O comparație între Carelia Rusă cu o incidență scăzută a diabetului de tip 1 și Finlanda cu o rată ridicată de incidență

  1. Anita Kondrashova, MD 12,
  2. Hanna Viskari, MD, doctorat 13,
  3. Petri Kulmala, MD, PHD 4,
  4. Anatoly Romanov, MD 2,
  5. Jorma Ilonen, MD, PHD 56,
  6. Heikki Hyöty, MD, PHD 13 și
  7. Mikael Knip, MD, doctorat 78
  1. 1 Departamentul de virologie, Facultatea de Medicină a Universității din Tampere, Tampere, Finlanda
  2. 2 Departamentul de Pediatrie, Universitatea din Petrozavodsk, Petrozavodsk, Rusia
  3. 3 Departamentul de Microbiologie Clinică, Centrul de Medicină de Laborator, Spitalul Universitar Tampere, Tampere, Finlanda
  4. 4 Departamentul de Pediatrie, Universitatea din Oulu, Oulu, Finlanda
  5. 5 Departamentul de Microbiologie Clinică, Universitatea din Kuopio, Kuopio, Finlanda
  6. 6 Laboratorul de imunogenetică, Departamentul de virologie, Universitatea din Turku, Turku, Finlanda
  7. 7 Spitalul pentru copii și adolescenți, Universitatea din Helsinki, Helsinki, Finlanda
  8. 8 Departamentul de Pediatrie, Spitalul Universitar Tampere, Tampere, Finlanda
  1. Adresați cererile de corespondență și retipărire către Mikael Knip, MD, dr., Spitalul pentru Copii Adolescenți, Universitatea din Helsinki, P.O. Caseta 281, FIN-00029 HUCH, Helsinki, Finlanda. E-mail: mikael.kniphus.fi

O comparație între Carelia Rusă cu o incidență scăzută a diabetului de tip 1 și Finlanda cu o rată de incidență ridicată

Abstract

OBIECTIV—Am căutat să studiem prevalența autoanticorpilor la diferiți antigeni de celule insulare în populația de fond din două țări vecine, cu o diferență de șase ori în incidența diabetului de tip 1.

autoimunitate

PROIECTAREA ȘI METODELE CERCETĂRII—Eșantioane de ser au fost obținute de la 3.652 de școlari nediabetici din Finlanda și de la 1.988 de școlari din Republica Kareliană adiacentă a Rusiei. Copiii din Karelian au fost împărțiți în trei grupuri (finlandezi/karelieni, ruși și alții) pe baza etniei etnice a mamei lor. Probele au fost analizate pentru identificarea anticorpilor cu celule insulare (ICA), autoanticorpi pentru insulină (IAA), anticorpi GAD (GADA) și proteina antigen 2 a insulinomului de tip tirozină fosfatază (IA-2A) și genotipuri HLA clasa II.

REZULTATE—Frecvența ICA, IAA și GADA nu a diferit semnificativ între copiii Karelian (3,5, 0,6 și respectiv 0,9%) și copiii finlandezi (2,8, 0,9 și respectiv 0,5%). În mod similar, frecvența autoanticorpilor multipli (≥2) a fost similară în ambele țări (0,5 față de 0,6%). Frecvența IA-2A a fost, totuși, de patru ori mai mare în Finlanda (0,6 vs. 0,15% în Karelia Rusă; P = 0,03). Nu au existat diferențe semnificative în prevalența autoanticorpilor între cele trei grupuri etnice din Carelia rusă. A existat o frecvență în scădere a GADA și a pozitivității pentru mai mulți autoanticorpi, împreună cu scăderea susceptibilității bolii conferite de HLA în rândul școlilor finlandezi.

CONCLUZII—Aceste date indică faptul că autoimunitatea celulelor β în rândul elevilor este la fel de frecventă în Karelia Rusă ca în Finlanda, deși incidența diabetului clinic de tip 1 este de șase ori mai mare în Finlanda. Cu toate acestea, spre deosebire de această tendință generală, IA-2A au fost mai frecvente în Finlanda. Deoarece IA-2A apar de obicei târziu în procesul preclinic, acest lucru sugerează că autoimunitatea progresivă a celulelor β este mai rară în Karelia Rusă.

  • DASP, Programul de standardizare a anticorpilor pentru diabet
  • GADA, anticorp GAD
  • IAA, autoanticorp de insulină
  • IA-2A, antigen 2 al insulinomului de tip tirozin fosfatază
  • ICA, anticorp cu celule insulare
  • JDFU, unitățile Fundației pentru diabet juvenil

Celulele β producătoare de insulină sunt distruse de un proces mediat imun în diabetul de tip 1 (1,2). Boala clinică este precedată de o perioadă subclinică, care se caracterizează prin apariția autoanticorpilor asociați bolii circulante. Acești autoanticorpi includ autoanticorpi cu celule de insulă (ICA) și autoanticorpi de insulină (IAA), precum și izoforma 65-kDa a anticorpilor GAD (GADA) și molecula antigenului 2 (IA-2A) al insulinomului de tip tirozină fosfatază (3,4) . Faza preclinică a diabetului de tip 1 poate dura chiar și> 10 ani. Apariția mai multor autoanticorpi și în special apariția IA-2As sunt asociate cu un proces progresiv de boală și prezic dezvoltarea diabetului de tip 1 evident (5).

