Agnès Waret-Szkuta

1 IHAP, Universitatea din Toulouse, INRA, ENVT, Toulouse, Franța

Laurent Larraillet

2 Groupe Altitude, Aurillac, Franța

Isabelle P. Oswald

3 Toxalim (Centrul de Cercetare în Toxicologie Alimentară), Universitatea din Toulouse, INRA, ENVT, INP-Purpan, UPS, 31027 Toulouse, Franța

Xavier Legrand

2 Groupe Altitude, Aurillac, Franța

Philippe Guerre

4 ENVT, Toulouse, Franța

Guy-Pierre Martineau

4 ENVT, Toulouse, Franța

Date asociate

Partajarea datelor nu se aplică acestui articol, deoarece nu au fost generate sau analizate seturi de date în timpul studiului actual.

Abstract

fundal

O creștere a apariției contaminării cu alcaloizi de ergot a fost observată în Europa în ultimii ani. Semnele clinice tipice ale otrăvirii cu ergot de porc sunt afectarea creșterii, agalactia și, uneori, gangrena. Oportunitățile de raportare a dozelor de expunere asociate cu semne clinice la animale în condiții de câmp sunt rare.

Prezentarea cazului

Într-o fermă de porci la sfârșit, cu 160 de scroafe, a fost raportată o mortalitate neonatală acută excesivă în asociere cu pierderea poftei de mâncare și agalactia la scroafe. A fost efectuată o examinare a efectivului și s-a confirmat o rată ridicată a pierderii purceilor și a agalactiei la 13 scroafe din lotul cel mai afectat de 20. Necropsia a arătat purcei cu stomacul și intestinul gol, cu mucoasă aparent normală. Probele de dietă de scroafă gestantă și care alăptează, precum și o probă de grâu, au fost trimise spre analiză în urma inspecției fabricii de furaje și a unei ipoteze a contaminării cu micotoxine a furajelor auto-preparate. Cromatografia lichidă cu spectrometrie de masă în tandem a dezvăluit o cantitate totală de alcaloizi de ergot în toate probele variind de la 3,49 mg/kg (dietă gestantă) la 8,06 mg/kg (dietă lactantă). Furajele contaminate au fost eliminate și situația a revenit la normal 3 săptămâni mai târziu (după lotul de scroafe).

Concluzie

În cazul de față, expunerea scroafelor la 3,49 mg/kg alcaloid ergot timp de 10 până la 15 zile înainte de sfârșitul gestației și la 8,06 mg/kg alcaloid ergot timp de 3 până la 4 zile la începutul lactației - corespunzând unui conținut de 10.146 mg de sclerotie/kg în grâul dietelor - au condus la agalactie la 13 din 20 de scroafe într-un lot și la o rată ridicată a mortalității neonatale pentru toate litiere. Nu au fost observate semne clinice asociate cu efecte vasoconstrictive.

fundal

Acest raport descrie intoxicația cu alcaloizi de ergot într-o fermă de porci franceză de 160 de scroafe, care a dus la mortalitate neonatală ridicată și agalactie. Expunerea scroafelor afectate a fost urmărită retrospectiv deoarece semnele clinice au fost acute și au coincis cu încorporarea în dietă a unui nou lot de grâu.

Ergot este o ciupercă parazită din genul Claviceps care infestează diferite boabe, în principal secară, grâu și orz, în timp ce infestează și ierburi. Infestarea cu Claviceps se caracterizează printr-o masă întunecată de miceliu numită sclerotie care produce metaboliți secundari toxici: alcaloizii de ergot (EA) [1, 2]. Până în prezent au fost identificate peste 50 de EA diferite. Principalele EA produse de speciile Claviceps sunt ergometrina, ergotamina, ergosina, ergocristina, ergocryptina și ergocornina [2]. Semnele clinice tipice ale otrăvirii cu ergot raportate la porci sunt vasoconstricția, care poate evolua în gangrena, întreruperea reproducerii, avortul, agalactia și creșterea afectată [3, 4]. Deși otrăvirea acută a devenit rară [2], EA sunt o sursă de îngrijorare, deoarece continuă să fie detectate în cereale și produse din cereale din Europa și America de Nord [5-7].

