José Illnait

1 Centrul de produse naturale, Centrul Național de Cercetare Științifică, Havana, Cuba.

efectele

Iván Rodríguez

2 Centrul de cercetare medicală chirurgicală, Centrul Național de Cercetare Științifică, Havana, Cuba.

Sarahí Mendoza

1 Centrul de produse naturale, Centrul Național de Cercetare Științifică, Havana, Cuba.

Yolanda Fernández

2 Centrul de cercetare medicală chirurgicală, Centrul Național de Cercetare Științifică, Havana, Cuba.

Rosa Mas

1 Centrul de produse naturale, Centrul Național de Cercetare Științifică, Havana, Cuba.

Mirtha Miranda

2 Centrul de cercetare medicală chirurgicală, Centrul Național de Cercetare Științifică, Havana, Cuba.

Iisus Piñera

2 Centrul de cercetare medicală chirurgicală, Centrul Național de Cercetare Științifică, Havana, Cuba.

Julio César Fernández

1 Centrul de produse naturale, Centrul Național de Cercetare Științifică, Havana, Cuba.

Meilis Mesa

2 Centrul de cercetare medicală chirurgicală, Centrul Național de Cercetare Științifică, Havana, Cuba.

Lilia Fernández

1 Centrul de produse naturale, Centrul Național de Cercetare Științifică, Havana, Cuba.

Daisy Carbajal

1 Centrul de produse naturale, Centrul Național de Cercetare Științifică, Havana, Cuba.

Rafael Gámez

1 Centrul de produse naturale, Centrul Național de Cercetare Științifică, Havana, Cuba.

Abstract

Context/Scopuri

Boala hepatică grasă nealcoolică (NAFLD) este strâns legată de rezistența la insulină și variază de la o evoluție benignă la fibroză hepatică și ciroză. Managementul NAFLD implică în principal modificarea dietei și pierderea în greutate. Deși nu este disponibilă nicio intervenție farmacologică cu succes, terapiile alternative pentru tratarea NAFLD au arătat rezultate promițătoare. Studiile experimentale au arătat că D-002, un amestec de alcooli din ceară de albine cu efecte antioxidante, este hepatoprotector. Scopul acestui studiu a fost investigarea eficacității și siguranței D-002 la pacienții cu NALFD.

Metode

Cincizeci de pacienți cu NAFLD au fost randomizați pentru a primi un placebo sau D-002 (100 mg/zi) timp de 24 de săptămâni. Obiectivul primar a fost o reducere semnificativă a infiltrării grăsimilor hepatice detectată cu ultrasunete comparativ cu un placebo. Obiectivele secundare au fost reduse în indicele de evaluare a modelului homeostatic (HOMA), nivelurile de insulină, enzimele hepatice serice, creșterea stării de antioxidant total plasmatic (TAS) și îmbunătățirea simptomelor clinice față de primitorii placebo.

Rezultate

La randomizare, toți indicatorii au fost comparabili în ambele grupuri. La finalizarea studiului, șapte (28,0%) pacienți cu D-002, dar niciunul dintre pacienții care au primit placebo, au prezentat un model normal de ecou hepatic la ultrasunografie (p Cuvinte cheie: D-002, Ceară de albine, Boală hepatică grasă nealcoolică, Ficat gras, Rezistență la insulină

INTRODUCERE

Boala hepatică grasă nealcoolică (NAFLD), o afecțiune hepatică frecventă, se caracterizează prin acumularea excesivă de grăsime hepatică în absența unui consum semnificativ de alcool și a fost asociată cu rezistența la insulină (IR) [1-4]. Din punct de vedere histologic, NAFLD reprezintă acumularea de grăsime, în principal trigliceridele (TG), în citoplasma hepatocitelor (5% până la 10% din greutatea organelor) [4,5].

Prevalența NAFLD variază de la 10% la aproximativ 83%, în funcție de populație și de criteriile de cercetare, și este supra-reprezentată la diabetici, obezi și femele [1-4], deși poate fi prezentă și la subiecții nonobezi și nondiabetici . [6]. NAFLD urmează, în general, un curs benign și rămâne stabil timp de ani de zile, dar multe cazuri nediagnosticate pot evolua spre steatohepatită nealcoolică (NASH), fibroză hepatică și ciroză hepatică criptogenă [1-4].

