Nadia Mahdad

Laborator de nutriție clinică și metabolică, Facultatea de Științe ale naturii și vieții, Universitatea din Oran, BP 1524 El M’Naouer, 31 000 Oran, Algeria

viață

Farida Ouda Boukortt

Laborator de nutriție clinică și metabolică, Facultatea de Științe ale naturii și vieții, Universitatea din Oran, BP 1524 El M’Naouer, 31 000 Oran, Algeria

Zakaria Benzian

Clinique Laribère, Centre Hospitalo-Universitaire CHU, 31 000 Oran, Algeria

Malika Bouchenak

Laborator de nutriție clinică și metabolică, Facultatea de Științe ale naturii și vieții, Universitatea din Oran, BP 1524 El M’Naouer, 31 000 Oran, Algeria

Abstract

fundal

Compoziția dietetică asociată cu activitatea fizică ar putea juca un rol semnificativ în îmbunătățirea sensibilității la insulină și reducerea riscului de diabet și a complicațiilor sale. Acest studiu a fost conceput pentru a investiga dacă controlul glicemic, redox și afectarea stării inflamatorii la pacienții cu diabet de tip 2 (T2D) au fost îmbunătățite după 90 (d90) și 180 (d180) zile de urmărire a sfaturilor nutriționale.

Metode

Au fost recrutați pacienți cu T2D (n = 85) în vârstă de 50 ± 8 ani (Femeie/Bărbat, 45/40), tratați numai cu antidiabetice orale (OAD), cu un indice de masă corporală (IMC) de 26 ± 2. La începutul studiului (d0), pacienții au fost instruiți să urmărească sfaturile nutriționale adaptate T2D și 30-45 de minute de mers pe zi. Testele au fost realizate la d90 și d180 de urmărire. Datele au fost comparate prin testul studentului „t” și coeficienții de corelație Pearson au fost determinați între parametrii biochimici și urmărirea sfaturilor nutriționale.

Rezultate

Hemoglobina glicată redusă (HbA1c), glucoza și colesterolul total (TC) au fost observate la pacienții cu T2D, la d90 și d180 comparativ cu d0. Substanțele reactive ale acidului tiobarbituric (TBARS) și nivelurile de hidroperoxid au fost mai mici la d90 și d180 decât d0. Oxidul azotic seric (NO) a fost redus la d180 comparativ cu d0 și d90. În eritrocite, activitatea superoxid dismutazei (SOD) a crescut cu 7% la d180 comparativ cu d0. Mai mult, activitatea glutation peroxidazei (GPx) a crescut (cuvinte cheie P: Diabet de tip 2, HbA1c, stare redox, rezistină, TNF-α

fundal

Abordările dietetice și stilul de viață au un potențial ridicat de prevenire primară a diabetului de tip 2 (T2D) [1]. Această boală este un proces cu mai multe etape care începe ca rezistență la insulină (IR), caracterizat prin incapacitatea organismului de a utiliza în mod corespunzător propria insulină și se termină cu epuizarea celulelor ß pancreatice producătoare de insulină, ducând astfel la hiperglicemie [2]. Mai mulți factori sunt implicați în dezvoltarea T2D, inclusiv obezitatea, istoricul familial, inactivitatea fizică și factorii moșteniți [2]. Mai mult, compoziția dietetică ar putea juca un rol semnificativ în îmbunătățirea sensibilității la insulină și reducerea riscului de diabet și a complicațiilor sale [3]. Într-adevăr, bolile cardiovasculare (BCV) sunt cauza majoră a morbidității și mortalității în T2D [4], știind că riscul cardiovascular este de trei ori mai mare în T2D decât în ​​populația generală [5]. În Algeria, prevalența T2D a fost de aproximativ 10% în 2010 [6].

În T2D, stresul oxidativ (OS) acționează ca un mediator al IR și progresia acestuia către intoleranță la glucoză și instalarea patologiei, contribuind posibil la creșterea mai multor complicații micro și macro-vasculare asociate cu diabetul [7]. În condiții de OS sever, leziunile celulare se produc cu scăderea funcției pancreatice a celulelor ß, care se datorează exprimării scăzute a enzimelor antioxidante [8].

Cu toate acestea, studiile clinice au arătat, de asemenea, că concentrațiile specifice de antioxidanți în plasmă și eritrocite la pacienții cu diabet zaharat sunt reduse [9]. Într-adevăr, activitățile superoxid dismutazei (SOD), glutation peroxidazei (GPx) și catalazei (CAT) care elimină speciile reactive de oxigen (ROS), au fost reduse la pacienții cu T2D. Astfel, îmbunătățirea stării de stres oxidativ poate contribui la gestionarea diabetului [10].

