Experimental
și terapeutic
Medicament

• Ultimii doi ani
• Total

• Anul trecut 0
• Total

• Luna trecuta
• Anul trecut
• Total

• Roma mea Lee
• Yi Eun Kim
• Jun Young Choi
• Parcul Jin Ju
• Hye Ryeong Kim
• Bo Ram Song
• Tânărul Whan Choi
• Kyung Mi Kim
• Cântec Hyunkeun
• Dae Youn Hwang

Acest articol este menționat în:

Abstract

Introducere

Pe baza rapoartelor anterioare, am emis ipoteza că EMfC induce efectele sale anti-obezitate prin reglarea metabolismului lipidelor. Prin urmare, am folosit șoareci cu obezitate indusă de dietă bogată în grăsimi pentru a evalua modificările acumulării de grăsimi și a profilurilor lipidice, precum și pentru a examina mecanismele de bază ale adipogenezei, lipogenezei și lipolizei.

Materiale și metode

Pregătirea CEM

Unul dintre autori (profesorul Young Whan Choi) a caracterizat eșantioanele de frunze de dud colectate din plantațiile din districtul Sangju din Coreea în octombrie 2015. Exemplarele de voucher (nr. De acces Mul-PDRL-1) au fost depuse în ierbarul din Pusan Universitatea Națională (Miryang, Coreea). Profesorul Sang Mong Lee de la Departamentul de Științe ale Vieții și Biochimie a Mediului, Universitatea Națională Pusan, a furnizat cu amabilitate C. militaris utilizat pentru fermentare. Federațiile Cooperative Agricole Jeongeup pentru Agricultura Viermilor de Mătase (Jeongeup, Coreea) au furnizat pulberea de pupă de vierme de mătase.

Proiectarea experimentului pe animale

Șoareci masculi C57BL/6 de opt săptămâni au fost achiziționați de la Samtako Bio-Korea Inc. (Osan, Coreea), și a oferit acces ad libitum la apă și o dietă standard iradiată de chow (Samtako Bio-Korea Inc.). În timpul experimentului, șoarecii au fost menținuți într-o stare liberă de agenți patogeni în cadrul unui ciclu de lumină strict (luminile aprinse la 08:00 h și oprite la 20:00 h) la 23 ± 2 ° C și 50 ± 10% umiditate relativă. Toți șoarecii C57BL/6 au fost manipulați la Universitatea Națională Pusan-Laboratory Animal Resources Center, acreditat de Korea Food and Drug Administration (FDA; Unitatea acreditată nr. 000231) și AAALAC International (Unitatea acreditată nr. 001525).

Comitetul de etică animală al Universității Naționale Pusan ​​(PNU-2017-1519) a aprobat protocolul pentru studiul pe animale. Toate animalele au fost aclimatizate pe o dietă normală (D12450K; Research Diets, New Brunswick, NJ, SUA) timp de 1 săptămână. Șoarecii C57BL/6 au fost apoi împărțiți în 4 grupuri de studiu (7 șoareci/grup): (1) Grupul de control alimentat cu o dietă normală (fără grup de tratament), (2) grupul hrănit cu HFD (dietă bogată în grăsimi) plus vehicul + 1% DMSO) (HFD + grup tratat cu vehicul), (3) grup alimentat HFD plus 10 mg/kg Orlistat (Sigma-Aldrich Co.) (grup tratat HFD + OT) și (4) grup alimentat HFD plus 50 mg/kg EMfC (Grup tratat cu HFD + EMfC). Timp de 12 săptămâni, șoarecii din toate grupurile de tratament HFD au consumat HFD conținând 60% kcal de grăsime achiziționată de la Research Diets (nr. Cat. D12492; Research Diets, Inc., New Brunswick, SUA). După 24 de ore de la tratamentul EMfC final, toți șoarecii au fost eutanasiați folosind CO 2 gaz, după care probele de țesut au fost achiziționate și depozitate în tuburile Eppendorf la -70 ° C până la testare.