Managementul NAFLD implică modificarea dietei și pierderea în greutate [6-9]. Deși unele tratamente (sensibilizatori la insulină, antioxidanți, medicamente care scad lipidele și acid ursodeoxicolic, printre altele), s-au dovedit benefice la pacienții cu NFALD, nu este disponibilă nicio intervenție farmacologică cu succes [1,6-12].

În căutarea unor terapii alternative eficiente și sigure, au fost investigate efectele unor produse naturale asupra NAFLD. Utilizarea acizilor grași polinesaturați n-3 (PUFA) (2 g/zi) din uleiurile de focă s-a dovedit că îmbunătățește în siguranță și eficient simptomele și normalizează caracteristicile ultrasonografice, precum și îmbunătățește nivelurile serice de alanină aminotransferază (ALT) și de lipide [13].

De asemenea, p olicosanol, un amestec de alcooli cu greutate moleculară mare, izolați din ceara de trestie de zahăr, a tratat în mod eficient IR la pacienții hiperlipidemici cu afecțiuni hepatice grase, scăzând semnificativ indicele de evaluare a modelului homeostatic (HOMA) și colesterolul total (TC) și colesterolul lipoproteic cu densitate mică. Nivelurile (LDL) [14], în concordanță cu faptul că octacosanolul, componenta sa principală, atenuează metabolismul perturbat al speciilor de oxigen reactiv hepatic asociat cu leziuni hepatice acute la șobolani cu tetraclorură de carbon (CCl4) [15].

D-002, o substanță purificată din ceară de albine, conține un amestec de șase dintre alcoolii alifatici superiori (C26, C26, C28, C30, C32 și C34) prezenți în policosanol [16,17], dar în proporții diferite, astfel încât componenta principală a D-002 este triacontanolul (C30), urmat de octacosanol (C28) și docotriacontanolul (C32). S-a demonstrat că administrarea orală de D-002 produce efecte antioxidante în studiile experimentale [18-20] și clinice [21-23] și prezintă efecte hepatoprotectoare în modele experimentale de leziuni hepatice induse de CCl4 [24].

Cu toate acestea, efectele tratamentului D-002 la pacienții cu NALFD nu au fost investigate anterior. Prin urmare, acest studiu a fost efectuat pentru a investiga eficacitatea și siguranța D-002 la pacienții cu NALFD.

METODE

Design de studiu

Acest studiu a fost un studiu prospectiv, monocentric, randomizat, dublu-orb, controlat cu placebo, constând dintr-o vizită de screening și o perioadă de tratament de 24 de săptămâni.

Protocolul de studiu a fost aprobat de Comitetul de Etică al Centrului de Cercetări Chirurgicale Medicale (Havana, Cuba), o instituție acreditată pentru bune practici clinice. Studiul a fost realizat în conformitate cu principiile Declarației de la Helsinki. Pacienților li s-au oferit explicații orale și scrise cu privire la natura procesului și a tratamentului înainte de a acorda consimțământul scris în cunoștință de cauză (vizita 1).

Pacienții eligibili (vizita 2) au fost randomizați la D-002 (50 mg) sau comprimate placebo pentru a fi luați de două ori pe zi timp de 24 de săptămâni și li s-a recomandat să urmeze o dietă cu conținut scăzut de grăsimi cu conținut scăzut de energie (50% carbohidrați, 20% proteine, 30% grăsime) [25]. Aceste condiții alimentare ar fi trebuit să fie urmate de la înscriere până la sfârșitul studiului.

Subiecții au fost văzuți la săptămânile 6, 12, 18 și 24 săptămâni (vizite de la 3 la 6) din perioada de tratament. La fiecare vizită au fost efectuate examinări fizice (determinarea indicelui de masă corporală [IMC], tensiunea arterială și ritmul cardiac) și evaluări clinice. Conformitatea tratamentului și evenimentele adverse (AE) au fost controlate de la vizitele 3 la 6, testele de laborator au fost efectuate la momentul inițial și la fiecare 12 săptămâni, în timp ce infiltrarea hepatică a grăsimii a fost evaluată prin ultrasunografie abdominală superioară la momentul inițial și săptămâna 24.