PROIECTARE ȘI METODE DE CERCETARE—

Autoanticorpi asociați diabetului

Toate măsurătorile autoanticorpilor au fost efectuate în Laboratorul de Cercetare, Departamentul de Pediatrie, Universitatea din Oulu. Anticorpii cu celule insulare (ICA) au fost măsurați cu o metodă standard de imunofluorescență utilizând secțiuni din pancreasul grupului uman O înghețat. Titrurile punctului final al fiecărei probe au fost convertite în unități ale Fundației pentru diabet juvenil (JDFU) în raport cu un standard internațional de referință. Limita de detectare a fost de 2,5 JDFU. Testul a atins 100% sensibilitate și 98% specificitate în cel mai relevant atelier pentru standardizarea testului ICA (12). Toate probele inițial pozitive pentru ICA au fost retestate pentru confirmare. IAA-urile au fost analizate folosind un micro-test modificat de cel descris de Williams și colab. (13). Limita pentru pozitivitatea IAA (1,56 unități relative) a fost stabilită la percentila 99 într-o serie separată de 374 de copii și adolescenți finlandezi nediabetici. Această analiză a avut o sensibilitate la boală de 58% și o specificitate de 98% în cadrul atelierului din 2005 privind programul de standardizare a anticorpilor pentru diabet (DASP).

Au fost utilizate teste specifice de radioligand pentru a cuantifica nivelurile GADA și IA-2A așa cum este descris (14,15). Limita limită pentru pozitivitatea anticorpilor, care a fost stabilită la percentila 99 la> 370 copii și adolescenți nediabetici, a fost de 5,36 unități relative pentru GADA (n = 373) și 0,43 unități relative pentru IA-2A (n = 374). Sensibilitatea la boală a testului GADA a fost de 82% și specificitatea de 96%; caracteristicile corespunzătoare ale testului IA-2A au fost de 72 și respectiv 100% în cadrul atelierului DASP din 2005.

Toate eșantioanele cu niveluri IAA, GADA și IA-2A între percentilele 97 și 99,5 au fost reanalizate pentru a confirma statutul lor. Pozitivitatea autoanticorpului multiplu a fost definită ca pozitivitate pentru cel puțin doi anticorpi ai ICA, IAA, GADA și IA-2A.

Atât eșantioanele rusești, cât și cele finlandeze au fost analizate pentru IAA și IA-2A în același timp și în aceleași teste. Probele finlandeze au fost testate pentru ICA și GADA cu 2 ani mai devreme decât probele din Karelian rus. Același pancreas a fost folosit, totuși, ca substrat atât pentru eșantioanele finlandeze, cât și pentru cele kareliene rusești, iar curba standard pentru transformarea titrilor ICA în JDFU a rămas neschimbată când a fost retestată înainte de a începe analiza eșantioanelor kareliene rusești. Caracteristicile de performanță, în special specificitatea testului nostru GADA, au rămas foarte stabile în ultimii 3 ani, conform atelierelor DASP. Sensibilitatea la boală a testului GADA a fost de 80%, iar specificitatea bolii de 96% în 2003, cu valori corespunzătoare de 82 și respectiv 96%, în 2005. Timpul posibil de derivație a testelor pentru autoanticorpi moleculari este monitorizat continuu pe baza atât a curbelor standard, cât și a probelor interne de control al calității rulate pe fiecare placă.

Analize HLA

Alelele de clasa II legate de diabetul HLA au fost tipizate prin PCR și hibridizare pe bază de plăci de microtitrare cu sonde oligonucleotidice marcate cu lantanidă așa cum este descris (16). Eșantioane de la 1.977 de școlari (99%) din Carelia Rusă și de la 3.649 de școlari finlandezi (99,9%) au fost disponibile pentru genotipare. Genotipurile HLA au fost clasificate în patru grupuri de risc pentru diabetul de tip 1: 1) risc ridicat (DQA1 * 05-DQB * 02/* 0302); 2) risc moderat (DQB1 * 0302/x; x ≠ DQA1 * 05-DQB1 * 02, DQB1 * 0301, DQB1 * 0602 sau DQB1 * 0603); 3) risc scăzut (DQA1 * 05-DQB1 * 02/y, DQA1 * 03-DQB1 * 02/y, DQB1 * 0301/* 0302, DQB1 * 0302/* 0603; y ≠ DQA1 * 0201-DQB1 * 02, DQB1 * 0302, DQB1 * 0301, DQB1 * 0602 sau DQB1 * 0603); și 4) risc scăzut (toate celelalte genotipuri).

analize statistice

Frecvența ICA, IAA, GADA, IA-2A și cel puțin unul (≥1) și cel puțin doi (≥2) autoanticorpi (AAB) la 1.988 de școlari din Carelia Rusă (▪) și 3.652 de școlari din Finlanda (□) . Barele de eroare reprezintă 95% CI.