În funcție de țară, reglementările se bazează pe cantitatea de sclerotie sau cantitatea de EA totală pe kilogram de materie primă sau furaje. În Europa, Comisia Europeană a stabilit conținutul maxim la 1000 mg de sclerotie/kg de furaje care conțin cereale nemăcinate [8]. Țările individuale din întreaga lume au stabilit limite de toleranță diferite [9], iar cercetările recente sugerează că limita merită reevaluată [2]. În Canada, nivelurile maxime admise de EA sunt definite pe specie și sunt cuprinse între 4 și 6 mg/kg (ppm) în hrana pentru porci [9]. În general, 5-10 μg EAs/kg greutate corporală (BW) reprezintă pragul general pentru toate animalele, totuși Autoritatea Europeană pentru Siguranța Alimentară (EFSA) recomandă doze de până la 0,6-1 μg EAs/kg BW pentru a evita efectele lor vasoconstrictoare. . [3].

Sunt disponibile diferite teste de diagnostic pentru detectarea micotoxinelor din cereale și furaje, inclusiv cromatografia în strat subțire, spectroscopia în infraroșu apropiat, cromatografia lichidă la presiune înaltă (HPLC), testul imunosorbent legat de enzime (ELISA) și cromatografia lichidă cu spectrometrie de masă în tandem (LC/MS/MS) [4, 9]. Fluorescența nu a fost raportată ca fiind de încredere, iar kiturile ELISA pot fi utilizate pentru detectarea inițială, dar LC/MS/MS este considerată metoda de alegere, deoarece este foarte specifică și poate fi utilizată pentru a identifica mai multe micotoxine care pot contamina boabele și furajele. în același timp [4].

Probele de cereale și furaje trebuie să fie reprezentative pentru ceea ce este consumat de animale. Cu toate acestea, din cauza potențialului ca micotoxicoza să ducă la complicații cronice, situațiile în care boabele suspectate de furaje sunt încă disponibile sunt rare, la fel ca și măsurătorile expunerii animalelor pe teren. Astfel, efectul EA asupra porcilor este raportat în principal în medii experimentale [2, 10, 11]. Rapoartele de caz pot permite reglarea fină a limitelor de reglementare pentru o protecție adecvată.

Prezentarea cazului

Cazul descris a apărut într-o fermă franceză de scroafă de 160 de scroafe, administrată în 7 loturi de 20 de scroafe la fiecare 3 săptămâni. Două clădiri sunt în incintă. Prima clădire conține zona de reproducere, scroafele gestante și 2 camere pentru purceii înțărcați. Al doilea conține 3 camere de fătare (2 pentru zece scroafe fiecare și una pentru 20 de scroafe) și 4 camere pentru finisarea porcilor. Furajele erau făcute de casă, cu excepția furajelor și cereau achiziționarea de cereale atunci când cele recoltate de proprietar erau consumate (18 ha erau cultivate pentru cereale). Hrana a fost livrată manual în camerele de fătare, care conțineau și băutori individuali. Scroafele au intrat în camera de fătare cu 1 săptămână înainte de fătare (joi). Au primit o dietă „gestantă” până duminică și apoi o dietă „lactantă” începând de luni (cu 2 zile înainte de data așteptată a fătării). Compoziția celor două diete care acoperă necesitățile nutriționale ale porcilor este prezentată în tabelul 1. Apa folosită provine dintr-o gaură arteziană, este clorurată (0,5 mg/L) și este analizată în mod regulat. Performanțele nu au fost înregistrate electronic, dar fermierul a raportat înțărcarea medie a 10,5 purcei pe așternut, iar mortalitatea medie înainte de înțărcare a fost estimată la aproximativ 17,3% în anul anterior vizitei.

