Roluri Analiza formală, Investigație, Metodologie, Software, Supraveghere, Validare, Scriere - schiță originală, Scriere - revizuire și editare

rezistența

Departamentul de Radiologie, HGU Gregorio Marañón, Madrid, Spania, Universitatea din Granada, Granada, Spania

Roluri Analiză formală, investigație, metodologie, resurse, software, supraveghere, validare

Departamentul de afiliere pentru radiologie, Spitalul Universitar San Cecilio, Granada, Spania

Investigarea rolurilor, metodologie, resurse, vizualizare

Departamentul de Radiologie, Spitalul Universitar San Cecilio, Granada, Spania, Departamentul de Dermatologie, Complejo Hospitalario de Toledo, Toledo, Castilla-La Mancha, Spania

Roluri Analiză formală, resurse, software, validare, vizualizare

Departamentul de afiliere pentru dermatologie, Complejo Hospitalario de Toledo, Toledo, Castilla-La Mancha, Spania, Complejo Hospitalario Universitario de Granada, Instituto de Investigación Biosanitaria ibs CIBERESP, Granada, Spania

Roluri Conceptualizare, Investigație, Metodologie, Administrare proiect, Resurse, Software, Supraveghere, Validare, Scriere - schiță originală, Scriere - revizuire și editare

Afiliații Universitatea din Granada, Granada, Spania, Complejo Hospitalario Universitario de Granada, Instituto de Investigación Biosanitaria ibs CIBERESP, Granada, Spania, Departamentul de Gastroenterologie, Spitalul Universitar San Cecilio, Granada, Spania

  • Jorge Gonzalez-Cantero,
  • Jose Luis Martin-Rodriguez,
  • Alvaro Gonzalez-Cantero,
  • Juan Pedro Arrebola,
  • Jorge Luis Gonzalez-Calvin

Cifre

Abstract

Rezistența la insulină este precursorul fiziopatologic al diabetului zaharat de tip 2 (DM-2), iar relația sa cu boala hepatică grasă nealcoolică (NAFLD) a fost studiată pe scară largă la pacienții cu obezitate sau sindrom metabolic folosind nu numai ultrasunete, ci și biopsii hepatice sau spectroscopie de rezonanță magnetică a protonilor (H 1-RMS) pentru evaluarea conținutului de grăsime hepatică. În schimb, nu există studii privind rezistența la insulină și NAFLD la indivizii caucazieni slabi sau supraponderali care utilizează H 1-RMN sau biopsii hepatice pentru cuantificarea conținutului de trigliceride hepatice. Obiectivele noastre au fost studierea prezenței rezistenței la insulină la adulții caucazieni slabi și supraponderali și investigarea relației sale posibile cu conținutul de trigliceride hepatice, circumferința taliei (ca proxy al adipozității viscerale), IMC și factorii de risc cardiometabolici.

Metode

Un studiu transversal a fost realizat la 113 indivizi non-obezi, non-diabetici clasificați ca supraponderali (IMC 25-29,9 kg/m 2) sau slabi (IMC 19,5-24,9 kg/m 2). Conținutul de trigliceride hepatice a fost cuantificat prin 3T H1-RMN. NAFLD a fost definit ca un conținut de trigliceride hepatice> 5,56%. Au fost determinate rezistența la insulină (HOMA-IR), adiponectina serică și factorul de necroză tumorală (TNF).

Rezultate

Materiale și metode

Populația de studiu

Un total de 113 adulți caucazieni sănătoși, non-obezi, non-diabetici, cu vârste cuprinse între 25 și 70 de ani, au participat la acest studiu. Participanții au fost recrutați consecutiv printre persoanele supuse examinării la Unitatea de Prevenire a Riscurilor Muncii din Granada (sudul Spaniei) pentru verificare generală anuală de rutină.

Criteriile de excludere ale studiului au fost: istoricul consumului zilnic de alcool> 20 g (bărbați) sau> 10 g (femei), pe baza răspunsurilor la un chestionar validat privind consumul de alcool și confirmarea rezultatelor de către un membru al familiei; prezența markerilor serologici VHB/VHC, hepatită autoimună, ciroză biliară primară, hemocromatoză, boala Wilson, cancer, diabet zaharat sau boală endocrină, cardiacă, renală sau pulmonară; consumul de medicamente care ar putea provoca steatoză (de exemplu corticosteroizi, amiodaronă, metotrexat, tamoxifen); IMC 2; și purtarea unui stimulator cardiac sau a unui alt dispozitiv incompatibil cu 1 H-MRS. Studiul a fost aprobat de comitetul de etică al Spitalului Universitar San Cecilio.

Proiectarea studiilor, evaluări antropometrice și grupuri

Participanții au participat la două întâlniri în termen de 2). Urmând criteriile OMS pentru populațiile occidentale, un individ slab a fost definit printr-un IMC de 18,5-24,9 kg/m 2 și un individ supraponderal printr-un IMC de 25-29,9 kg/m 2. La a doua vizită, sângele a fost extras dimineața după postul de peste noapte, iar conținutul lor de trigliceride hepatice a fost cuantificat prin spectroscopie de rezonanță magnetică de 3 Tesla (3T H 1-RMN).