Măsurarea greutății corporale, a aportului alimentar și a greutății organelor

De-a lungul perioadei experimentale, greutatea corporală a șoarecilor tratați cu Vehicle, OT sau EMfC a fost măsurată zilnic la ora 10:00 folosind o balanță electronică (nr. Cat. AD-2.5; Mettler Toledo, Greifensee, Elveția) conform ghidurilor KFDA . În plus, greutățile ficatului și ale organelor abdominale colectate de la șoarecii sacrificați C57BL/6 au fost determinate folosind aceeași metodă utilizată pentru a măsura greutatea corporală. Aportul de furaje a fost măsurat în același timp o dată pe săptămână în timpul perioadei de studiu, utilizând un bilanț chimic (Mettler Toledo, Elveția).

Analiza biochimică serică

După 12 săptămâni de hrănire a dietelor experimentale, sângele a fost colectat din venele abdominale ale tuturor șoarecilor C57BL/6 după post timp de 18 ore. Probele de sânge au fost incubate timp de 30 de minute la temperatura camerei în tuburi de separare a serului (BD Biosciences, Franklin Lakes, NJ, SUA). Serul a fost obținut prin centrifugare la 1.500 × g timp de 15 min. Glucoza serică, TC (colesterol total), TG (trigliceridă), colesterolul cu lipoproteine ​​cu densitate înaltă (HDL) și nivelurile colesterolului cu lipoproteine ​​cu densitate mică (LDL) au fost analizate de analizorul chimic automat (BS-120 Chemistry Analyzer; Mindray, Shenzhen China). În plus, serul a fost analizat pentru identificarea fosfatazei alcaline (ALP), a alaninei aminotransferazei (ALT), a aspartatului aminotransferazei (AST), a azotului ureic din sânge (BUN) și a creatininei (Crea) utilizând un analizor biochimic automat (BS-120; Mindray) . Toate testele au fost efectuate în duplicat folosind ser proaspăt.

Analiza histopatologică

Țesuturile de ficat și grăsime disecate de la șoareci din toate grupurile de subgrupuri au fost fixate în formaldehidă tamponată neutră 10% (pH 6,8) peste noapte. Țesutul hepatic deshidratat a fost apoi încorporat în parafină. Apoi, o serie de secțiuni de ficat și grăsime (4 μm) au fost tăiate din țesuturile încorporate în parafină folosind un microtom Leica (nr. Cat. DM500; Leica Microsystems, Bannockburn, IL, SUA). Aceste secțiuni au fost apoi deparafinate cu xilen (nr. Cod 8587-4410; Daejung, Gyeonggi-do, Coreea), rehidratate cu etanol gradat (concentrații în scădere de 100-70%) și în cele din urmă spălate cu apă distilată. Diapozitivele cu secțiuni hepatice au fost colorate cu hematoxilină (nr. Cat. MHS16) și eozină (nr. Cod HT110332; ambele Sigma-Aldrich Co.), spălate cu dH20 și modificările patologice au fost evaluate folosind Suita de aplicații Leica ( Leica Microsystems).

Analiza reacției în lanț a transcripției cantitative a polimerazei (RT-qPCR)

Analiza Western blot

Analiza semnificației statistice

figura 1.

Figura 2.

Figura 3.

Figura 4.

Figura 5.

Exprimarea proteinelor asociate lipolizei în țesuturile hepatice. (A) Analiza Western blot a măsurat fosforilarea sau expresia mai multor proteine ​​asociate lipolizei, incluzând (B) perilipina, p-perilipina, HSL, p-HSL și ATGL. Intensitatea fiecărei benzi a fost determinată folosind un densitometru imagistic, iar nivelurile relative ale celor patru proteine ​​au fost calculate pe baza intensității actinei. Cinci până la șase șobolani per grup au fost analizați în triplicat prin Western Blot. Datele sunt prezentate ca medie ± deviația standard a trei replici. * P 1

Haslam DW și James WP: Obezitate. Lancet. 366: 1197–1209. 2005. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

După JP și Lemieux I: Obezitate abdominală și sindrom metabolic. Natură. 444: 881-887. 2006. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

Colaborarea factorului de risc NCD (NCD-RisC): Tendințe la nivel mondial în ceea ce privește diabetul din 1980: O analiză combinată a 751 de studii bazate pe populație cu 4,4 milioane de participanți. Lancet. 387: 1513-1530. 2016. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

