Viabilitatea celulară a liniei celulare de melanom uveal OMM-1 a fost evaluată după tratament timp de 24 de ore cu Laminaria digitata (LD) fucoidan (a), Saccharina latissima (SL) fucoidans (b) și Fucus distichus subsp. fucoidani evanescens (FE) (c) extrasa cu SiAT2/3 sau SAT2/3 (SiAT2/3 = amestec enzimatic Cellic ® CTec2 sau 3 + Sigma-Aldrich alginat liasa (SigmALy), SAT2/3 = amestec enzimatic Cellic ® CTec2 sau 3 + alginat liasă exprimat din Sphingomonas sp. (SALy), ad = tratament acid și dializă). De asemenea, au fost invastigate trei fracții de cromatografie cu schimb de ioni SL (IEX) (SL_F1, SL_F2 și SL_F3). Viabilitatea celulară a fost analizată cu un test MTS (3- (4,5-dimetiltiazol-2-il) -5- (3-carboximetoxifenil) -2- (4-sulfofenil) -2H-tetrazoliu) și este prezentată ca medie și abaterea standard în raport cu controlul de 100%. Semnificația a fost determinată cu ANOVA; + p p p n ≥ 4; numărul de experimente independente). Niciun fucoidan nu a prezentat efecte antiproliferative.

droguri

Viabilitatea celulară a liniei celulare RPE umane ARPE-19 a fost evaluată după tratament timp de 24 de ore cu LD fucoidan (a), SL fucoidani (b) și FE fucoidani (c). Viabilitatea celulei a fost analizată cu un test MTS și este prezentată ca medie și deviație standard în raport cu controlul de 100%. Semnificația a fost determinată cu ANOVA; + p p n ≥ 4, numărul de experimente independente). Niciun fucoidan nu a prezentat efecte antiproliferative.

Supraviețuirea celulei OMM-1 după 30 de minute de tratament cu LD fucoidan (a), SL fucoidan (b) și FE fucoidan (c) și insultă de stres 24 h cu 1 mM H2O2, care a redus viabilitatea celulară la cel puțin 60% în toate cazurile. Viabilitatea a fost determinată cu testul MTS. Valorile sunt prezentate ca medie și deviație standard în raport cu un control netratat (100%). Semnificația a fost evaluată prin ANOVA; + p p p n ≥ 4, numărul de experimente independente).

Supraviețuirea celulelor ARPE-19 după 30 de minute de tratament cu LD fucoidan (a), SL fucoidan (b) și FE fucoidan (c) și insultă de stres de 24 de ore cu 0,5 mM TBHP (hidroperoxid de terț-butil), care a redus viabilitatea celulară sub 60% în toate cazurile. Viabilitatea a fost determinată cu testul MTS. Valorile sunt prezentate ca medie și deviație standard în raport cu un control netratat (100%). Semnificația a fost evaluată prin ANOVA; +/* p p p n ≥ 4, numărul de experimente independente).

VEGF secretat (factor de creștere endotelial vascular) al ARPE-19 după trei zile de incubație cu 1, 10, 50 și 100 µg/ml LD fucoidan (a), SL fucoidani (b) și FE fucoidani (c). Cantitatea de VEGF a fost determinată cu ELISA și normalizată la supraviețuirea celulei, făcând un coeficient de VEGF și viabilitatea celulară. 10–100 µg/mL LD_SiAT2 și 1–100 µg/mL SL_F2 și SL_F3 au scăzut semnificativ VEGF. Valorile semnificative au fost analizate cu ANOVA, * p p p n ≥ 4, numărul de experimente independente).

Abstract

1. Introducere

2. Rezultate

2.1. Caracterizarea chimică a fucoidanilor

250 până la peste 800 kDa, cu o distribuție generală largă estimată a mărimii (Tabelul 3). Fucoidanii din FE au fost în general în jur de 350 kDa cu o distribuție estimată de la 200-500 kDa, în timp ce extractele brute de SL și LD au fost mai mici, cu o dimensiune de aproximativ 250 și, respectiv, 320 kDa. Fracția SL_F1 conținea în mare parte alginate cu greutate moleculară mică, cu o dimensiune de aproximativ 10 kDa, un vârf care a fost prezent și în toate extractele brute. Cantitatea relativ mică de fucoidani a făcut dificilă determinarea dimensiunii în extractul SL_F1. Distribuția dimensiunilor a fost comparabilă și foarte mare pentru SL_F2 și F3 și a variat între 100 și 1000 kDa, cu o dimensiune calculată de peste 800 kDa.