Au fost apoi stabilite patru grupuri pentru a studia relația dintre rezistența la insulină și conținutul de trigliceride hepatice și factorii de risc cardio-metabolici la persoanele supraponderale și slabe, pe baza IMC-ului lor și a prezenței sau absenței NAFLD (definit prin conținut de trigliceride hepatice> 5,56%, cuantificat de 3T H 1 -MRS): Lean-with-NAFLD, Lean-without-NAFLD, Overweight-with-NAFLD și Overweight-without-NAFLD. Pe baza unui studiu anterior cu metodologie similară și participanți non-obezi (19) și pe un eșantion pilot de 20 de cazuri, a fost estimată o dimensiune totală a eșantionului de 96 de cazuri, presupunând o eroare α de 0,05 și putere (1-β) de 0,8. Prin urmare, mărimea eșantionului pentru fiecare grup a fost stabilită la 25-30 de persoane. Odată ce a fost obținut rezultatul 3T H 1-MRS, participanții au fost alocați consecutiv grupului corespunzător până când s-a atins dimensiunea eșantionului pentru fiecare grup. Toți participanții au primit informații complete și au dat consimțământul informat în scris pentru a participa la studiu.

Analiza de laborator

Nivelurile serice de ALT și aspartat aminotransferază (AST) au fost determinate printr-o metodă cinetică (Cobas c 311, Roche Diagnostics GmbH, Mannheim, Germania), cu coeficienți de variație de 3,3 și respectiv 3,1, glucoza serică prin metoda glucozei oxidazei (enzimatică) (Sisteme Roche/Hitachi Analytics, Roche Diagnostics GmbH), niveluri de adiponectină prin radioimunoanaliză, (Linco Research, St. Charles, MO, SUA), insulină serică prin imunoanaliză electrochiluminiscentă (Elecsys 2010, Roche Diagnostics GmbH), ser TNF-α uman Test imunosorbent legat de enzima TNF-alfa (Biosource Europe, Nivelles, Belgia) și colesterolul seric printr-o metodă enzimatică (Roche Diagnostics GmbH). Rezistența la insulină a fost calculată ca HOMA-IR = insulină de post (mU/L) x glucoză de post (mmol/L)/22,5 [27]. Coeficienții de variație în testele biochimice au variat între 3,1 și 9,9%.

3 Tesla H 1 -MRS analiza

Un studiu de imagistică prin rezonanță magnetică a fost efectuat înainte de spectroscopie, achiziționând spectre in-vivo la 3T cu un sistem Philips Achieva (Royal Philips, Amsterdam, Olanda). A fost utilizat un localizator cu 3 planuri pentru a planifica 1H-MRS, iar spectrele au fost obținute folosind bobina corpului scanerului. Suportul respirator a fost monitorizat cu ajutorul unei centuri respiratorii.

Un singur voxel de 27cm3 (30 x 30 x 30mm) a fost selectat în țesutul hepatic normal din segmentul VI, evitând marginea ficatului, diafragma și vasele de sânge majore. Toate spectrele au fost obținute cu o secvență de mod de achiziție a ecoului stimulat (STEAM), setând următorii parametri: timpul de repetare = 8000; timp de ecou = 20, 40 și 60 ms; numărul de medii ale semnalului = 4 (fără suprimarea apei); și lățimea de bandă = 2000. Datele au fost obținute într-o reținere a respirației. Corecția T2 a fost aplicată și omogenitatea câmpului a fost ajustată automat pentru fiecare voxel.

Imaginile MRS au fost reconstruite cu software-ul Extended MR WorkSpace (Royal Philips). Datele brute au fost completate zero o dată, fără filtru, și au fost corectate de fază, transformate Fourier, corectate de bază și mediate. S-a montat o curbă Marquardt, folosind un model Lorentzian-Gaussian combinat pentru a calcula aria de sub curba vârfurilor de grăsime și apă. Spectrele au fost referite la apa reziduală și vârful dominant al lipidei de metilen (–CH2) la δ = 4,47 și respectiv δ = 1,43 ppm. Procentul de fracție de grăsime (FF) a fost definit ca FA/(FA + WA) x 100, unde FA este zona de sub vârful de grăsime și WA este zona de sub vârful de apă. Datele 1 H-MRS au fost interpretate de un radiolog cu experiență orbit de rezultatele biochimice.

NAFLD a fost definit de un conținut de trigliceride hepatice mai mare de 5,56%, care corespunde la 5,56 g/100g (g trigliceridă la 100 g țesut hepatic umed), așa cum s-a propus anterior [8].

analize statistice

Rezultatele au fost exprimate ca medii ± deviație standard (SD). Testul Kolmogorov-Smirnoff a fost utilizat pentru a verifica normalitatea distribuției datelor. Valorile medii au fost comparate între grupuri cu ANOVA unidirecțională, urmate de testul de comparație multiplă Tukey, testul t cu două cozi al Studentului nepereche sau testul U neparametric Mann-Whitney, după caz. Corelațiile au fost examinate prin analiza regresiei liniare standard Pearson (distribuție normală) sau prin testul Spearman (distribuție non-normală). Testul chi-pătrat a fost utilizat pentru variabilele necontinue.