Maguire T și Haslam D: Epidemia obezității și gestionarea acesteia. Matthew Wright: Pharmaceutical Press; Londra: pp. 264–267. 2010

Pittler MH, Schmidt K și Ernst E: Evenimente adverse ale suplimentelor alimentare pe bază de plante pentru reducerea greutății corporale: revizuire sistematică. Obes Rev. 6: 93–111. 2005. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

Gunjal S, Ankola AV și Bhat K: Activitate antibacteriană in vitro a extractului etanolic de Morus alba frunze împotriva agenților patogeni parodontali. Indian J Dent Res. 26: 533-536. 2015. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

Raman ST, Ganeshan AK, Chen C, Jin C, Li SH, Chen HJ și Gui Z: In vitro in vivo activitatea antioxidantă a flavonoidului extras din fructele de dud (Morus alba L.). Pharmacogn Mag. 12: 128–133. 2016. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

Wang Y, Xiang L, Wang C, Tang C și He X: Efecte antidiabetice și antioxidante și fitochimicale ale fructelor de dud (Morus alba L.) extract îmbunătățit polifenol. Plus unu. 8: e711442008. Vizualizați articolul: Google Scholar

Jo SP, Kim JK și Lim YH: Efecte antihiperlipidemice ale stilbenoizilor izolați din Morus alba la șobolani hrăniți cu o dietă bogată în colesterol. Alimente Chem Toxicol. 65: 213-218. 2014. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

El-Beshbishy HA, Singab AN, Sinkkonen J și Pihlaja K: Efecte hipolipidemice și antioxidante ale Morus alba Suplimentarea fracțiilor de coajă de rădăcină de L. (dud egiptean) la șobolanii hrăniți cu colesterol. Life Science. 78: 2724-2733. 2006. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

Eo HJ, Park JH, Park GH, Lee MH, Lee JR, Koo JS și Jeong JB: Activitate antiinflamatoare și anticanceroasă a dudului (Morus alba L.) scoarță de rădăcină. BMC Complement Altern Med. 14: 2002014. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

Chan EW, Lye PY și Wong SK: Fitochimie, farmacologie și studii clinice de Morus alba. Chin J Nat Med. 14: 17–30. 2016. PubMed/NCBI

Kobayashi Y, Miyazawa M, Kamei A, Abe K și Kojima T: Efecte amelioratoare ale dudului (Morus alba L.) frunze de hiperlipidemie la șobolani hrăniți cu o dietă bogată în grăsimi: inducerea oxidării acizilor grași, inhibarea lipogenezei și suprimarea stresului oxidativ. Biosci Biotechnol Biochem. 74: 2385–2395. 2010. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

Yang SJ, Park NY și Lim Y: Efect anti-adipogen al extractului de etanol din frunze de dud în adipocite 3T3-L1. Nutr Res Pract. 8: 613–617. 2014. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

Ann JY, Eo HY și Lim YS: Frunze de dud (Morus alba L.) ameliorează lipogeneza hepatică indusă de obezitate, fibroza și stresul oxidativ la șoarecii alimentați cu diete bogate în grăsimi. Gene Nutr. 10: 462015. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

Naowaboot J, Pannangpetch P, Kukongviriyapan V, Prawan A, Kukongviriyapan U și Itharat A: Extractul de frunze de dud stimulează absorbția glucozei și translocația GLUT4 în adipocitele de șobolan. Sunt J Chin Med. 40: 163–175. 2012. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

Sugimoto M, Arai H, Taura Y, Murayama T, Khaengkhan P, Nishio T, Ono K, Ariyasu H, Akamizu T, Ueda Y și colab.: Frunza de dud îmbunătățește profilul de expresie al adipocitokinelor prin inhibarea stresului oxidativ în țesutul adipos alb din șoareci db/db. Ateroscleroza. 204: 388-394. 2009. Vizualizați articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

Sung GH, Hywel-Jones NL, Sung JM, Luangsa-Ard JJ, Shrestha B și Spatafora JW: Clasificare filogenetică a Cordyceps iar ciupercile clavicipitacee. Stud Mycol. 57: 5–59. 2007. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

