Sohair R Fahmy *, Khadiga Gaafar, Dawlat A Sayed și Huda Nageeb

  • Departamentul de Zoologie, Facultatea de Științe, Centrul de Cercetare a Animalelor din Egipt 2, China
  • 3 Departamentul de Ultrasonografie, China -> 4 Coordonator Chirurgie Digestivă al Spitalului General din Fortaleza, Brazilia -> 5 Institutul de Medicină a Muncii și Igienă Industrială, Taiwan
  • 6 Departamentul de Medicină Internă și Centrul Cardiovascular, Taiwan
  • 7 Institutul Absolvent de Medicină Clinică, Colegiul de Medicină, Taiwan
  • 8 Facultatea de Medicină, Taiwan -> 9 Departamentul de Științe Chirurgicale și Diagnostice Integrate, Italia ->

Primit: 12 decembrie 2018; Publicat: 03 ianuarie 2019

* Autorul corespunzator: Sohair R Fahmy, Departamentul de Zoologie, Facultatea de Științe, Egipt

--> Rezumat -> PDF

Abstract

Fundal: Boala renală cronică (CKD) este o amenințare la nivel mondial pentru sănătate. Piramidele Egiptului sunt una dintre cele mai uimitoare realizări ale lumii. Prin urmare, prezentul studiu își propune să investigheze eficacitatea ameliorativă a adăpostirii șobolanilor unilaterali nefrectomizați (UNx) în interiorul modelului marii piramide egiptene.

Rezultate: Adăpostirea șobolanilor UNx timp de 24 și 48 de ore în interiorul modelului piramidei egiptene a indus o creștere semnificativă a greutății rinichiului drept, a nivelurilor serice de sodiu și calciu și a excreției ionilor de potasiu în urină. Clearance-ul creatininei a crescut semnificativ după adăpostirea șobolanilor UNx în modelul piramidei egiptene după 48 de ore. Cu toate acestea, adăpostirea șobolanilor în interiorul piramidelor egiptene pentru 24 și 48 de ore ameliorează markerii funcției renale (proteinurie, uree și acid uric) și le restabilesc nivelurile către valorile de control. În plus, nivelurile de reinină, angiotensină și hormoni aldosteronici au crescut semnificativ după adăpostirea șobolanilor UNx în piramida egipteană timp de 24 și 48 de ore.

Concluzie: Prezentul studiu a arătat că adăpostirea șobolanilor nefrectomizați în interiorul modelului piramidei egiptene poate fi o nouă strategie potențială de prevenire a CKD după rezecția tumorii renale. De asemenea, studiul actual a sugerat că mediul piramidal joacă un rol important în ameliorarea efectelor grave ale nefrectomiei prin îmbunătățirea funcției renale.

Cuvinte cheie: Modele de piramide egiptene; Șobolani nefrectomizați unilaterali; Funcții renale; Sistemul renină-angiotensină-aldosteron; Șobolani

Abrevieri: ATRT: Tumoră rabdoidă teratoidă atipică; SNC: Sistemul nervos central; CT: Tomografie computerizată; RMN: imagistică prin rezonanță magnetică; AT/RT: Tumora teratoidă/rabdoidă atipică: UCI: Unitate de terapie intensivă; DI: Diabet insipid; LMD: diseminare leptomeningeală; EMA: Antigen cu membrană epitelială; GFAP: proteină acidă fibrilară glială; TSG: genul supresor al tumorii

Introducere

Nefrectomia (Nx) este o nouă intervenție introdusă pentru prima dată în tratamentul carcinomului cu celule renale în 1969 [1]. Deși rezecția chirurgicală rămâne standardul de îngrijire în tratamentul carcinomului renal, Nx este, de asemenea, un factor de risc recunoscut pentru dezvoltarea bolii renale cronice (CKD) [2,3]. Într-adevăr, nefrectomia este un model utilizat pe scară largă pentru a studia mecanismele care duc la afectarea renală în BCK [4]. Vasculatura intra-renală este structura cea mai afectată, prevenind un flux sanguin adecvat, favorizând scleroza glomerulară [5]. CKD va duce cu siguranță la progresia insuficienței renale cronice (CRF) datorită sclerozei treptate a țesutului renal. În plus, nefronii se pierd treptat în insuficiența renală. Nefronii rămași sunt hipertrofiați pentru a compensa pierderea funcției renale, iar hiperfiltrarea în aceste nefroni rămase duce la pierderea ulterioară a nefronului [6].