Analizele de regresie au fost efectuate pe populația globală pentru a crește dimensiunea eșantionului și, prin urmare, puterea statistică pentru a evalua principalii predictori de rezistență la insulină și NAFLD în populația noastră de indivizi non-obezi, non-diabetici. Analiza de regresie multiplă în trepte înapoi a fost efectuată pentru a stabili cei mai semnificativi determinanți ai rezistenței la insulină, introducând următoarele variabile: vârstă, sex, conținut de trigliceride hepatice, circumferința taliei, IMC și ALT seric, AST, GGT, triglicerid, adiponectină și HDL- valorile colesterolului (HDL-C). Analiza de regresie logistică binară înapoi Wald a fost utilizată pentru a studia principalii predictori ai NAFLD, introducând următoarele variabile: vârstă, sex, circumferința taliei, IMC, HOMA-IR și ALT seric, AST, GGT, insulină de post, trigliceride, adiponectină și Valorile HDL-colesterolului (HDL-C). Numai variabile cu P Tabelul 1. Parametri antropometrici și biochimici la indivizii caucazieni slabi și supraponderali.

Conform testului Kolmogorov-Smirnoff, singurele variabile care s-au abătut semnificativ de la o distribuție normală au fost conținutul de trigliceride intrahepatice (p. Tabelul 2. Parametrii antropometrici și biochimici ai indivizilor caucazieni neobezi în funcție de prezența NAFLD.

În comparație cu grupul slab NAFLD, s-au observat valori semnificativ mai mari HOMA-IR, conținut de trigliceride hepatice, circumferința taliei, IMC și valori trigliceridice serice și niveluri semnificativ mai scăzute de adiponectină și HDL-C în grupul supraponderal cu NAFLD. (Tabelul 3)

Singurele diferențe semnificative găsite între grupul supraponderal fără NAFLD și grupul slab fără NAFLD au fost circumferința mai mare a taliei și IMC în primul. În cele din urmă, în comparație cu grupul supraponderal fără NAFLD, grupul slab cu NAFLD a avut un conținut semnificativ mai ridicat de trigliceride hepatice, HOMA-IR și valori ale insulinei în jeun, valorilor AST și ALT și valori semnificativ mai mici ale adiponectinei serice (utilizând ANOVA unidirecțională pentru variabilele continue urmate de testul de comparație multiplă Tukey). Așa cum este prezentat în Fig 1, modificările nivelurilor HOMA-IR și ale adiponectinei serice modificări paralele ale conținutului de trigliceride hepatice din toate grupurile.

Rezistența la insulină, nivelurile serice scăzute de adiponectină și HDL-C și nivelurile serice ridicate de trigliceride au fost considerate a reprezenta o posibilă legătură între NAFLD și boala vasculară aterosclerotică [34]. Această propunere ar putea fi aplicabilă persoanelor slabe, susținută de prezentul studiu la subiecți non-obezi, în care adiponectina, anomaliile profilului lipidic și rezistența la insulină au fost semnificativ asociate cu acumularea crescută de trigliceride hepatice.

Niveluri serice crescute de TNF au fost observate în bolile hepatice cronice [35,36] și în unele cazuri de NAFLD [20,37]. În studiul nostru, nivelurile serice de TNFα au fost mai mari în grupul supraponderal cu NAFLD decât în ​​grupul slab fără NAFLD, dar nu au arătat nicio corelație cu conținutul de trigliceride hepatice, rezistența la insulină sau nivelurile serice de aminotransferază. Implicația sistemului TNF în dezvoltarea rezistenței la insulină și a altor consecințe metabolice la persoanele non-obeze, non-diabetice rămâne de elucidat.

Limitările studiului includ o potențială prejudecată de selecție, în sensul că persoanele supuse unui control general de rutină pot fi mai conștiente de sănătate decât populația generală. În plus, nu a fost posibil să se investigheze progresia naturală a rezistenței la insulină datorită proiectării secțiunii transversale a studiului. Mărimea eșantionului a furnizat o putere statistică adecvată, dar studii suplimentare pe eșantioane mai largi sunt justificate pentru a verifica aceste constatări.

Punctele forte ale studiului includ utilizarea 3T H 1-MRS pentru cuantificarea trigliceridelor hepatice, înscrierea potențială a pacienților, criteriile stricte de excludere impuse și colectarea tuturor măsurătorilor biochimice și 3T H 1-RMS într-o perioadă de 24 de ore.

În concluzie, constatările noastre sugerează că NAFLD, odată stabilit, pare să aducă o contribuție mai mare la rezistența la insulină și la factorii de risc cardio-metabolici în comparație cu circumferința taliei și IMC la persoanele caucaziene non-obeze, non-diabetice.