De Silva DD, Rapior S, Sudarman E, Stadler M, Xu J, Alias ​​SA și Hyde KD: Metaboliți bioactivi din macrofungi: Etnofarmacologie, activități biologice și chimie. Scafandri fungici. 62: 1–40. 2013. Vezi articolul: Google Scholar

De Silva DD, Rapior S, Fons F, Bahkali AH și Hyde KD: Ciuperci medicinale în terapiile de susținere a cancerului: o abordare a efectelor anticanceroase și a mecanismelor putative de acțiune. Scafandri fungici. 55: 1–35. 2012. Vezi articolul: Google Scholar

Pao HY, Pan BS, Leu SF și Huang BM: Cordycepin a stimulat steroidogeneza în celulele tumorale Leydig de șoarece MA-10 prin calea proteinei kinazei C. J Agric Food Chem. 60: 4905–4913. 2102. Vizualizați articolul: Google Scholar

Kim JR, Yeon SH, Kim HS și Ahn YJ: Activitate larvicidă împotriva Plutella xylostella de cordycepin din corpul fructifiant al Cordyceps militaris. Pest Manag Sci. 58: 713–717. 2012. Vezi articolul: Google Scholar

Ramesh T, Yoo SK, Kim SW, Hwang SY, Sohn SH, Kim IW ​​și Kim SK: Cordycepin (3′-deoxyadenosine) atenuează stresul oxidativ legat de vârstă și ameliorează capacitatea antioxidantă la șobolani. Exp Gerontol. 47: 979–987. 2012. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

Guo P, Kai Q, Gao J, Lian ZQ, Wu CM, Wu CA și Zhu HB: Cordycepin previne hiperlipidemia la hamsterii hrăniți cu o dietă bogată în grăsimi prin activarea proteinei kinazei activate de AMP. J Pharm Sci. 113: 395-403. 2010. Vizualizați articolul: Google Scholar

Kim SS, Lim KS, Kim HJ, Chong MS, Cho HE, Choi YH și colab.: Efectele extraselor din cultura mixtă cu Tricholoma Matsutake miceliu și Cordyceps Militaris miceliu pe glucoza tânără la șobolanii diabetici induși de streptozotocină. Coreeană J Orient Physiol Pathol. 22: 365–370. 2008.

Hung YP și Lee CL: Efect mai mare de fibroză anti-hepatică a cordyceps militaris-produs fermentat cultivat cu apă adâncă a oceanului prin inhibarea factorilor proinflamatori și a expresiilor legate de fibroză. Droguri Mar. 15 (pii): E1682017. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

Lee MR, Kim JE, Yun WB, Choi JY, Park JJ, Kim HR, Song BR, Choi YW, Kim KM și Hwang DY: Efect lipolitic al noilor extracte din dud (Morus alba) frunze fermentate cu Cordyceps militaris în adipocitele primare derivate de la șobolani SD. Lab Anim Res. 33: 270–279. 2017. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

Livak KJ și Schmittgen TD: Analiza datelor privind expresia genei relative utilizând PCR cantitativă în timp real și metoda 2 (-Delta Delta C (T)). Metode. 25: 402-408. 2001. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

Hofbauer KG, Nicholson JR și Boss O: Epidemia de obezitate: tratamente farmacologice actuale și viitoare. Annu Rev Pharmacol Toxicol. 47: 565-592. 2007. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

Sharma B și Henderson DC: Sibutramină: Statutul actual ca medicament anti-obezitate și perspectivele sale viitoare. Expert Opin Pharmacother. 9: 2161–2173. 2008. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

Lean ME: Fiziopatologia obezității. Proc Nutr Soc. 59: 331–336. 2000. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

Apostolopoulou M, Savopoulos C, Michalakis K, Coppack S, Dardavessis T și Hatzitolios A: Vârstă, greutate și obezitate. Absolvire. 71: 115–119. 2012. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

Morimoto C, Kameda K, Tsujita T și Okuda H: Relații între lipoliză indusă de diferiți agenți lipolitici și lipaza hormonal-sensibilă în celulele adipoase de șobolan. J Lipid Res. 42: 120–127. 2001. PubMed/NCBI