Pacienți

Am înrolat pacienți de ambele sexe, cu vârste cuprinse între 25 și 70 de ani, cu un diagnostic prealabil de NAFLD și/sau creștere persistentă a enzimelor hepatice fără ingestie excesivă de alcool (consum săptămânal ≥ 70 g la femeie, ≥ 40 g la bărbat), confirmat de interogarea pacienților și a medicilor lor primari.

Pacienții înscriși au fost eligibili pentru randomizare dacă infiltrația de grăsime hepatică a fost confirmată prin ultrasunografie [26].

Criteriile de excludere au inclus excesul de alcool, hepatita virală, hemocromatoza, boala Wilson, hepatita autoimună, colangita sclerozantă primară sau ciroza biliară primară; istoricul oricărei alte tulburări hepatice, valori ale glucozei> 7 mmol/L (diabet necontrolat), incapacitatea de a furniza consimțământul scris în scris; sarcina, alăptarea și lipsa unui control eficient al nașterilor la femeile aflate la vârsta fertilă. De asemenea, pacienții care au avut angină pectorală instabilă, infarct miocardic, accident vascular cerebral sau orice AE gravă în decurs de 3 luni înainte de studiu au fost excluși.

Mai mult, pacienții au fost excluși dacă primeau vreun tratament care ar putea influența funcția hepatică.

Tratament

Medicamentele studiate (D-002 sau comprimate placebo identice) au fost luate de două ori pe zi (la prânz și cină) timp de 24 de săptămâni, astfel încât pacienții tratați au primit D-002 100 mg/zi, o doză în intervalul aprobat la om [27] ].

Randomizarea a fost generată de computer folosind blocuri și un raport de randomizare 1/1. Tratamentele au fost administrate în ambalaje identice codificate în consecință. Consumul de medicamente cu efecte antioxidante, hepatotoxice sau hepatotoxice recunoscute sau sugerate nu a fost permis.

Conformitatea tratamentului a fost evaluată prin numărarea comprimatelor rămase în raport cu cele care ar trebui consumate în fiecare perioadă. Pentru a fi acceptabil, ≥ 85% din comprimatele programate pentru o perioadă trebuie să fi fost consumate. Aderența la dietă a fost urmată de utilizarea înregistrărilor grafice speciale completate de pacienți și revizuite de medici și de înregistrarea greutății corporale la fiecare vizită.

Variabile de eficacitate

Obiectivul primar a fost o reducere semnificativă a infiltrării grăsimilor hepatice, evaluată prin ultrasonografie, comparativ cu primitorii de placebo.

Rezultate secundare

Obiectivele secundare au fost scăzute în indicele HOMA, nivelurile de insulină și enzimele hepatice serice, creșterea statutului antioxidant total plasmatic (TAS) și îmbunătățirea simptomelor clinice în comparație cu placebo.

Măsurători de eficiență

Evaluarea ultrasonografică

Toți pacienții au fost supuși ultrasunetelor pentru steatoză hepatică după post de 10 până la 12 ore. Scanările cu ultrasunete au fost efectuate de un operator instruit, care era orb de alocările grupului participanților.

Severitatea steatozei a fost notată utilizând următoarea scală: 0 (echogenitate normală), 1 (ușoară), 2 (moderată), 3 (severă) [28]. Infiltrația de grăsime hepatică a fost considerată ușoară atunci când a fost prezentă o ecogenitate crescută plus dimensiunea crescută a ficatului, moderată dacă aceste două caracteristici au fost prezente, plus atenuarea sunetului și severă dacă pereții vaselor portal și diafragma au fost nevăzute.

Evaluarea clinică

Pacienții au fost întrebați cu privire la evoluția simptomelor lor, cum ar fi disconfort sau durere abdominală, balonare abdominală și/sau greață. Modificările au fost clasificate după cum urmează: îmbunătățite, agravate sau neschimbate.