tabelul 1

Compoziții dietetice de scroafă gestante și care alăptează și energie netă calculată, proteine ​​brute și conținut total de lizină

Dieta gestantă Dieta lactantă
Grâu15,5%48,51%
Orz65,08%25,99%
Sunt10,64%12,51%
Semințe de in extrudate5,17%4,81%
Minerale și vitamine3,62%4,33%
Tărâţe0%3,85%
Energie neta (MJ)9.69.7
Proteine ​​brute (%)14.215.0
Lizină totală (%)0,640,66

Mortalitatea bruscă excesivă a purcelușului la 24 până la 48 de ore după naștere a apărut în asociere cu pierderea poftei de mâncare la scroafe, care au fost prosternate și au prezentat agalactie, determinând fermierul să solicite o examinare a efectivului.

Vizita sa concentrat asupra camerelor de fătare, deoarece nu au fost observate semne clinice vizibile în zona de reproducere sau în timpul gestației. Istoria nu a dezvăluit nicio problemă specială legată de mediul din camera de fătare. Temperaturile camerei au fost stabilite la 23 ° C. În prima cameră de fătare, unde purceii se născuseră cu 12 până la 48 de ore înainte de vizita noastră, toate cele 20 de scroafe au fost afectate. Informațiile scrise manual referitoare la fiecare scroafă disponibile în cameră au fost compilate pe o foaie unică. Rata mortalității în litiere a fost în medie de 79%, variind de la 23% (3 purcei din 13) la 100% (16 purcei din 16). La litiere mai puțin afectate, purceii rămași au fost slăbiți, dar încă în viață. Scroafele erau fie culcate ventral, fără acces la uger pentru purcei, fie au prezentat agalactie (Fig. 1) fără un comportament matern adecvat.

mortalitate

Uger cu dezvoltare redusă, semn de agalactie

Scroafele au prezentat pierderea poftei de mâncare (3 hrănitoare nevariate din 20, dintre care unul era plin) și 50% păreau anormal de pasive atunci când hrana a fost distribuită. Adâncimea lor de grăsime din spate nu a fost măsurată și, deși starea părea sub-optimă, nu s-a observat nicio ulcerație de umăr. Temperaturile rectale de la scroafe care nu și-au terminat mesele au fost ușor sub cele așteptate (38,3 ° C și 38,6 ° C față de 39,1 ° C). Fecalele scroafelor erau normale. Mediul părea puțin răcoros pentru purcei, deoarece unii purcei erau îngrămăditi.

În a doua cameră de fătare, purceii erau cu 3 săptămâni mai în vârstă. Ratele mortalității purceilor au fost în medie de 24%, variind de la 0 la 62,5% (6 purcei înțărcați din 16 născuți în viață). Prolificitatea medie a fost de 13,7, rata medie a născuților morți a fost de 0,75 (de la 0 la 4), iar numărul mediu de purcei înțărcați pe așternut a fost de 9,7, ceea ce a fost scăzut comparativ cu performanțele obișnuite la fermă.

Au fost necropsiți șapte purcei din șapte așternuturi din prima cameră de fătare. Unul a prezentat hemoragie la nivelul rinichiului și intestinului drept, probabil din cauza zdrobirii. Stomacul era gol cu ​​mucoasa aparent normală. Nu au fost observate leziuni la celelalte 6 purcei. Aveau stomacul gol și intestinele cu mucoasă aparent normală.

A fost efectuată o examinare atentă a sistemului de hrănire și s-au prelevat mai multe probe de hrană de sol auto-pregătită pentru scroafe gestante și care alăptează, precum și probe de grâu, din cauza suspiciunii de intoxicație cu ergot. Eșantioanele multiple prelevate din fiecare furaj și grâu au fost combinate, bine amestecate și sub-eșantionate pentru a asigura reprezentativitatea fiecărei probe finale. Silozurile au fost golite în mod regulat, iar grâul a început să fie distribuit cu 15 zile înainte de prima fătare a unei scroafe în camera de fătare cea mai problematică.

