Buthaina Alkhatib 1 *, Hayder Al-Domi 1, Maha Shomaf 2 și Basha’er Abu Irmaileh 3

supraîncărcării

1 Departamentul de nutriție și tehnologie alimentară, Universitatea din Iordania, Iordania

2 Departamentul de histopatologie, Facultatea de Medicină, Universitatea din Iordania, Iordania

3 Departamentul de Toxicologie, Universitatea din Iordania, Iordania

* Autor corespondent: Buthaina Alkhatib
Doctorat în Nutriție umană și dietetică
Departamentul de Nutriție și Tehnologie Alimentară
Școala de Agricultură
Universitatea din Iordania, Iordania
Tel: +962 6 535 5000
E-mail: [e-mail protejat]

Data primirii: 18 septembrie 2017; Data acceptată: 25 septembrie 2017; Data publicării: 30 septembrie 2017

Citare: Alkhatib B, Al-Domi H, Shomaf M, Abu Irmaileh B (2017) Efectul supraîncărcării fierului asupra nivelurilor serice de glucoză, insulină și HOMA-IR a fost influențat de tipul de grăsime la femelele șobolani Sprague-Dawley alimentate cu diete bogate în grăsimi. . J Clin Nutr Diet 3:23. doi: 10.4172/2472-1921.100058

Abstract

Obiectiv: Acest studiu a fost realizat pentru a examina efectul suplimentării cu fier asupra nivelurilor serice de glucoză, insulină și HOMA-IR și pentru a examina depunerea histologică a fierului în țesut la femelele de șobolani Sprague-Dawley hrănite cu diete bogate în grăsimi (HFD).

Metode: Șobolanii au fost împărțiți în trei grupe principale: dieta normală cu grăsimi (NFD), dieta bogată în grăsimi saturate (HSFD) și dieta bogată în grăsimi monoinsaturate (HMUSFD). După 6 săptămâni, șobolanii au fost subdivizați în trei subgrupuri pentru injecția intraperitonială de fier (grupul martor, grupul doză 1 (Do1); 15 mg/kg greutate corporală (BW) și doza 2 (Do2); 75 mg/kg BW S-au măsurat glucoza serică și insulina. De asemenea, a fost examinat examenul histologic al depunerii de fier după colorarea prusiană a lui Perl.

(NFD): dieta normală cu grăsimi, (HSFD): dieta bogată în grăsimi saturate, (HMUFD): dieta bogată în grăsimi monoinsaturate.
1. Cantitatea de amidon de porumb include 155 g în plus de amidon de porumb folosit ca înlocuire a amidonului de porumb dexterinizat, deoarece este utilizat pentru a facilita peletarea în timp ce nu a fost efectuată nici o peletare.
2. Uleiul de soia rafinat brut, fără vitamine adăugate, a fost utilizat în studiul actual.
3. Untul s-a topit pe o cale de apă.
4. Premixul de biotină a fost preparat prin amestecarea a 130 mg de biotină cu 999,87 g de amidon de porumb (Reeves, 1996).
5. Cantitatea de terț-butilhidrochinonă (TBHQ) a fost adăugată în funcție de cantitatea de grăsime (2 mg pentru fiecare 10 g de grăsime.

Tabelul 1: Compoziția dietei normale cu grăsimi (NFD) și a dietelor bogate în grăsimi (HFD).

Animale: Opt săptămâni șobolani femele Sprague-Dawley (54 șobolani, greutate medie 105-154 g) au fost obținuți de la Universitatea de Știință și Tehnologie din Iordania (JUST), Iordania. Șobolanii au fost ținuți la Unitatea pentru animale, Școala de Agricultură, Universitatea din Iordania, Iordania. Fiecare șobolan a fost găzduit într-o singură cușcă din plastic ventilată metabolic (North Kent Plastic Cages, Ltd, Dartford, Marea Britanie), cu podea și față din plasă de sârmă din oțel inoxidabil. O tavă a fost plasată sub fiecare cușcă pentru a colecta fecalele și scurgerile de alimente. Dieta a fost asigurată în cupe de sticlă și apă în sticle de băut din sticlă. Șobolanii au fost ținuți sub temperatură controlată (22 ± 2 ° C) și menținuți la o lumină de 12:12 ore: cicluri întunecate cu acces gratuit la apă și dietă standard de laborator pentru o săptămână de aclimatizare [24]. Acest studiu a fost realizat în strictă conformitate cu recomandările din Ghidul pentru îngrijirea și utilizarea animalelor de laborator de la Institutele Naționale de Sănătate. Protocolul a fost aprobat de Comitetul pentru etica experimentelor pe animale de la Universitatea din Iordania (numărul permisului: 27-2956).

