Fluorografia gelului de poliacrilamidă

Fluorografia este o versiune îmbunătățită a autoradiografiei, dar în prezența unui compus fluorescent. Este o tehnică de determinare a radioactivității în geluri și alte medii printr-o combinație de fluorescență și fotografie. Când macromoleculele marcate radioactiv, cum ar fi proteinele, sunt separate prin electroforeză, o mare parte din radiații este absorbită de gel, iar autoradiografia unui astfel de gel dă rezultate slabe. Pentru emițătorii cu energie redusă, cum ar fi tritiul și 14 C, sensibilitatea fluorografiei este de multe ori mai mare decât cea a autoradiografiei. Fluorografia poate fi fotografiată pentru informații calitative sau analizată prin scanare pentru rezultate cantitative.

gelurilor

Principiu

În tehnica fluorografică, un fluor/scintilator impregnat în gel absoarbe radiația din izotop și retransmite lumină care trece prin gel în film producând o imagine fotografică analogă unui autoradiograf.

Materiale
»Dimetil sulfoxid (DMSO)
»Soluție PPO (2,5 difenin oxazol): Se dizolvă 22 g PPO și se completează până la 100 ml în DMSO
»Soluție de fixare: 7% acid acetic, 20% metanol în apă distilată.
»Unitate bliț fotografic (cu ecran roșu pe fereastra blițului)
»Film cu raze X (Kodak X-omat AR)
»Uscător cu gel
»Dezvoltator de film

Referințe
1. Bonner, W M și Laskey, R A (1974) Eur J Biochem 46 83.
2. Laskey, R A și Mills, A D (1975) Eur J Biochem 56 335.