Colesterolul este cel mai frecvent steroid din organism. Este un important precursor al esterilor colesterolului, acizilor biliari și hormonilor steroizi. Este derivat din surse dietetice și sintetizat in vivo din acetil-CoA în ficat (site-ul principal) și în alte țesuturi (intestine, glande suprarenale și organe de reproducere). Măsurarea colesterolului poate oferi o indicație a funcției hepatice, a bolilor gastro-intestinale și a tulburărilor metabolice.

acizi grași

Fiziologie

Colesterolul apare în sânge ca parte a tuturor lipoproteinelor, dar fracțiunile de densitate scăzută (LDL) și lipoproteine ​​de densitate mare (HDL) au cele mai mari concentrații. LDL-urile sunt formate din lipoproteine ​​cu densitate foarte mică (VLDL) de lipoproteinele lipazei endoteliale. Aceștia sunt responsabili de transportul colesterolului către țesuturile periferice, prin legarea la receptorii LDL de pe aceste țesuturi, de ex. glandele suprarenale, ovarul și testiculele. HDL-urile sunt sintetizate în ficat și tractul gastro-intestinal și transportă colesterolul din țesuturi în ficat (așa-numitul transport „invers” al colesterolului, despre care se crede că este minim la câini din cauza lipsei unor enzime transferază). Odată ajuns în ficat, colesterolul poate fi încorporat în VLDL, sintetizat în acizi biliari, esterificat în acizi grași cu lanț lung sau eliminat în bilă. Bila este principala cale de excreție a colesterolului.

Rețineți că lipemia vizibilă într-o probă de sânge se datorează de obicei creșterii trigliceridelor, nu datorită creșterii colesterolului.

Metodologie

O varietate de teste enzimatice automate sunt utilizate pentru a cuantifica concentrația de colesterol din sânge. Majoritatea analizelor utilizate pentru determinarea concentrației de colesterol sunt colorimetrice, în timp ce altele utilizează electrozi de detectare a O2 pentru cuantificarea nivelurilor de colesterol. Metoda CHOD-PAP a colesterolului îndeplinește standardele pentru măsurarea concentrației de colesterol în ser sau plasmă stabilite de Institutul Național de Sănătate (NIH) și este metoda utilizată la Universitatea Cornell.

Tipul de reacție

Procedură utilizată la Universitatea Cornell

  • Metoda CHOD-PAP a colesterolului: În prima etapă a acestei reacții în trei etape, enzima colesterol esterază hidrolizează esterii colesterolului pentru a produce acizi grași liberi și colesterol. În etapa următoare, colesterol oxidaza catalizează oxidarea colesterolului la cholest-4-en-3-one. Sub acțiunea catalitică a peroxidazei, peroxidul de hidrogen produs în reacția anterioară oxidează cromoforul 4-aminofenazonă, în prezența fenolului, la compusul colorant roșu 4- (p-benzoquinonă-monoimino) -fenazonă. Modificarea intensității culorii la 500-550 nm este măsurată fotometric și este direct proporțională cu concentrația de colesterol din probă.

  • Reacțiile sunt prezentate mai jos:

ester de colesterol + H2O colesterol esteraza> colesterol + acizi grași

colesterol + O2 colesterol oxidaza> cholest-4-en-3-one + H2O2

2H2O2 + 4-aminofenazonă + fenol peroxidază> complex colorat + 4H2O

Unități de măsură

Concentrația colesterolului în ser a fost măsurată în mg/dl (unități convenționale) sau mmol/L (unități SI). Formula de conversie este prezentată mai jos:

mg/dL x 0,0259 = mmol/L
mmol/L x 38,91 = mg/dL

Exemple de considerații

Anticoagulant

Heparină sau EDTA

Tipul eșantionului

Ser sau plasmă. Câinii și pisicile ar trebui să postească în jur de 12 ore.

Stabilitate

Stabilitatea raportată a colesterolului este de 7 zile la 4 ° C, 3 luni la -15 până la -20 ° C (pe fișa de informații despre produs) și poate dura ani dacă se păstrează la -70 ° C.

Interferențe

  • Lipemie: Nu există interferențe cunoscute până la 2000 de unități (probele sunt de obicei ultracentrifugate pentru a elimina cât mai mult posibil chilomicroni).
  • Hemoliza: Poate crește în mod fals concentrațiile (indicele de hemoliză> 700 de unități).
  • Icterus: Poate scădea în mod fals concentrațiile (indicele icteric> 15 sau 14 mg/dL pentru bilirubina neconjugată și 16 mg/dL pentru bilirubina conjugată (pe fișa de produs).

Interpretarea testului

Creșterea concentrației (hipercolesterolemie)

Colesterolul ridicat se datorează de obicei numărului crescut de lipoproteine ​​bogate în colesterol, adică HDL și LDL. Deoarece VLDL conține o parte din colesterol (12%), colesterolul ridicat poate fi observat și cu concentrații foarte mari de VLDL. Chilomicronii au foarte puțin colesterol, astfel încât concentrațiile ridicate de colesterol nu sunt de obicei observate post-prandial. Cauzele frecvente ale colesterolului ridicat fără trigliceride la câini sunt sindromul nefrotic, hipotiroidismul și colestaza. Creșteri ale colesterolului și ale trigliceridelor la câini sunt observate în condiții metabolice, cum ar fi diabetul zaharat, hiperadrenocorticismul, pancreatita etc. (datorită VLDL ridicat). Colesterolul ridicat la pisici se datorează de obicei colestazei (nu toți câinii și pisicile colestatice vor avea colesterol ridicat). Colesterolul nu se măsoară în mod obișnuit la animalele mari, prin urmare știm mai puțin despre concentrațiile de colesterol la aceste specii.

Scăderea concentrației (hipocolesterolemie)

Colesterolul scăzut se poate datora scăderii numărului de lipoproteine ​​care conțin colesterol (LDL, HDL, VLDL) sau a conținutului scăzut de colesterol al acestor lipoproteine. Cele mai frecvente cauze ale colesterolului scăzut sunt enteropatia care pierde proteine ​​la câini și cancerul la câini și pisici.