Adam W Stern

1 Laborator de diagnostic veterinar

xenopus

Sarah O Allison

2 Divizia de resurse animale, Illinois și

Caroline Chu

3 Departamentul de patobiologie, Universitatea din Illinois, Urbana, Illinois

Abstract

Acest raport descrie caracteristicile histologice ale unui carcinom pancreatic la o broască adultă feminină cu gheare africane (Xenopus laevis). Animalul s-a dovedit a fi în stare proastă a corpului și ulterior a fost eutanasiat pentru o necropsie completă. Histologic, pancreasul a fost șters de pachete de celule poliedrice în concordanță cu un carcinom cu celule insulare pancreatice. Boala metastatică nu a fost identificată. Tumorile pancreatice sunt mai puțin frecvente la amfibieni, iar acest raport este primul care descrie un carcinom pancreatic la o broască cu gheare africane.

Broasca cu gheare africane (Xenopus laevis) este una dintre cele mai utilizate specii de broaște din lume în biologia dezvoltării, biologia celulară, toxicologia și neuroștiința. Bolile neoplazice din Xenopus au fost rareori raportate în literatură, dar includ hepatome, teratoame, carcinom renal, fibrom, fibrosarcom, nefroblastom, disgerminom ovarian, melanoforom și limfom. 1,2,5,6,10,14 Deși a fost descrisă hiperplazia insulelor pancreatice din Xenopus, neoplasmele pancreatice la aceste broaște nu au fost raportate anterior. S-a raportat că au apărut carcinoame pancreatice la speciile hibride de broaște de iaz din genul Pelophylax (anterior Rana). 9 Acest raport descrie prima apariție documentată a unui carcinom pancreatic în X. laevis.

Raport de caz

La examinare, broasca a fost alertă, dar slabă, cu o proeminență osoasă a coloanei vertebrale și a bazinului. Nu au fost observate alte leziuni sau semne de traume. Datorită stării sale proaste a corpului, broasca a fost eutanasiată prin imersiune într-o soluție tamponată de 5 g/l de tricaină metan sulfonat (Sigma Aldrich, St Louis, MO). Broasca a fost înaintată Laboratorului de Diagnostic Veterinar al Universității din Illinois pentru examinare necropsică.

La necropsie brută, broasca sa dovedit a fi în stare nutrițională slabă. Broasca cântărea 86,3 g, iar tampoanele de grăsime intraceolomică erau absente. Nu au fost observate alte anomalii grave semnificative.

Cultura bacteriană aerobă a splinei nu a dat niciun agent patogen. Probele de splină au fost analizate prin PCR utilizând grunduri micobacteriene specifice genului, ITSF și miocm 2. 12.13 ADN-ul genomic a fost extras din splină folosind un kit de purificare (nr. 947057, trusă de purificare pentru toate persoanele, Qiagen, Venlo, Limburg, Olanda) și un procesor automat (procesor BioSprint, Qiagen). Volumul de reacție PCR de 25 μL a fost format din 2,5 μL 10 × tampon A (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA), 2,5 μL 2 nM dNTP, 10 μM fiecare ITSF și primari mycom 2, 0,25 μL 5U/μL polimerază Taq (Invitrogen), 12,25 μL apă sterilă și 2,5 μL ADN șablon. Condițiile termociclatorului au cuprins denaturarea la 94 ° C timp de 5 min, urmată de 29 de cicluri de denaturare la 94 ° C timp de 1 min, recoacere la 60 ° C timp de 1 min și extindere la 72 ° C timp de 1 min, cu o extensie finală timp de 10 min.; apoi reacția a fost menținută la 4 ° C. Electroforeza unui produs de amplificare pozitivă pe un gel de agaroză de la 1% la 2% produce o bandă de 270 - 360 bp. Nu există amplificare a Mycobacterium spp. A fost detectat ADN din splina broaștei.

Probele fixate pe formalin au fost colectate și probele au fost încorporate în parafină, procesate în mod obișnuit, secționate la 4 până la 5 pm și colorate cu hematoxilină și eozină. Secțiunile de țesut examinate au inclus plămânii, ficatul, rinichii, splina, inima, intestinul subțire, pancreasul, ovarele, stomacul, intestinul subțire și gros, pielea și mușchiul scheletic. Pancreasul a fost aproape complet șters de o populație de celule neoplazice dispuse în pachete și susținută de o stromă fibrovasculară subțire (Figura 1). Celulele neoplazice au fost poliedrice, au margini celulare distincte, au un raport nuclear frecvent ridicat: citoplasmatic și citoplasmă eozinofilă și wispy conținând adesea globule eozinofile de dimensiuni variabile. Nucleii erau rotunzi, cu cromatină înțepată și 1 până la 3 nucleoli. Celulele neoplazice au prezentat anizocitoză moderată și anizocarioză. Au existat 1 până la 3 cifre mitotice pe câmp aleatoriu de 400 ×. Au fost observate necroze unicelulare împrăștiate ale celulelor neoplazice și rare celule acinare pancreatice rămase. S-a efectuat colorarea histochimică cu tricomul Masson și a existat o colorare colagen-pozitivă (albastră) a stromei fibroase care separă pachetele de celule neoplazice (Figura 2).

  •