Abstract

fundal

Dependența de tutun este o tulburare recidivantă care constituie o problemă substanțială de sănătate la nivel mondial, cu dovezi care sugerează că nicotina și stimulii asociați nicotinei joacă roluri divergente în menținerea comportamentului la fumat la bărbați și femei. În timp ce modelele animale de dependență de tutun care utilizează autoadministrarea nicotinei au devenit mai răspândite, examinarea sistematică a mai multor factori care instigă la recăderea în căutarea nicotinei au fost limitate. Aici, am examinat auto-administrarea nicotinei și căutarea ulterioară a nicotinei la șobolani Sprague-Dawley masculi și feminini utilizând un model animal de autoadministrare și recidivă.

nicotină

Metode

Pârghia șobolanilor a fost apăsată pentru nicotină (0,03 și 0,05 mg/kg/perfuzie, IV) în timpul a 15 sesiuni zilnice de 2 ore, urmată de dispariția răspunsului la pârghie. Odată ce răspunsul a fost stins, am examinat capacitatea indicilor anterior asociați cu nicotină (ton + lumină), medicamentul anxiogenic yohimbină (2,5 mg/kg, IP), o injecție inițială de nicotină (0,3 mg/kg, SC) sau combinații de droguri + indicii pentru a restabili căutarea de nicotină.

Rezultate

Atât bărbații, cât și femeile au dobândit cu ușurință autoadministrarea nicotinei și au prezentat niveluri comparabile de răspuns și aport la ambele doze de nicotină. După dispariție, expunerea la indiciile anterior asociate cu nicotină sau yohimbină, dar nu la nicotina primă singură, a restabilit căutarea nicotinei la bărbați și femei. Mai mult, atunci când sunt combinate cu indicii asociate cu nicotina, atât yohimbina, cât și nicotina au îmbunătățit reintegrarea. Nu s-au observat diferențe semnificative de sex sau modificări dependente de ciclul estru în cadrul testelor de reintegrare.

Concluzii

Aceste rezultate demonstrează capacitatea de a restabili căutarea nicotinei cu mai multe modalități și că expunerea la indicii asociate nicotinei în perioadele de stare stresantă sau nicotină poate crește căutarea nicotinei.

1. Introducere

Dependența de tutun constituie o problemă critică de sănătate, cu aproximativ 1,3 miliarde de fumători zilnici de tutun la nivel mondial (Guindon și Boisclair, 2003; Thun și da Costa e Silva, 2003). În ciuda unei scăderi substanțiale a procentului populației care consumă tutun în ultimele patru decenii, consumul de tutun rămâne principala cauză prevenibilă de deces prematur și boală în Statele Unite, responsabilă de 440.000 de decese în fiecare an (Fellows et al., 2002) . Similar cu alte medicamente de abuz, una dintre cele mai semnificative probleme pentru tratamentul pe termen lung al dependenței de nicotină este incidența ridicată a recăderii la căutarea și consumul de droguri după perioade prelungite de abstinență. De fapt, majoritatea fumătorilor care renunță vor recidiva (Fiore, 2000; Shiffman și colab., 1998) și aproape toți fumătorii care recidivează după o încercare inițială de renunțare vor reveni la fumatul obișnuit (Brandon și colab., 1990; Chornock și colab. al. al., 1992; Kenford și colab., 1994).

S-a constatat că trei factori principali contribuie la recidiva nicotinei la om: indicii asociate nicotinei (Perkins și colab., 1999; Perkins și colab., 1994), stresul (Brandon și colab., 1990; Patton și colab., 1997) și expunerea la medicamentul în sine (Chornock și colab., 1992; Sofuoglu și colab., 2005). În mod similar, acești factori declanșatori au fost utilizați în modele animale de recidivă la comportamentul de căutare a drogurilor, în special în modelul de stingere/reintegrare după retragerea din autoadministrarea cronică de nicotină, prin care expunerea la stimuli asociați cu nicotină (LeSage și colab., 2004; Liu și colab., 2008; Liu și colab., 2006), stres la șoc (Buczek și colab., 1999; Martin-Garcia și colab., 2009; Yamada și Bruijnzeel, 2011; Zislis și colab., 2007) sau necontenit administrarea nicotinei (Le și colab., 2006; Martin-Garcia și colab., 2009; Shaham și colab., 1997; Shram și colab., 2008) vor restabili căutarea nicotinei, măsurată prin răspunsul la o pârghie asociată anterior cu nicotina.

