) utilizând un sistem de analiză PCR în timp real (ViiA 7, aplicat Biosystems, Waltham, MA). Nivelul ARNm al IL6 a fost detectat, cu gliceraldehidă-3-fosfat dehidrogenază (GAPDH) ca martor endogen. Nivelurile relative de ARNm au fost calculate de

metodă. Primerii folosiți au fost menționați într-o platformă nonprofit (PrimerBank, Harvard University, Cambridge, MA) după cum urmează (5 ′ la 3 ′, înainte și invers). Gapdh, AGGTCGGTGTGAACGGATTTG și GGGGTCGTTGATGGCAACA; Il6, CTGCAAGAGACTTCCATCCAG și AGTGGTATAGACAGGTCTGTTGG.

2.8. Analiza serologică a insulinei, citokinelor inflamatorii și lipidelor

Insulina serică de post (Fins) (ALPCO, Windham, NH) și proteina C-reactivă (CRP) (sistem de cercetare și dezvoltare, Bio-Techne, Minneapolis, MN) au fost detectate de două kituri de testare imunosorbente legate de enzime foarte sensibile. Ser TNF-α și IL-1β, -6 și -10 au fost detectate prin imunoanalize electrochiluminescente (V-Plex, Meso Scale Discovery, Gaithersburg, MD). Lipidele serice, inclusiv trigliceridele (TG), colesterolul total (TC), colesterolul cu lipoproteine ​​cu densitate mică (LDLC) și colesterolul cu lipoproteine ​​cu densitate mare (HDLC) au fost cuantificate așa cum s-a descris anterior [30].

2.9. Statistici

A fost utilizat software-ul statistic (SPSS 17.0, IBM, Armonk, NY). Pentru proiectarea factorială, datele au fost analizate prin analiza de varianță în două direcții (ANOVA), cu dieta și ligatura ca efecte principale. Efectul simplu sau comparația între două eșantioane independente au fost analizate prin ANOVA unidirecțională (ajustarea Welch a fost utilizată cu varianțe inegale). Au fost testate modele multiple de regresie liniară între TNF parodontal-α și citokine sau lipide serice. Datele sunt prezentate ca mijloace ± abateri standard. Semnificația statistică a fost luată în considerare la P figura 1

, P + ) număr în parodonție decât cele din grupul C (P
(A)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)

Figura 4 a demonstrat imagini reprezentative pentru leucocite, macrofage și citokine în secțiuni parodontale în diferite grupuri de dietă și ligare.


3.4. Serul de niveluri de citokine

Indiferent dacă este legat sau nu, grupul HF a afișat TNF îmbunătățit-α și nivelurile IL-10 în ser față de cele din grupul LF (P
(A)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
(g)
(h)
(i)

), respectiv, a variantelor primului.

4. Discutie

Prezentul studiu a explorat mecanismul de legătură între supraponderalitate și parodontită din punctul de vedere al răspunsului imun afectat. În ciuda absenței ABL exacerbată sau a osteoclastogenezei prin supraponderalitate, starea a redus numărul de macrofage parodontale și a suprimat parțial pro- (adică TNF)-α și IL-6) și citokine antiinflamatorii (IL-10) în parodonțiu și circulație la șoareci parodontite. Schimbarea TNF parodontală-α nivelului a fost bine prezis de nivelurile serice de IL-6 și LDLC. Aceste descoperiri au dezvăluit o afectare a răspunsului imun sistemic și parodontal al persoanelor supraponderale la parodontită.

DIOW pare să afecteze răspunsul citokinelor mai puțin extins decât DIO, dat fiind că s-a constatat că DIO suprima TNF-α, CRP și nivelurile de IL-10 în ser și reduc IL-1β nivel în parodonțiu, în timp ce studiul actual nu [19, 23]. Răspunsul inflamator suprimat ar determina fagocitoza redusă, absorbția antigenului și producerea de molecule microbicide în celulele imune ale gazdei, care ar provoca leziuni directe ale țesuturilor, inclusiv degradarea matricei extracelulare și a ABL, de factori de virulență bacteriană [38, 39]. Spre deosebire de unele studii care au găsit ABL sau osteoclastogeneză îmbunătățită de DIO [19-24, 40], nu am observat aceeași consecință la șoarecii DIOW, posibil datorită afectării relativ ușoare a răspunsului imun. Cu toate acestea, consecința s-ar putea întâmpla în mod logic dacă supraponderabilitatea ar fi lăsată necontrolată. În acest context, intervențiile asupra răspunsului imun afectat de excesul de greutate ar putea fi mai semnificative pentru prevenirea comorbidităților lor, inclusiv parodontita.