Centrul de proteine ​​al
Biroul de biotehnologie al Universității de Stat din Iowa

  • Servicii
    • Documentare și analiză gel 1D și 2D
    • Electroforeza pe gel 2-D
    • Cromatografie lichidă de înaltă performanță (HPLC)
    • Servicii de hibridom
    • Digestie în gel și soluție
    • Focalizare isoelectrică (IEF)
    • Analiza masei MALDI
    • Sinteza peptidelor
    • Secvențierea proteinelor/peptidelor
    • Q Spectrometrie de masă tandemă activă (LC-MS/MS)
    • SDS-PAGE și Electroblotting
    • Synapt G2-Si HDMS
    • Sistem de imagistică a taifunului

  • Instrumentaţie
  • Taxe
  • Formulare de depunere
    • Creați formulare de depunere
  • Personal
  • Seminarii
    • Seminarii viitoare
    • Seminarii anterioare
  • Manuale/Știri/Informații
    • Manuale
    • Știri
    • informatii suplimentare
  • Link-uri

SDS-PAGE și Electroblotting

În prezent, folosim un sistem de celule cu placă dublă Mini-PROTEAN II și un sistem de celule de transfer electroforetic Mini Trans-Blot, ambele de la Laboratoarele Bio-Rad.

Următoarea este o descriere generală a SDS-PAGE și blotting pentru analiza aminoacizilor și secvențierea proteinelor N-terminale.

SDS-PAGE
Electroforeza pe gel de poliacrilamidă cu dodecil sulfat de sodiu (SDS-PAGE) în prezența unui agent reducător (2-mercaptoetanol) este o tehnică pentru separarea subunităților polipeptidice în funcție de greutatea lor moleculară. Protocolul implică denaturarea probei de proteine ​​prin încălzirea acesteia în prezența SDS și a unui agent reducător. SDS se va lega de proteină provocând desfășurarea acesteia, în timp ce agentul reducător va reduce legăturile disulfură intramoleculare și intermoleculare. Legarea SDS de către proteină conferă o sarcină negativă netă și polipeptida denaturată va migra printr-un gel de procent cunoscut de acrilamidă în prezența unui câmp electric aplicat spre electrodul pozitiv (anod). După terminarea electroforezei, gelul este colorat cu Coomassie "Blue R-250 pentru a vizualiza benzile polipeptidice. Greutatea moleculară a polipeptidei este invers proporțională cu mobilitatea sa. Greutatea moleculară a subunității polipeptidice poate fi estimată direct dintr-un semilog graficul greutății moleculare a proteinelor standard față de mobilitatea lor sau dintr-un grafic al jurnalului greutății moleculare față de mobilitate Separarea proteinelor prin SDS-PAGE este o tehnică excelentă pentru producerea proteinelor „purificate” individual.

  • SDS-PAGE „Sala rușinii” de la Universitatea Rice - exemple de geluri care nu au funcționat corect și cauza
  • Geluri pătate de la Universitatea Rice - exemple de geluri pătate și motivele
  • Creați formularul de trimitere

Contactul facilității

E-mail:
Telefon: (515) 294-3267
Fax: (515) 294-7629

Orele facilității

  • Luni vineri
  • 7:00 - 17:00
  • Sărbători universitare închise

Directii

  • Harta clădirii
  • Harta campusului ISU
  • Hărți Google
  • GPS: N42.031333 °, W93.649521 °

Informații despre servicii

Mesaje de facilități

Personalul facilității nu va fi disponibil în perioada 8-16 iunie.
Cele mai multe eșantioane de cereri nu vor fi procesate în această perioadă de timp. Facilitatea va rămâne deschisă pentru accesul la instrumentele operate de utilizator, dar asistența va fi limitată. Ne cerem scuze pentru neplăcerile pe care acestea le pot provoca. Vă rugăm să planificați în consecință.

--> 16 martie 2020
Datorită îngrijorării crescute cu privire la noul coronavirus COVID-19, Facilitatea de proteine ​​a Universității de Stat din Iowa va rămâne deschisă, dar accesul la facilități va fi limitat doar personalului facilității până la o nouă notificare.
Pentru a renunța la probe sau pentru a folosi Typhoon sau Denovix DS-11, vă rugăm să sunați la 294-3267 sau să trimiteți un e-mail la [email protected] pentru a face aranjamentele corespunzătoare.

Vă rugăm să verificați pagina de informații COVID-19 a Universității la https://web.iastate.edu/safety/updates/covid19 și pagina noastră web (www.protein.iastate.edu) pentru actualizări și modificări suplimentare.

3 iulie 2019
Serviciile de hibridom se mută în instalația proteică Mai mult.

15 martie 2018
Analiza datelor proteomice Mai mult.

31 august 2017
Nou IM-MS instalat Mai mult.

5 iulie 2017
Noul nano-LC a fost instalat Mai mult.

30 mai 2017
Un nou secvențier a instalat Mai multe.

19 aprilie 2017
Nou MALDI a instalat Mai multe.

27 iunie 2016
Protein Facility achiziționează software pentru proteomică cantitativă. Marea.

24 august 2015
Serviciul de dicroism circular (CD) a fost întrerupt, a se vedea aici pentru detalii.

22 ianuarie 2015
Centrul de proteine ​​achiziționează spectrometrul de masă hibrid Q Exactive ™ hibrid cvadrupol-orbitrap de la Thermo Scientific. Marea.

12 iunie 2014
Nou Typhoon FLA 9500 instalat. Marea. ->

Facilitatea de proteine ​​a Biroului de Biotehnologie al Universității de Stat din Iowa
1178 Clădirea de biologie moleculară, 2437 Dr. Pammel, Ames, IA 50011-1079
Telefon: 515-294-3267, E-mail: