Nina V. Malkevich

și Emergent BioSolutions, Gaithersburg, Maryland, SUA

anticorp

Robert J. Hopkins

și Emergent BioSolutions, Gaithersburg, Maryland, SUA

Edward Bernton

și Emergent BioSolutions, Gaithersburg, Maryland, SUA

Gabriel T. Meister

b Centrul de cercetare biomedicală Battelle (BBRC), West Jefferson, Ohio, SUA

Eric M. Vela

b Centrul de cercetare biomedicală Battelle (BBRC), West Jefferson, Ohio, SUA

George Atiee

c Studii clinice la nivel mondial, San Antonio, Texas, SUA

Virginia Johnson

și Emergent BioSolutions, Gaithersburg, Maryland, SUA

Gary S. Nabors

și Emergent BioSolutions, Gaithersburg, Maryland, SUA

Ronald T. Aimes

și Emergent BioSolutions, Gaithersburg, Maryland, SUA

Boris Ionin

și Emergent BioSolutions, Gaithersburg, Maryland, SUA

Mario H. Skiadopoulos

și Emergent BioSolutions, Gaithersburg, Maryland, SUA

Abstract

INTRODUCERE

Bacillus anthracis, agentul etiologic al bolii antraxului, este clasificat de Centrele pentru Controlul și Prevenirea Bolilor ca agent de amenințare biologică din categoria A și prezintă un risc pentru securitatea națională datorită ușurinței sale de diseminare și a ratelor ridicate de mortalitate care ar avea loc în populației în caz de expunere prin inhalare. Boala apare atunci când un individ este expus la B. anthracis prin căi gastro-intestinale, cutanate, de injecție sau de inhalare. Antraxul inhalator este cea mai letală formă a bolii și, dacă nu este tratată, este aproape 100% fatală (1). Morbiditatea și mortalitatea cauzate de B. anthracis se datorează în principal trei factori de virulență bine caracterizați, care includ o capsulă de poliglutamat și două exotoxine proteice. Capsula de poliglutamat previne fagocitoza bacteriei (2). Trei polipeptide, antigenul protector (PA), factorul letal (LF) și factorul edem (EF), interacționează pentru a forma două exotoxine. PA și LF se combină pentru a produce toxina letală antrax (LT), iar PA și EF se combină pentru a produce toxina edem (ET) (2). LT este cauza predominantă a bolilor severe și a decesului după inhalare B. expunerea la spori de anthracis (3, 4).

Mortalitatea poate fi prevenită dacă se administrează antibiotice începând la scurt timp după expunerea la spori (5, 6). Cu toate acestea, orice întârziere în inițierea terapiei antimicrobiene poate duce la toxemie, care reprezintă cea mai mare parte a morbidității și mortalității asociate cu inhalarea progresivă a bolii antraxului (7, 8). Utilizarea antitoxinelor antrax, cum ar fi AVP-21D9, a fost investigată ca tratament împotriva toxemiei antraxului (9, –13).

AVP-21D9 este un anticorp IgG1 (κ) monoclonal anti-PA complet uman derivat inițial din plasmă colectat de la un voluntar sănătos care fusese imunizat cu cel puțin patru doze de BioThrax (Vaccinul antraxic adsorbit) și avea un nivel ridicat de anticorpi anti-PA (14). AVP-21D9 se leagă de B. anthracis PA cu afinitate subnanomolară și neutralizează toxinele antrax (15). Anterior, Peterson și colab. (15) a arătat că AVP-21D9 a salvat 100% dintre iepuri la un nivel de doză de 1 mg/kg greutate corporală atunci când a fost administrat în același timp cu o provocare intranazală cu spori de antrax.

MATERIALE ȘI METODE

Testarea și controlul articolelor.

AVP-21D9 a fost exprimat în celulele ovariene de hamster chinezesc (CHO) -K1 adaptate pentru a crește în mediu fără ser în baloane de cultură celulară Integra (Integra Biosciences US, Hudson, NH) și a fost produs la o scară de 100 litri bioreactor, în conformitate cu bunele practici actuale de fabricație la WuXi AppTec (Philadelphia, PA). Anticorpii AVP-21D9 au fost purificați prin afinitate pe o coloană de proteină A la> 95% puritate, după cum s-a apreciat prin analiza electroforezei pe gel de dodecil sulfat-poliacrilamidă de sodiu. Afinitatea medie (± deviație standard) de legare la PA a fost de 0,05 ± 0,03 nM, determinată folosind un instrument BiaCore 3000 (BiaCore Life Sciences, Piscataway, NJ). Soluție salină normală injectabilă sterilă fără pirogen a fost utilizată pentru grupurile de control negativ.