Observarea eșantionului de grâu a relevat boabe lungi și negre: sclerotia ergotului (Fig. 2).

Grâul ergot sclerotia

Analiza micotoxinei prin cromatografie lichidă cu spectrometrie de masă în tandem a fost efectuată într-un laborator situat în Bretania. Valorile obținute pentru micotoxine, altele decât EA (Trichothecenes, DON, Aflatoxins, Fumonisins, Zearalenone) au fost în intervalul normal de valori [1, 4] și nu sunt prezentate aici (Tabelul 2).

masa 2

Rezultatele de laborator pentru principalii alcaloizi de ergot, determinate prin metoda LC-MS/MS

Minim: 0,5; Moderat: 1; Înalt: 2

Nivelurile de alcaloizi de ergot au fost însumate și sunt prezentate în Tabelul Tabel2 2 pentru fiecare dintre furaje și grâu. Cantitatea totală de alcaloizi de ergot a variat de la 3,49 mg/kg în hrana gestației până la 8,06 mg/kg în hrana pentru alăptare. A fost de 16,06 mg/kg în grâu. Pentru lotul de scroafe din prima cameră de fătare, dieta de gestație contaminată a fost hrănită timp de aproximativ 2 săptămâni și dieta de lactație timp de 3 până la 4 zile. În a doua cameră de fătare, scroafele au primit probabil 2 săptămâni de dietă în perioada de alăptare și dietă de gestație normală.

Grâul a fost, de asemenea, inspectat vizual. Laboratorul a returnat un rezultat de 10.146 mg de sclerotie/kg, care a corespuns cu 4922 mg de sclerotie/kg în dieta de alăptare.

Fermierul a primit recomandări pentru (i) îndepărtarea grâului din diete și pentru a furniza înlocuitor de lapte sau furaj pentru purceii rămași; (ii) crește temperatura camerei în camera de fătare cu cei mai tineri purcei; și (iii) distribuie sorbitol scroafelor pentru a stimula apetitul, adăugând în același timp argilă (2%) la hrana animalelor în următoarele câteva săptămâni. În general, 76 și 25% dintre purcei au murit din prima și, respectiv, a doua cameră de fătare. Unii purcei au prezentat diaree, dar situația a revenit la normal după 3 săptămâni (următorul lot de scroafe). Impactul asupra creșterii animalului nu a putut fi determinat, deoarece nu au fost păstrate înregistrări electronice. Grâul a fost ținut în coșul de alimentare până la evaluarea pentru asigurare. Coșul a fost apoi golit complet, spălat și fumigat. Investigațiile privind originea grâului au arătat că acesta a fost refuzat pentru selectarea semințelor, ceea ce a explicat prețul său scăzut. Acesta a fost analizat la nivelul furnizorului în ceea ce privește nivelul maxim acceptabil de contaminare cu ergot, dar informațiile s-au pierdut și nu au ajuns la fermier înainte de a fi încorporate în dietă.

Discuţie

Intoxicația cu ergot la porci este rar raportată pe teren. Cu toate acestea, EA sunt o sursă de îngrijorare în Europa și America de Nord pentru animale și, de asemenea, pentru oameni, deoarece acestea continuă să fie detectate în cereale și produse din cereale [5, 6]. Există încă probleme cu recomandările privind nivelurile sigure de ergot în furaje, iar EFSA a stabilit că sunt necesare încă noi metode validate pentru a cuantifica alcaloizii de ergot în materie primă pentru a oferi limite de reglementare mai fiabile pentru fiecare alcaloid individual. Nivelurile admise de contaminare cu ergot în cerealele și furajele sunt variabile în funcție de regiunile lumii, iar nivelurile acceptabile de expunere depind de speciile luate în considerare [9]. Studii experimentale recente sugerează că limitele de reglementare ar trebui revizuite, iar rapoartele de teren ar putea contribui la această revizuire [2]. Într-adevăr, întrucât forma clinică a fost acută în acest caz, am avut șansa să prelevăm cerealele și furajele consumate de animale. Estimările expunerii care reflectă momentul expunerii sunt importante, la fel ca și susceptibilitatea specifică a ultimei treimi a gestației [4].