Supliment de fier: A fost utilizată injecția cu zaharoză de fier (Venofer \ Vifor International Inc., St. Gallen, Elveția). Fiecare ml de Vanofer conține 20 mg fier elementar sub formă de zaharoză de fier în apă pentru preparate injectabile. Fiecare doză de fier a fost calculată și preparată până la volumul posibil, în funcție de greutatea șobolanului, înainte de fiecare injecție folosind seringă de insulină (1 ml) [25].

Proiectare experimentală: Șobolanii au fost împărțiți în mod aleatoriu în trei grupe dietetice principale: șobolanii din grupul (1) au fost hrăniți cu dietă normală cu grăsimi (NFD) (n = 18), șobolanii din grupul (2) au fost hrăniți cu dieta bogată în grăsimi saturate (HSFD) (n = 18) și grupul (3) șobolani au fost hrăniți cu o dietă bogată în grăsimi monoinsaturate (HMUSFD) (n = 18). Toți șobolanii au fost hrăniți ad libitum timp de 10 săptămâni. Animalele au fost cântărite săptămânal pe durata experimentului și de trei ori pe săptămână înainte de fiecare injecție de doză de fier în ultimele 4 săptămâni ale experimentului. Consumul de diete a fost măsurat zilnic prin compararea diferențelor de greutate între cantitatea de alimente oferite și cea rămasă. După 6 săptămâni de hrănire a diferitelor diete, șobolanii au fost subdivizați în trei subgrupuri (grupul de control, grupul doză1 și grupul doză2; n = 6) pentru a doua etapă de studiu (4 săptămâni) cu două doze de supliment de fier. Șobolanii au fost ținuți în dietele lor respective. Fierul a fost completat de injecții intraperitoniale sub formă de două doze de zaharoză de fier: doza 1 (Do1); 15 mg/kg greutate corporală (BW) și doza 2 (Do2); (75 mg/kg BW), de trei ori pe săptămână, timp de 4 săptămâni consecutive [25-27]. În grupul martor, șobolanii au primit un volum echivalent de ser fiziologic steril

După care, șobolanii au fost sacrificați prin anestezie cu cloroform, după 12 ore de post. Probele de sânge au fost colectate prin puncție cardiacă și centrifugate imediat. Probele de ser au fost păstrate la -20 ° C până la utilizare [24].

Analiza biochimică

Analiza glucozei: Nivelurile serice de glucoză au fost examinate prin metoda de referință enzimatică a glucozei cu hexokinază folosind trusa comercială (Teco Diagnostics, Lakeview Ave, Anaheim, SUA). Absorbanța a fost citită împotriva martorului (1000 μl reactiv) la 340 nm cu un spectrofotometru (Spectroscan 80D, Biotech Engineering Management Co. Ltd, Marea Britanie), apoi valorile au fost calculate în mmol/L.

Insulina serică și HOMA-IR: Insulina serică a fost măsurată prin setul ELISA disponibil comercial (ELISA Abcam’s Rat Insulin Kit, ab100578, Abcam, Cambridge, MA, UK), apoi concentrațiile au fost calculate în μIU/ml. Rezistența la insulină a fost evaluată prin evaluarea modelului de homeostazie a metodei de rezistență la insulină (HOMA-IR) descrisă de Matthews și colab. (1985). Indicele HOMA-IR a fost calculat după cum urmează: (insulină de post (μIU/ml) x glucoză de post (nmol/ml))/22,5 [28].

Examen histologic: Probele de ficat și RPAT au fost fixate în formalină tamponată 10% PBS (pH 7,0-7,2). Toate țesuturile au fost încorporate în parafină după fixare. Colorarea histologică a fost efectuată folosind metoda albastră prusiană a lui Eosin și Perl pentru a detecta depunerea de fier tisular [25,8]. Probele de țesut au fost examinate la microscopul luminos la 200x și 400x (OLYMPUS, SUA).

Analize statistice

* Datele sunt prezentate ca media ± SEM și sunt semnificative la p