Nevzeta Ljubijankić

1 Facultatea de Științe, Universitatea din Sarajevo, Zmaja od Bosne 3335, 71 000 Sarajevo, Bosnia și Herțegovina

Ranka Popović-Javorić

2 Institutul de Clinici de Biochimie, Centrul Clinic al Universității din Sarajevo, Bolnička 25, 71 000 Sarajevo, Bosnia și Herțegovina

Sabiha Šćeta

2 Institutul de Clinici de Biochimie, Centrul Clinic al Universității din Sarajevo, Bolnička 25, 71 000 Sarajevo, Bosnia și Herțegovina

Aida Šapčanin

1 Facultatea de Științe, Universitatea din Sarajevo, Zmaja od Bosne 3335, 71 000 Sarajevo, Bosnia și Herțegovina

Ismet Tahirovic

1 Facultatea de Științe, Universitatea din Sarajevo, Zmaja od Bosne 3335, 71 000 Sarajevo, Bosnia și Herțegovina

Emin Sofić

1 Facultatea de Științe, Universitatea din Sarajevo, Zmaja od Bosne 3335, 71 000 Sarajevo, Bosnia și Herțegovina

Abstract

Obiectivul acestui studiu a fost de a evalua cortizolul din saliva și serul persoanelor sănătoase și fluctuațiile zilnice ale acestuia, utilizând metoda imunochimică pe un autoanalizator. Probele biologice: Serul de la 14 persoane sănătoase și saliva de la 18 persoane sănătoase au fost prelevate de două ori la 8 a.m. iar la ora 16 Test imunochimic: Principiul acestei metode este legarea competitivă a cortizolului prezent în proba analizată și a cortizolului marcat cu peroxizi pe părțile de legare cu anticorpi specifici. Analiză statistică: Student t-test. Cortizol în salivă dimineața: 21,2 ± 16,2 nmol/l și după-amiaza 12,7 ± 8,1 nmol/l. Cortizol în ser dimineața: 459,6 ± 235,2 nmol/l, iar după-amiaza 340,5 ± 207,5 nmol/l. Concentrațiile de cortizol din salivă sunt mai mici decât în ​​ser. Cortizolul din ser dimineața este de aproximativ douăzeci de ori mai mare decât cortizolul din salivă în același timp. Cortizolul din ser după-amiaza este de aproximativ douăzeci și șapte de ori mai mare decât cortizolul din salivă. Variabilitățile individuale ale cortizolului în salivă și ser au fost găsite în timpul zilei.

INTRODUCERE

Cortizolul este principalul hormon glucocorticoid care este secretat de cortexul glandei suprarenale. Conform structurii sale chimice, cortizolul este un hormon steroid. Cortizolul afectează metabolismul glucidelor, grăsimilor și proteinelor. Cortizolul este implicat în răspunsul la stres și este necesar pentru buna funcționare a unui organism. Cortexul glandei suprarenale secretă grupul diferiților hormoni numiți corticosteroizi. Conform influenței sale fiziologice principale, corticosteroizii pot fi împărțiți în trei grupe: glucocorticoizi (cortizol și corticosteron), corticoizi minerali (aldosteron) și hormoni androgeni (dehidroepiandrosteron și androstendionă). Cortizolul, la fel ca toți ceilalți hormoni ai cortexului glandei suprarenale, provine din colesterol.

Chimia cortizolului

Dintr-o structură chimică anterioară și titlul cortizolului putem vedea că în hidrocarburile bazice de pregnenolonă, trei atomi de carbon sunt înlocuiți cu grupări hidroxil în pozițiile 11, 17, 21 și că o grupare -OH în atomul C-11 este în poziția beta, în timp ce celălalt grup -OH din atomul C-17 este în poziție alfa. Între C-4 și C-5 este o conexiune dublă (4-en), iar în atomii C-3 și C-20 sunt două grupuri cetonice.

Cortizolul în diferite fluide corporale

Cortizolul se măsoară în sânge și urină, iar recent, mai ales în situațiile în care eșantionul de sânge este greu de luat, cortizolul se măsoară și în salivă. Prin determinarea concentrației de cortizol în ser sau plasmă, se definește intensitatea secreției și efectul acesteia asupra țesutului. În această determinare este necesar să știm că analiza unei probe de ser sau plasmă arată concentrații în anumite momente. Prin determinarea concentrației de cortizol în volumul de urină de 24 de ore, se definește cantitatea de cortizol secretată în timpul zilei, prin care se poate arăta funcția cortexului glandei suprarenale. Saliva este utilizată ca probă alternativă pentru măsurarea cortizolului în ultimul deceniu. Valorile referențiale ale concentrației de cortizol sunt clasificate în funcție de momentul prelevării probei. Zonele referențiale sunt afectate de mai mulți factori care pot varia, de aceea se recomandă ca fiecare laborator să își definească propriile valori referențiale. Valorile referențiale ale cortizolului în anumite fluide corporale, determinate în Laboratorul de Biochimie Clinică al Institutului de Biochimie Clinică și Chimie al Centrului Clinic de la Universitatea din Sarajevo, sunt: ​​În ser