Aspectul fizic al boabelor nu este un indicator precis pentru prezența micotoxinelor, iar corelația dintre numărul de spori și/sau creșterea fungică și concentrația micotoxinelor este raportată a fi scăzută [4]. Cu toate acestea, observațiile noastre nu au putut confirma această afirmație, deoarece cantitatea de sclerotie a fost asociată cu cantitatea de alcaloizi de ergot. Această asociere s-ar fi putut întâmpla întâmplător, deși poate pune la îndoială și tendința de a prefera metodele analitice.

Într-adevăr, efectul principalilor alcaloizi toxici care au fost dozați este raportat a fi aditiv. Agalactia scroafelor este rezultatul stimulării receptorilor dopaminergici D2, ceea ce duce la suprimarea prolactinei la scroafele însărcinate hrănite cu sclerotie de ergot [12]; purceii se pot naște sănătoși, dar mor de foame din cauza agalactiei și mor din cauza hipoglicemiei. Kopinsky (2008) [11] a arătat că Claviceps africana (sorg) ergot sclerotia hrănită scroafelor și formând până la 1,5% din dietă (echivalent cu 7 mg/kg alcaloizi de ergot) cu 6-10 zile înainte de naștere a cauzat agalactie, cu 87 % dintre purceii mor. Aceste rezultate sunt similare observațiilor noastre, deși o comparație directă este problematică, deoarece Claviceps purpurea nu produce exact aceiași alcaloizi. Valoarea găsită pentru dieta de alăptare pentru cantitatea de sclerotie pe kilogram de hrană pentru alăptare a fost de 5 ori nivelul maxim reglementat european de 1000 mg/kg [8].

Producția de lapte, care nu răspunde la oxitocină atunci când apare intoxicația cu ergot [14], se raportează că se întoarce la 3-7 zile după schimbarea furajului. Între timp, se recomandă utilizarea nutriției suplimentare și a înlocuitorilor de lapte, pentru a salva purceii. Această modificare ar fi putut fugi de către proprietar înainte de vizită, ceea ce nu era cazul și reflectă o gestionare deficitară. Adăugarea de argilă a fost recomandată ca liant de micotoxină. Cu toate acestea, în literatura de specialitate sa raportat că metodele fizice de curățare pentru îndepărtarea corpurilor de ergot sunt eficiente [9].

Concluzie

Expunerea scroafelor la 3,49 mg/kg alcaloid ergot timp de 10 până la 15 zile înainte de sfârșitul gestației și la 8,06 mg/kg alcaloid ergot timp de 3 până la 4 zile la începutul lactației - corespunzând unui conținut de 10.146 mg sclerotie/kg în grâul dietelor - au condus la agalactie la 13 din 20 de scroafe dintr-un lot și la o rată ridicată a mortalității neonatale pentru toate litiere. Până la 76% dintre purcei au murit în camera de fătare cea mai afectată. Grâul a fost eliminat din dietă și situația a revenit la normal după 3 săptămâni (următorul lot de scroafe). Deși otrăvirea acută a devenit rară, rămâne posibilă. Raportarea dozelor de expunere asociate cu semnele clinice și parametrii sanguini poate permite reglarea fină a limitelor de reglementare pentru o protecție adecvată.

Mulțumiri

Autorii ar dori să recunoască sprijinul medicului veterinar al turmei și al fermierului.