Bray GA: Tratamentul medicamentos al obezității. Rev. Endocr Metab Disord. 2: 403–418. 2001. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

Mayer MA, Höcht C, Puyó A și Taira CA: Progrese recente în farmacoterapia obezității. Curr Clin Pharmacol. 4: 53–61. 2009. Vizualizați articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

Vázquez-Vela ME, Torres N și Tovar AR: țesutul adipos alb ca organ endocrin și rolul său în obezitate. Arch Med Res. 39: 715–728. 2008. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

Schoonjans K, Staels B și Auwerx J: Receptorii activați cu proliferatorul peroxizomului (PPARS) și efectele acestora asupra metabolismului lipidic și diferențierea adipocitelor. Biochim Biophys Acta. 1302: 93–109. 1996. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

Rosen ED, Walkey CJ, Puigserver P și Spiegelman BM: Reglarea transcripțională a adipogenezei. Gene Dev. 14: 1293–1307. 2000.PubMed/NCBI

Kliewer SA și Willson ™: receptorul nuclear PPARgamma - mai mare decât grăsimile. Curr Opin Genet Dev. 8: 576-581. 1998. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

Spiegelman BM: PPAR-gamma: Regulator adipogen și receptor de tiazolidinedionă. Diabet. 47: 507–514. 1998. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

Boizard M, Le Liepvre X, Lemarchand P, Foufelle F, Ferré P și Dugail I: Expresia excesivă legată de obezitate a genei acidului gras sintază în țesutul adipos implică factori de transcripție a proteinelor care leagă elementele de sterol. J Biol Chem. 273: 29164–29171. 1998. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

Coe NR și Bernlohr DA: Proprietăți și funcții fiziologice ale proteinelor intracelulare care leagă acidul gras. Biochim Biophys Acta. 1391: 287-306. 1998. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

Zimmermann R, Strauss JG, Haemmerle G, Schoiswohl G, Birner-Gruenberger R, Riederer M, Lass A, Neuberger G, Eisenhaber F, Hermetter A și Zechner R: Mobilizarea grăsimilor în țesutul adipos este promovată de triglicerid lipaza adipoză. Ştiinţă. 306: 1383–1386. 2004. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

Haemmerle G, Lass A, Zimmermann R, Gorkiewicz G, Meyer C, Rozman J, Heldmaier G, Maier R, Theussl C, Eder S și colab. Ştiinţă. 312: 734-737. 2006. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

Ahmadian M, Duncan RE, Varady KA, Frasson D, Hellerstein MK, Birkenfeld AL, Samuel VT, Shulman GI, Wang Y, Kang C și Sul HS: Supraexprimarea adiposă a desnutrinului promovează utilizarea acizilor grași și atenuează obezitatea indusă de dietă. Diabet. 58: 855–866. 2009. Vizualizați articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

Tansey JT, Sztalryd C, Hlavin EM, Kimmel AR și Londos C: Rolul central al perilipinei a în metabolismul lipidelor și lipoliza adipocitelor. IUBMB Life. 56: 379–385. 2004. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

Marcelin G și Chua S Jr: Contribuții ale metabolismului lipidelor adipocite la conținutul de grăsime corporală și implicații pentru tratamentul obezității. Curr Opin Pharmacol. 10: 588-593. 2010. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

Articole similare

Martie-2019
Volumul 17 Numărul 3

Tipărire ISSN: 1792-0981
ISSN online: 1792-1015

• Efect anti-obezitate al cătinei (Hippohae rhamnoides L) asupra șoarecilor obezi C57BL6N induși de dietă
• Extractul de flori Butea monosperma reduce parțial obezitatea indusă de dietă bogată în grăsimi în experiment
• Atorvastatina ajută la conservarea funcției celulelor β pancreatice la șoarecii obezi C57BL6 J și efectul este
• Efectul antiobezității extractului de usturoi fermentat de Lactobacillus plantarum BL2 la obezii induse de dietă
• Efect anti-obezitate și activitate antioxidantă în produse cu grăsimi alimentate cu șoareci alimentate cu hrișcă fermentate