Materiale și metode

Animale experimentale

Șobolani albini masculi sănătoși Wistar (Rattus norvegicus), cu o greutate de 180-200g, au fost utilizate. Animalele au fost obținute de la Centrul Național de Cercetare (NRC), Egipt. Șobolanii au fost ținuți timp de o săptămână înainte de începerea experimentului pentru aclimatizare. Animalele au fost grupate și adăpostite în cuști din polipropilenă (cinci animale pe cușcă) în cameră cu aer condiționat, la o temperatură de 25 ± 1 oC și în timpul ciclului natural de zi și de noapte. Animalele au fost hrănite cu pelete standard de chow și apă potabilă.

Consideratie etica

Protocolul experimental a fost aprobat de Comitetul instituțional de îngrijire și utilizare a animalelor (IACUC) (CUFS/S/PHY/15/14) al Facultății de Științe, Universitatea din Cairo, Egipt.

Proiectarea și dimensiunile modelului piramidei

Un model de piramidă din lemn (Figura 1) de 30 in. înălțime, 45 in. baza și 41,5 laturi au fost fabricate local și utilizate în prezent [12].

Figura 1: Proiectarea modelului piramidei egiptene.

egiptene

Neferectomie unilaterală

Neferectomia unilaterală a fost efectuată în conformitate cu Fahmy și colab. [12]. Pe scurt, laparatomia a fost efectuată în condiții antiseptice după anestezia șobolanilor cu pentobarbital de sodiu (50 mg/kg greutate corporală; ip). Rinichiul stâng a fost îndepărtat după o mică incizie abdominală longitudinală care apoi s-a închis folosind un fir de mătase 4-0 (grupul UNx). La animalele acționate de fals, rinichiul stâng a fost expus și manipulat ușor, dar lăsat intact (grupul fals). Toate animalele au primit soluție salină normală cu volum egal la momente de timp adecvate. Toți șobolanii au primit 50 μl de ropivacaină 0,2% subcutanat pentru analgezia post-operatorie.

Proiectare experimentală

Patruzeci și doi de șobolani Wistar de sex masculin au fost repartizați în mod egal în trei grupe principale (14 șobolani pentru fiecare). Ambele grupuri au menținut în cuștile de acasă timp de 24 și 48 de ore. Al treilea grup (grupul găzduit de piramide) în care șobolanii UNx s-au adăpostit în piramida de lemn (6 ore/zi) timp de 24 și 48 de ore [13].

Colectarea și pregătirea urinei

La sfârșitul fiecărei perioade experimentale, șobolanii au fost transferați în cuști metabolice individuale timp de 24 de ore și urina a fost colectată. În acest timp, șobolanii au avut acces gratuit la apă. Probele de urină colectate au fost eliberate de contaminarea fecală și volumul de urină a fost măsurat folosind cilindrul de măsurare. Probele de urină au fost centrifugate timp de 10 minute și supernatantul de urină a fost apoi depozitat la -70 ° C până la analiză.

Manipularea animalelor

Animalele au fost eutanasiate sub anestezie profundă cu pentobarbital de sodiu. Sângele a fost colectat în tuburi de centrifugă, apoi centrifugat la 3000 rpm timp de 20 de minute. Ser stocat la -20 oC până când este utilizat pentru teste biochimice și hormonale. Rinichiul drept a fost îndepărtat și imediat șters cu hârtie de filtru pentru a îndepărta urmele de sânge și ponderat apoi suspendat în soluție salină formală de 10% pentru fixare pregătitoare pentru procesarea histologică.

Determinarea electroliților în probe de urină și ser

Kituri adecvate (Bio-Diagnostic, Dokki, Giza, Egipt) au fost utilizate pentru determinarea ionilor de sodiu, potasiu și calciu prin metoda colorimetrică conform metodei descrise de Trinder [14]; Sunderman și Sunderman [15] și respectiv Gindelar și king [16]

Determinarea funcției renale în probele de urină și ser

Ureea a fost determinată prin metoda ureazei-berthelot utilizând truse de Biodiagnostic, conform metodei descrise de Fawcett și Soctt [17]. Proteina totală a fost determinată prin metoda colorimetrică folosind truse de Biodiagnostic, conform metodei descrise de Gornal și colab. [18]. Acidul uric a fost determinat prin metoda colorimetrică enzimatică folosind truse de Biodiagnostic, conform metodei descrise de Barham și Trinder [19]. Creatinina a fost determinată prin metoda colorimetrică (Punct final) folosind truse de Biodiagnostic, conform metodei descrise de Schirmeister și colab. [20]. Clearance-ul creatininei a fost determinat conform următoarei ecuații:

Analize hormonale

Nivelurile plasmatice de renină, angiotensină și aldosteron au fost determinate folosind kituri ELISA de șoarece/șobolan (Cat # SL0617Ra, SL0061Ra și respectiv SL0040Ra, respectiv Sunlong Biotech Co. LTD).