Dimineața (8 - 9 a.m.) 123,0 - 626,0 nmol/l

După-amiaza (16 - 17) 46,2 - 389,0 nmol/L

Dimineața (8 - 9 a.m) 3,5 - 27,0 nmol/l

După-amiaza (16 - 17) 1,3 - 6,0 nmol/L

59,2 la 413,0 nmol/24

MATERIALE ȘI METODĂ

Materiale biologice

Serul de material biologic al sângelui și al salivei este utilizat în aceste analize. Sângele din vene este preluat de la 14 persoane sănătoase, 8 bărbați și 6 femei, de două ori dimineața (8 - 9 a.m.) și după amiază (4 - 5 p.m.). După ce probele de coagulare sunt centrifugate (cinci minute, 4000 de rotații), pentru a pune deoparte serul în care se fac măsurători ale concentrației de cortizol. Probele de salivă sunt luate de la 18 persoane sănătoase, 10 bărbați și 8 femei, de două ori, dimineața (8 - 9 am) și după amiază (4 - 5 pm). Probele de salivă sunt centrifugate, de asemenea, pentru a obține fluid fără adaosuri. Probele de ser și salivă au fost păstrate la o temperatură de -24 ° C grade.

Determinarea cortizolului prin metoda imunochimică

Evaluarea concentrației de cortizol în ser și salivă se face pe un autoanalizator, prin metoda imunochimică, care se bazează pe reacția imunochimică cu luminescență. Determinarea se bazează pe legarea competitivă a cortizolului în probă și a cortizolului marcat cu peroxidază, pe locurile de legare cu anticorpi speciali (anticortizol de oaie). Complexele antigen-anticorp care se formează sunt prinse cu streptavidină la barierele vasului; materialele care nu sunt legate sunt scoase cu spălarea. Activitatea peroxidazei legate este măsurată prin reacție luminiscentă. Peroxidaza legată catalizează oxidarea derivaților luminolului care formează lumina. Semnalele luminoase sunt afișate pe aparat. Cantitatea de peroxidază legată este invers proporțională cu concentrația cortizolului prezent. Analiza statistică a rezultatelor se face prin testul t Student.

REZULTATE

Concentrația de cortizol și salivă

MASA 2

Concentrația de cortizol în saliva persoanelor de sex feminin dimineața și după-amiaza

zilnică

TABELUL 3

Concentrația de cortizol în saliva examinatorilor de sex masculin dimineața și după-amiaza

Concentrația de cortizol în ser

TABELUL 5

Concentrația de cortizol în serul femeilor examinate dimineața și după-amiaza

TABELUL 6

Concentrația de cortizol în serul persoanelor de sex masculin dimineața și după-amiaza

Comparația concentrației de cortizol în salivă și ser

Conform datelor prezentate în Tabelul 7, care sunt prezentate în Graficul 3, se poate observa că valoarea medie a concentrației de cortizol, dimineața, în ser este de 22 de ori mai mare decât valoarea medie a concentrației de cortizol în salivă, iar valoarea medie a concentrației de cortizol în ser, după-amiaza, este de 27 de ori mai mare decât valoarea medie a concentrației de cortizol în salivă.

TABELUL 7

Valorile medii și abaterile standard ale concentrației de cortizol în ser și salivă dimineața și după-amiaza

Comparația concentrației de cortizol în salivă și ser dimineața și după-amiaza

DISCUŢIE

Colesterolul ca predecesor al hormonilor steroizi

11 p, 17a, 21 - trihidroxipregnan - 4 - en - 3,20-dione (cortizol)

CONCLUZIE

Există fluctuații zilnice foarte complicate ale cortizolului în saliva persoanelor sănătoase de ambele sexe, deoarece valoarea medie a concentrației de cortizol înainte de prânz este statistic semnificativ mai mare în comparație cu valoarea medie a concentrației de cortizol după amiază.

O concentrație mai mare de cortizol în saliva femeilor se găsește în comparație cu examinatorii masculi, dar aceste diferențe nu sunt importante din punct de vedere statistic.

Există fluctuații zilnice foarte complicate ale cortizolului în serul persoanelor sănătoase de ambele sexe, deoarece valoarea medie a concentrației de cortizol înainte de prânz este statistic semnificativ mai mare decât valoarea medie a concentrației de cortizol după prânz.

Concentrația de cortizol în ser la femele este mai mică în comparație cu examinatorii de sex masculin, dar aceste diferențe nu sunt importante din punct de vedere statistic.

Valoarea medie a concentrației de cortizol, în ser, este mult mai mare decât în ​​salivă. Este de 22 de ori mai mare înainte de prânz și de 27 de ori mai mare după amiază.

Variabilitatea individuală a concentrației de cortizol este evidentă în timpul zilei, atât în ​​ser, cât și în salivă.

Concentrațiile de cortizol din salivă sunt foarte mici, de aceea se recomandă ca, în cazurile de tulburări metabolice, să se ia în considerare timpul de prelevare a salivei.

Măsurătorile salivei cortizol, în special la primele ore ale dimineții, pot înlocui complet măsurătorile cortizolului în ser sau plasmă.