Inflamația este considerată a fi un regulator cheie al patogenezei T2D, dar mecanismul prin care acționează este încă necunoscut. Factorul de necroză tumorală (TNF-α) este o citokină inflamatorie implicată în tulburările metabolice, inclusiv obezitatea și IR. Mai multe studii au arătat niveluri ridicate de interleukină-6 (IL-6) și TNF-α în rândul persoanelor cu diabet diagnosticat clinic [11]. Mai mult, autorii au raportat niveluri crescute de rezistență în asociere cu obezitatea și IR în T2D [12], în timp ce un alt studiu nu a observat nicio modificare a nivelurilor de rezistență în astfel de condiții [13]. Datele au arătat că nivelurile de rezistență circulante au fost implicate în promovarea adipozității, dar nu au avut niciun efect asupra gradului IR. Aceste observații au sugerat că rolul rezistinei în patogeneza diabetului a rămas controversat [14].

Scopul prezentului studiu a fost de a investiga dacă TD2 a afectat controlul glicemic, starea redox și inflamatorie și îmbunătățirea acestora după 3 și 6 luni de urmărire a sfaturilor nutriționale.

Metode

tabelul 1

Caracteristicile pacienților cu diabet de tip 2

T2D
Raportul de sex (F/M)45/40
Vârstă (an)50 ± 8
Greutate (kg)70 ± 9
IMC (kg/m 2)26 ± 2
Circumferința taliei (cm)89 ± 8
Durata diabetului (an)9 ± 3
Glicemie (g/L)1,68 ± 0,65
HbA1c (%)9,8 ± 1,9
Colesterol total (mmol/L)4,16 ± 0,70
Trigliceride (mmol/L)1,15 ± 0,57
LDL-C (mmol/L)1,20 ± 0,33

Datele sunt medii ± SD pentru 85 de pacienți. IMC: indicele de masă corporală (greutate (kg)/înălțime (m 2)). HbA1c: hemoglobină glicată. LDL-C: colesterol lipoproteic cu densitate mică.

Acest studiu a fost aprobat de Comitetul Etic Instituțional pentru Cercetare pe Subiecte Umane de la Universitatea din Oran. Protocolul și scopul studiului au fost explicate pacienților, iar ancheta a fost efectuată cu acordul lor informat în scris.

Consilierea nutrițională a fost concepută pentru a acoperi nevoile nutriționale și pentru a menține calitatea vieții pacienților. Aportul zilnic recomandat de energie a fost de 2000 Kilocalorii (Kcal), cu 250 g de carbohidrați distribuiți în diferite mese pe zi, adică mic dejun, gustare de dimineață, prânz, gustare după-amiaza și cină. Sfaturile oferite au promovat consumul de făină de pește, fructe și legume (FFV). Consumul unui produs lactat la toate cele trei mese principale zilnic, legume (de 2 ori/zi), fructe (de 2-3 ori/zi), ulei de măsline (2 linguri de masă/zi), pâine integrală zilnic la fiecare masă, pește 2 –3 ori/săptămână), cu consum limitat de ouă (4-5 ouă/săptămână) și cantități moderate de carne roșie sau albă, surse de proteine ​​animale, la prânz și cină. Mai mult, pacienții au fost instruiți pentru 30 până la 45 de minute de mers pe jos pe zi. Urmărirea a fost efectuată la d90 și d180.

Înălțimea și greutatea au fost efectuate folosind stadiometru și echilibru (Scală de ponderare ZT 220, China). Circumferința taliei (WC) a fost măsurată la jumătatea distanței dintre marginea laterală inferioară a coastei și creasta iliacă (ombilicus).

Sângele a fost extras după un post de 12 ore peste noapte prin venipunctură antecubitală, la d0, d90 și d180, după sfaturile stilului de viață. Serul și eritrocitele au fost colectate prin centrifugare cu viteză redusă la 1000 g timp de 15 minute. Serul a fost conservat cu 0,1% acid etilen-diamin-acid tetraacetic-disodic (Na2-EDTA). Eritrocitele au fost spălate de două ori cu soluție de clorură de sodiu (NaCI) 0,9% și de patru ori cu apă rece. Lizatele eritrocitelor au fost conservate cu 0,5% dodecilsulfat de sodiu (SDS, Sigma, SUA). Lizatele serice și eritrocite au fost depozitate la -70 ° C până la teste.