Siguranță și tolerabilitate

Datele de la examinarea fizică (determinarea greutății corporale, IMC, pulsul și presiunea arterială), testele de laborator și solicitările de AE ​​au fost utilizate pentru analiza siguranței și tolerabilității. AE a fost predefinită ca ușoară atunci când nu a necesitat retragerea medicației de studiu, moderată când a necesitat întreruperea tratamentului în conformitate cu criteriile medicilor și/sau tratament specific al AE și gravă când a condus la spitalizare sau a prelungit spitalizarea, care ar putea fi fatală sau non-fatal.

Analiza de laborator

Probele de sânge au fost extrase de la 8:00 la 8:30 AM. După un post peste noapte de 12 ore și s-au obținut alicote pentru determinări de laborator.

Enzimele hepatice (ALT, aspartat aminotransferază [AST], γ glutamil transferază [GGT], fosfatază alcalină [ALP]), glucoză serică, creatinină, bilirubină, TC, colesterol lipoproteic de înaltă densitate (HDL-C) și TG au fost determinate de enzimatic metode care utilizează kituri de reactivi (Roche, Basel, Elveția). Valorile LDL-C au fost calculate utilizând ecuația Friedewald [29]. Nivelurile de insulină au fost determinate utilizând testul radioimunologic și timpul de protrombină cu metoda de laborator de rutină.

Indicele HOMA a fost calculat după cum urmează: HOMA = [glucoză de post (în mg/dL)/18] × [insulină de post (în µUI/mL)/22,5]. TAS plasmatic a fost evaluat folosind un kit de reactivi de la Randox (NX2332, Randox, Antrim, Marea Britanie) și valorile au fost raportate în mmol/L.

Analize statistice

Analizele au fost efectuate în conformitate cu principiul intenției de a trata. Au fost analizate datele tuturor pacienților randomizați. Mărimea eșantionului a fost calculată prin presupunerea că reducerea medie de la momentul inițial al infiltrării grăsimilor hepatice ar trebui să fie mai mare de 25% în ceea ce privește modificarea primitorilor de placebo. O dimensiune a eșantionului de 25 de subiecți pe grup a fost estimată a fi suficientă pentru a detecta astfel de diferențe la un nivel de semnificație de 5% cu putere de 80%.

Datele sunt prezentate ca mijloace ± SD. Variabilele continue au fost analizate folosind testul Wilcoxon pentru eșantioane potrivite (comparații în cadrul grupului) și testul U Mann-Whitney (comparații între grupuri), fiind confirmate folosind teste pentru eșantioane pereche și, respectiv, independente. Valorile categorice au fost comparate utilizând testul de probabilitate exact al lui Fisher și confirmate cu testul Ψ 2. Au fost utilizate teste pe două părți. O valoare de p Tabelul 1 prezintă caracteristicile inițiale ale pacienților. Pacienții (27 de femei, 23 de bărbați; vârsta medie, 55 de ani) din ambele grupuri au fost potrivite pentru toate caracteristicile. Creșterea masei corporale (64,0%), TC serică crescută (78,0%), hipertensiune arterială (50,0%), TG serică crescută (40,0%), fumatul (28,0) și obezitatea (24,0%) au fost cele mai frecvente (≥ 20%) constatări în istoricul personal al pacienților. Douăzeci și patru din cei 50 de pacienți au prezentat hipertensiune arterială concomitentă, TG seric ≥ 1,7 mmol/L, valori HDL-C a> 5,00 mmol/L.

b Valori> 2,2 mmol/L.

c Consumat de cel puțin doi pacienți.

Medicamentele concomitente, de asemenea comparabile în ambele grupuri, au fost în concordanță cu istoricul personal al participanților; medicamentele antihipertensive, hipolipemiante și hipoglicemiante orale au fost printre terapia concomitentă luată cel mai frecvent de către participanții la studiu.

Analiza eficacității

Nu a fost observată nicio diferență semnificativă între grupurile în ceea ce privește respectarea dietei și a tratamentului.