Structuri predominante care conțin sulfonă și indol ale receptorilor serotoninergici 5-HT6 (5-HT6R) liganzi găsiți anterior: singura structură non-sulfonilică și non-indolică din studiile clinice (1) [4]; cei mai activi agenți 5-HT6R care reprezintă familiile chimice găsite recent în screening-urile primare, adică 1 H-pirolo [3,2-c] chinolone (2) [11], N 1-azinilsulfonil-1 H-indoli (3 )) [12], spiro [pirolidin-3,3'-oxindoli] (4) [13] și pirano triciclic [2,3,4-cd] indoli [5] [14]; compușii cei mai avansați din studiile clinice privind boala Alzheimer (AD), adică Idalopirdina (6), Intepirdina (7) și SUVN-502 (8) [15].

molecule

S-au găsit structuri generale a două serii de 1,3,5-triazin hidantoină 5-HT6R agenți, grupa A și grupa B, cu „hituri” respective DJ-18 și 3 - ((4-amino-6- (4-metilpiperazină -1-il) -1,3,5-triazin-2-il) metil) -5-metil-5- (naftalen-2-il) imidazolidin-2,4-dionă (KMP-10).

Mod de andocare la 5-HT6R de Idalopirdină (A), SUVN-502 (B) și KMP-10 (C).

Efectul verapamilului (VL) și al liganzilor 5-HT6R asupra activității bazale a glicoproteinei P (Pgp) (bazale). Semnificație statistică (software ** p TM 6 care utilizează un ANOVA unidirecțional și compararea multiplă a lui Bonferroni post-hoctest. Compușii au fost examinați în trei exemplare.

Predicția in silico a siturilor de metabolism de către MetaSite 6.01 pentru KMP-10 și DJ-18. Cercul albastru marcat pe structurile funcționale ale grupului indică cea mai mare probabilitate de biotransformare. Culoarea roșie decolorată arată scăderea probabilității metabolismului.

Spectrele UPLC ale amestecurilor de reacție după incubarea 120 min a DJ-18 (a) și KMP-10 (b) cu microsomi hepatici umani (HLMs).

Efectul inhibitorului de referință (ketoconazol), KMP-10 și DJ-18 asupra activității CYP3A4 (a). Efectul chinidinei inhibitorului de referință, KMP-10 și DJ-18 asupra activității CYP2D6 (b). Compușii au fost examinați în trei exemplare.

Numărul de revertanți ai tulpinei Salmonella typhimurium TA100 expuși la mutageni de referință nonil-4-hidroxichinolin-N-oxid (NQNO, 0,5 uM) și 5-HT6R liganzi în două concentrații de 1 și 10 uM. Linia punctată marchează linia de bază a controlului mediu dublat (MCB). Compușii au fost examinați în trei exemplare.

Efectul medicamentului citostatic de referință doxorubicină (DX, 1 μM), DJ-18 (a) și KMP-10 (b) asupra viabilității liniei celulare HepG2. DMSO 1% în mediul de creștere celular (vehicul) a fost utilizat ca control. Semnificație statistică (software *** p p TM 6 folosind un ANOVA unidirecțional și testul post-hoc de comparație multiplă a lui Bonferroni. Compușii au fost examinați în patru exemplare.

Efectele administrării pe termen lung a KMP-10 asupra cantității de grăsime peritoneală (a, b) și greutatea ficatului (c, d) la șobolanii Wistar masculi. Rezultatele sunt medii ± SEM, n = 8. Comparațiile au fost efectuate prin testul t al unui student.

Modificări ale activității spontane după administrarea individuală (a) și paisprezece (b) și douăzeci (c) zile de KMP-10 la șobolani hrăniți cu o dietă plăcută. Rezultatele sunt medii ± SEM; n = 8, comparații față de grupurile de control alimentar excesiv tratate de vehicul (ANOVA cu două căi).

Abstract

1. Introducere

2. Rezultate și discuții

2.1. Modelare moleculară

2.2. Parametrii ADME-Tox In vitro

2.2.1. Analize de permeabilitate

Analiza permeabilității membranei artificiale paralele (PAMPA)

1.65 capacitate mai puternică de a pătrunde în membrana artificială decât cafeina de referință permeabilă, în timp ce KMP-10, cu un substituent naftil, a prezentat o

Permeabilitate de 4 ori mai slabă decât cofeina (Tabelul 2). Rezultatul pentru DJ-18 a confirmat datele noastre anterioare, în care ligandul 5-HT6R pe bază de triazine cu prezența clorobenzilului (Compusul 1 în referință [22]) a fost, de asemenea, prezentat ca un compus foarte permeabil în PAMPA (Pe = 23,6 × 10 −6 cm/s).

Test de permeabilitate cu utilizarea celulelor Caco-2

2.2.2. Afinitate cu glicoproteina P

2.2.3. Legarea proteinelor plasmatice

Fracția de 98,5% din warfarină legată de proteinele plasmatice (fb) a fost estimată și sa dovedit a fi similară cu rezultatele din literatura de specialitate [25,26]. În consecință, doar 1,5% din warfarina din fluxul sanguin a furnizat efectul său terapeutic. Derivatul testat de triazină KMP-10 a arătat un rezultat mult mai bun decât warfarina, deoarece fb-ul său a fost calculat la 84,5% (Tabelul 2). Mai mult, constanta de disociere a echilibrului calculată (KD) pentru KMP-10 a fost

De 10 ori mai mare decât cea pentru warfarină (112 vs. 9,50 µM, respectiv; Tabelul 2).

2.2.4. Stabilitate metabolică

De 8 ori (KMP-10) mai lung decât referința - medicamentul instabil verapamil (Tabelul 2). Proprietățile farmacocinetice bune observate corespund cu rezultatele liganzilor triazinici 5-HT6R testați anterior (cu o valoare CLint de asemenea sub 8,6 ml min -1 kg -1) [22]. În acest context, proprietățile KMP-10 au fost chiar mai bune decât cele ale celui mai activ agent 5-HT6R găsit mai devreme, derivatul timol-1,3,5-triazinic MST4 (4 în referință [22]) și în intervalul derivatului indolemetil triazinei (3 în referință [22]).

2.2.5. Interacțiuni medicamentoase - medicamente (DDI)

42% din activitatea CYP3A4, dar numai la cele mai mari concentrații ≥ 10 µM. Pe de altă parte, a fost observat un ușor efect de stimulare al CYP3A4 pentru KMP-10 la cea mai mare doză utilizată de 25 μM (Figura 7a). Ambii compuși au indus, de asemenea, ușor CYP2D6 (Figura 7b). Pe scurt, compușii au prezentat un risc foarte scăzut sau deloc de DDI în comparație cu inhibitorii de referință chinidină și ketoconazol, rezultate care se corelează cu datele anterioare obținute pentru alți liganzi 5-HT6R din grupul 1,3,5-triazin-metilpiperazinelor [22].

2.2.6. Testul Ames

2.2.7. Analiza hepatotoxicității

83% din control (Figura 9a). KMP-10 nu a prezentat niciun caracter hepatotoxic (Figura 9b). În general, luând în considerare rezultatele analizelor noastre de siguranță actuale și anterioare, toate 1,3,5-triazin-metilpiperazinele testate până acum din biblioteca noastră de compuși nu au prezentat activitate citotoxică slabă sau deloc [19,22].