Analize statistice

Statistic, datele prezentului studiu au fost analizate conform analizei Shapiro-Wilk și Kolmogorov. Toate analizele statistice efectuate pe baza analizei parametrice, pe măsură ce datele brute au fost distribuite în mod normal. Valorile au fost exprimate ca medie ± SEM. Pentru a evalua diferențele dintre grupurile studiate, a fost utilizată Analiza varianței (ANOVA) într-un mod cu testul t simplu pentru a compara media grupului și P Mergeți la

  • Abstract
  • Introducere
  • Materiale și metode
  • Rezultate
  • Discuţie
  • Concluzie
  • Referințe

Efectul carcasei piramidei egiptene asupra greutății rinichiului drept la șobolanii nefrectomizați unilaterali (UNx)

Găzduirea șobolanilor UNx fie în interiorul cuștilor de acasă, fie în modelul piramidei egiptene a indus o creștere semnificativă (P

Notă: Valorile sunt mijloace ± SEM (n = 7 pe grup) a: semnificativ la (P

Notă: Valorile sunt media ± SEM (n = 7 pe grup). a: Semnificativ la (P

Notă: Valorile sunt media ± SEM (n = 7 pe grup). a: Semnificativ la (P

Figura 3:Efectul carcasei piramidei egiptene asupra nivelului proteinelor serice (g/dl) și la șobolanii nefrectomizați unilaterali (UNx). Valorile sunt medii ± SEM (n = 7 per grup). a: Semnificativ la (P

Figura 4: Efectul carcasei piramidei egiptene asupra nivelului de uree în urină (g/dl) și la șobolanii nefrectomizați unilaterali (UNx). Valorile sunt medii ± SEM (n = 7 per grup). a: Semnificativ la (P

Figura 5: Efectul carcasei piramidei egiptene asupra nivelului seric de uree (g/dl) și la șobolanii nefrectomizați unilaterali (UNx). Valorile sunt medii ± SEM (n = 7 per grup). a: Semnificativ la (P

Figura 6: Efectul carcasei piramidei egiptene asupra nivelului de acid uric în urină (mg/dl) la șobolanii nefrectomizați unilaterali (UNx). Valorile sunt medii ± SEM (n = 7 per grup). a: Semnificativ la (P

Figura 7: Efectul carcasei piramidei egiptene asupra nivelului seric al acidului uric (mg/dl) și la șobolanii nefrectomizați unilaterali (UNx). Valorile sunt medii ± SEM (n = 7 per grup). a: Semnificativ la (P

Efectul carcasei piramidei egiptene asupra reininei, angiotensinei și aldosteronului la șobolanii nefrectomizați unilaterali (UNx)

Figura 8: Efectul carcasei piramidei egiptene asupra nivelului de renină (mmol/l) și la șobolanii nefrectomizați unilaterali (UNx). Valorile sunt medii ± SEM (n = 7 per grup). a: Semnificativ la (P

Datele ilustrate în figurile 8-10 au arătat o scădere semnificativă (P

Figura 10: Efectul carcasei piramidei egiptene asupra nivelului de aldosteron (mmol/l) și la șobolanii nefrectomizați unilaterali (UNx). Valorile sunt medii ± SEM (n = 7 per grup). a: Semnificativ la (P

Constatări histologice

Figura 11 ilustrează modificările histologice la rinichi la șobolani UNx după adăpostirea în interiorul modelului piramidei egiptene. Figura 11A și 11B reprezintă examinarea microscopică a rinichiului în grupuri simulate care prezintă tubuli renali normali și glomeruli renali. Glomeruli dilatați cu zonă focală de tubuli renali vacuolați (săgeți) au fost observați la șobolani UNx adăpostiți în cuști pentru 24 și 48 de ore (Figura 11C și 11D). Găzduirea șobolanilor UNx timp de 24 și 48 de ore în interiorul modelului piramidal a demonstrat țesut renal sănătos (Figura 11E și 11F).

Figura 11: Micrografii ușoare ale secțiunilor renale reprezentative (pata de hematoxilină și eozină, x 400) de la șobolani fals (A, B), șobolani unilaterali nefrectomizați (UNx) adăpostiți în cuștile de acasă timp de 24 și respectiv 48 de ore (C&D) și șobolani UNx adăpostiți sub mediu model piramidă timp de 24 și respectiv 48 de ore (E&F). G: glomerul, BC: capsula Bowman’s, T: tubuli.