Glucoza serică a fost măsurată prin test colorimetric enzimatic (kit Biocon, Germania). Insulina serică a fost determinată printr-un test imunosorbent legat de enzimă in vitro (ELISA) (kit Abcam, Cambridge, SUA) pentru măsurarea cantitativă a insulinei serice și a proinsulinei umane. HbA1c a fost estimat prin test spectofotometric cromatografic (kit Biocon, Germania). Evaluarea modelului homeostatic a indicelui de rezistență la insulină (HOMA-IR) (IR = insulină serică de post (μU/mL) × glucoză plasmatică de post (mmol/L)/22,5) a fost determinată [15].

Nivelurile colesterolului total seric (TC), trigliceridelor (TG) și acidului uric (UA) au fost măsurate prin teste colorimetrice enzimatice (truse Biocon, Germania). Albumina a fost determinată prin metoda colorimetrică (Kit Biolabo, Franța).

Peroxidarea lipidelor din ser și eritrocite a fost estimată prin măsurarea substanțelor reactive ale acidului tiobarbituric (TBARS) [16]. Complexul colorat format între malondialdehidă (MDA) și acid tiobarbituric (TBA) a avut absorbanță maximă la 532 nm. Concentrațiile serice de hidroperoxid au fost determinate prin măsurarea hidroperoxidului de chimen (EqCuOOH) prin compararea liniei drepte [17]. Absorbanta a fost masurata la 560 nm. Proteinele oxidate au fost estimate prin măsurarea concentrațiilor de carbonil, folosind 2,4-dinitrofenilhidrazină [18]. Absorbanta a fost masurata la 270 nm. Determinarea oxidului nitric (NO) a fost efectuată utilizând reactivul Griess (sulfamidă și n-naftil-etilen diamină) [19]. Serul a fost clarificat prin soluție de sulfat de zinc și azotatul (NO3) a fost apoi redus la nitrit (NO2) cu cadmiu, peste noapte, la 20 ° C, sub agitare. Serul a fost adăugat la reactivul Griess și incubat timp de 20 de minute la 24 ° C. Absorbanta a fost masurata la 540 nm.

Activitățile SOD, GPx (EC 1.11.1.9) și GRed (EC 1.6.4.2) în eritrocite au fost determinate de kituri (Sigma, SUA). Activitatea SOD a fost evaluată la 450 nm prin măsurarea dismutației radicalilor superoxizi generați de xantină oxidază și hipoxantină. Oxidarea glutationului (GSH) în glutationul oxidat (GSSG) a fost catalizată de GPx, care a fost apoi cuplat la reciclarea GSSG înapoi la GSH utilizând GRed și NADPH (fosfat redus de β-nicotinamidă adenină dinucleotidă) (Sigma, SUA). Activitatea a fost măsurată prin scăderea absorbanței cauzată de oxidarea NADPH la 340 nm utilizând un coeficient de extincție (ε mM) de 6,22 pentru NADPH. Catalaza (CAT) (EC. 1.11.1.6) catalizează descompunerea peroxidului de hidrogen în apă și oxigen la 240 nm [20].

TNF-α a fost testat prin setul de test imunometric enzimatic (EIA) (kitul Cayman Chemical’s ACE ™ EIA, SUA) permițând măsurători TNF-α în intervalul 0-250 pg/ml. Limita inferioară de detectare a fost de 3,9 pg/ml pentru TNF-α. Rezistina umană a fost determinată de EIA (kitul SPI Bio - Bertin Pharma Branch, Franța). Intervalul normal a fost stabilit pentru 8,1 ± 4,1 ng/ml.

analize statistice

Testul „t” studențesc non-parametric (STATISTICS 5.0.) A fost utilizat pentru a compara diferențele medii dintre d0, d90 și d180. Relațiile dintre toți parametrii biochimici și urmărirea sfaturilor nutriționale au fost determinate de coeficientul de corelație Pearson. Valorile P 2). Valoarea HbA1c a scăzut cu 40% la d90 și cu 20% la d180 comparativ cu d0. S-a observat o reducere semnificativă a concentrației de glucoză la d90 vs d0 (19%) și d180 vs d0 (12%), în timp ce această valoare a crescut cu 7% la d180 vs d90. Nu a existat nicio diferență semnificativă în insulinemie și HOMA-IR, după sfaturile privind stilul de viață (Tabelul 2).

masa 2

Parametrii clinici și biochimici la pacienții cu TD2 după sfaturi nutriționale