2. Materiale și metode

2.1. Subiecte

Șobolanii Sprague-Dawley (Charles River Laboratories, Wilmington, MA, SUA) au fost adăpostiți individual în masă (cu greutate inițială 250-300 g, P59-67) și cu femele (greutate inițială 175-225 g, P57-74). vivarii controlate de temperatură și umiditate pe un ciclu de lumină-întuneric de 12 ore (luminile aprinse la 06:00). Toate procedurile experimentale au avut loc între orele 07:00 și 16:00. În cușca de acasă, animalele au avut acces la apă ad libitum și au fost menținute pe o dietă controlată (20-25 g/zi) de șobolan standard (Harlan, Indianapolis, IN, SUA) pe durata fiecărui experiment. Toate procedurile experimentale au fost aprobate de Comitetul instituțional de îngrijire și utilizare a animalelor de la Universitatea Medicală din Carolina de Sud și au fost conforme cu liniile directoare federale descrise în „Ghidul pentru îngrijirea și utilizarea șobolanilor de laborator” al Institutului de resurse animale de laborator în științele vieții, Consiliul national de cercetare.

2.2. Interventie chirurgicala

Șobolanii au fost anesteziați utilizând un amestec de clorhidrat de ketamină și xilazină (66 și 1,33 mg/kg, respectiv, IP) și echitezină (pentobarbital de sodiu 4 mg/kg, hidrat de clor 17 mg/kg și 21,3 mg/kg sulfat de magneziu heptahidrat dizolvat în 44% propilen glicol, 10% soluție de etanol, IP) și catetere jugulare au fost inserate și menținute folosind metodele descrise anterior (Reichel și colab., 2011). Pentru evaluarea permeabilității cateterului, șobolanii primeau ocazional o perfuzie IV de 0,1 ml IV de sodiu methehexital (Eli Lilly, Indianapolis, IN, SUA; 10 mg/ml dizolvat în soluție salină fiziologică 0,9%), un barbituric cu acțiune scurtă care produce o pierdere rapidă de tonusul muscular atunci când este administrat intravenos.

2.3. Autoadministrarea și dispariția nicotinei

Pârghia șobolanilor este presată pentru nicotină în camerele standard de auto-administrare legate de un program computerizat de colectare a datelor (MED-PC, Med Associates Inc., St. Albans, VT, SUA) Camerele au fost echipate cu două pârghii, o lumină albă de stimul deasupra pârghiei asociată cu nicotină (adică activă), un generator de ton și o lumină albă de casă. Fiecare cameră a fost conținută într-o cabină de atenuare a sunetului echipată cu un ventilator.

2.4. Reinstalarea căutării de nicotină

2.5. Monitorizarea ciclului estru

Pentru a stabili etapele ciclului estru, probele de lumen vaginal au fost colectate imediat înainte și în urma fiecăruia dintre cele cinci teste de reintegrare. Cu toate acestea, pentru a obișnui femelele cu procedura de citologie vaginală, au fost prelevate probe zilnic pe parcursul întregului experiment. Probele de lumen vaginal au fost colectate prin spălarea ușoară a 30 ofl de apă distilată dublă și extragerea probei folosind o micropipetă și vârfuri de 100 pl de pipetă. Probele au fost plasate pe lamele de sticlă, colorate folosind Quick-Dip Hematology Stain (Mercedes Medical, FL, SUA), examinate folosind un microscop cu lumină (mărire 10 ×), iar fazele ciclului estru au fost apoi clasificate conform criteriilor publicate anterior (Marcondes și colab. ., 2002).

2.6. Analiza datelor

Analizele variației cu măsuri repetate ale factorilor mixți (ANOVA) au fost utilizate pentru a analiza răspunsurile pârghiei și aportul de nicotină (mg/kg) în timpul autoadministrării nicotinei (ultimele șapte zile) și dispariției (primele șapte zile), cu sexul și sesiunea între - și, respectiv, în cadrul subiecților. Pentru testarea reintegrării, ANOVA-urile cu trei căi au fost utilizate pentru a analiza răspunsurile pârghiei cu sex (masculin, feminin), tac (fără tac, tac), medicament (vehicul, yohimbină, nicotină primă) și fază estroasă (proestrus, estru, diestru) I/II) ca factori, acolo unde este cazul. Interacțiunile semnificative au fost cercetate în continuare folosind ANOVA sau teste t independente, după caz. Punctele de date au fost eliminate dacă erau 2,5 abateri standard peste media grupului. Toate analizele post hoc au fost efectuate folosind Student-Newman-Keuls cu alfa setat la 0,05 și sunt prezentate doar valori semnificative F sau t.

3. Rezultate

3.1. Autoadministrarea și dispariția nicotinei