Discuţie

Forma piramidei este văzută ca o sursă supranaturală de energie a universului. Puterea energetică din interiorul piramidelor este o modalitate de recuperare a câmpurilor electromagnetice (EMF) care au fost esențiale pentru comunicarea celulelor vii [21]. Acum, piramidele sunt utilizate foarte eficient pentru echilibrarea centrelor de energie din corpul uman, vindecarea medicală și efectele anti-stres [22,23]. Din câte știm, eficacitatea carcasei modelului piramidei egiptene în prevenirea insuficienței renale în urma rezecției chirurgicale a carcinomului renal nu a fost studiată până acum. Prin urmare, studiul de față a postulat că adăpostirea șobolanilor nefrectomizați în stadiile incipiente (24 și 48 de ore) în interiorul unui model al piramidei egiptene poate preveni insuficiența renală concomitentă cu nefrectomia unilaterală (UNx).

Unul dintre cele mai bine recunoscute mecanisme de insuficiență renală după nefrectomie este hiperfiltrarea în nefronii rămași, despre care se crede că induce glomeruloscleroză focală și segmentară, deteriorând în continuare nefronii rămași [24,25]. Astfel, rinichiul rămas crește ca mărime ca răspuns la hiperfiltrare și începe să compenseze partenerul dispărut [26,27]. Pierderea masei renale sau UNx este asociată cu adaptări funcționale și morfologice în țesutul rămas. Cel mai proeminent răspuns după UNx este o creștere a dimensiunii și greutății rinichiului rămas. În concordanță cu sugestia anterioară, prezentul studiu a confirmat constatarea lui Gava și colab. [28] și Mjøen și colab. [29], care a înregistrat o creștere semnificativă a greutății rinichiului drept după UNx la șobolani. Mai mult, Abdellatif și colab. [30] a raportat că UNx poate fi asociat cu mărirea și hipertrofia rinichiului rămas.

Cu toate acestea, creșterea renală compensatorie a avut loc la șobolani UNx, fie adăpostiți în cuștile lor de acasă, fie în interiorul piramidelor. Pentru a determina dacă creșterea renală compensatorie la șobolanii UNx însoțită sau nu de insuficiență renală, prezentul studiu a continuat să investigheze funcția renală. Nivelurile serice de uree și creatinină sunt adesea considerate ca fiind markeri fiabili pentru măsurarea funcției renale [31]. De acord cu raportul lui Baracho și colab. [32] și Bai și colab. [33] studiul de față a înregistrat o scădere marcată a nivelurilor de uree, acid uric și creatinină în urina șobolanilor UNx adăpostiți în cuștile lor de casă concomitent cu creșterea semnificativă a nivelurilor lor în ser. Afectarea nivelurilor de uree și creatinină în urină și ser după nefrectomie poate indica distructivă în capacitatea rinichilor de a filtra aceste produse reziduale din sânge și de a le excreta în urină [34,28]. Găzduirea șobolanilor UNx în modelul piramidal pentru 24 și 48 de ore a indus îmbunătățirea funcției renale, așa cum este indicat de îmbunătățirea nivelurilor parametrilor studiați.

Concentrația de electroliți Na + și K + în fluidul extracelular este menținută de rinichi [47]. Prezentul studiu a susținut rapoartele lui Gava și colab. [28]; Calunga și colab. [48] ​​care a înregistrat o creștere semnificativă a ratei excreției de sodiu în șobolanul UNx concomitent cu creșterea acestuia în ser. Această creștere poate fi atribuită unei scăderi a reabsorbției fracționate de sodiu în tubii proximali [49]. Rata ridicată de excreție de sodiu, potasiu și claciu în urină se poate datora sarcinii de filtrare crescută asupra glomerulilor rămași, care ar putea duce la creșterea excreției ionilor din și la scăderea acumulării de ioni în plasmă [50]. Adăpostirea șobolanilor Nx în piramidele egiptene nu a afectat nivelurile de electroliți din urină și ser, ceea ce poate sugera că adăpostirea în interiorul modelului piramidei ameliorează funcția rinichilor prin anumite mecanisme, altele decât homeostazia electroliților.

Concluzie

Prezentul studiu a arătat că adăpostirea șobolanilor nefrectomizați în interiorul modelului piramidei egiptene poate fi o nouă strategie potențială de prevenire a CKD după rezecția tumorii renale. De asemenea, studiul actual a sugerat că mediul piramidal joacă un rol important în ameliorarea efectelor grave ale nefrectomiei prin îmbunătățirea funcției renale. Cu toate acestea, sunt necesare studii suplimentare pentru a elucida mecanismul prin care mediul piramidal a inversat acțiunile nefrectomiei la șobolani.