Articol original

  • Articol complet
  • Cifre și date
  • Referințe
  • Citații
  • Valori
  • Licențierea
  • Reimprimări și permisiuni
  • PDF

Abstract

Obiective: Diabetul zaharat gestațional (GDM) este o intoleranță la carbohidrați care apare în timpul sarcinii. Prezentul studiu a fost aranjat pentru a determina riscul de ischemie cerebrală (IC) la sugarii născuți de mame cu diabet zaharat gestațional și MTHFR polimorfism genic.

complet

Material si metode: Studiul include 70 de femei gravide cu GDM, împărțite în două grupe, în funcție de existența ischemiei cerebrale (IC) la nou-născuți. Toți pacienții au fost testați pentru componentele cascadei de coagulare, polimorfisme ale genei metilenetetrahidrofolat reductazei (MTHFR) și evaluați prin tromboelastografie (TEG).

Rezultate: Am observat că a existat o frecvență crescută (74,2%) de 1298С MTHFR purtători de genotip în rândul femeilor cu nou-născuți CI. Starea de hipercoagulare în conformitate atât cu testele în cascadă de coagulare, cât și cu datele TEG a fost diagnosticată la femeile din acest grup.

Concluzii: Rezultatele acestui studiu sugerează că hiperglicemia poate programa dezvoltarea ischemiei cerebrale la sugarii născuți de femei cu 1298C MTHFR polimorfism genic.

Introducere

Diabetul mellitus gestațional (GDM) este o afecțiune întâlnită frecvent în timpul sarcinii, care este legată de rezistența la insulină și secreția inadecvată de insulină la hiperglicemie. Potrivit Federației Internaționale Diabetice, 20,9 milioane (16,2%) sugari s-au născut în lume în 2015 la mame cu GDM sau mame afectate de alte forme de hiperglicemie [1]. Există o concordanță semnificativă în incidența observată a GDM, a sindromului metabolic și a obezității la populația modernă de femei însărcinate [2, 3].

Impactul diabetului asupra sistemului de coagulare și a funcțiilor endoteliale este cunoscut de mulți ani. Factorii și activitățile hemostatice sunt influențați de starea hiperglicemiantă. Mai mult, sarcina induce o stare hipercoagulabilă ca mecanism fiziologic pentru a asigura echilibrul hemostatic prin prevenirea pierderii masive de sânge matern la naștere [4].

Este important să recunoaștem și să monitorizăm cu strictețe GDM datorită riscului de efecte adverse asupra mamei și fătului, cum ar fi dezvoltarea preeclampsiei, insuficiența placentară, prematuritatea și necesitatea operației cezariene și asocierea acesteia cu leziunile la naștere [5].

Riscul ridicat de tulburări metabolice, sindromul de detresă respiratorie și leziuni neurologice a fost demonstrat la sugarii născuți de mame cu GDM. Aceste efecte adverse ar putea persista la acești sugari într-o viață ulterioară [6].

Majoritatea leziunilor neurologice perinatale (hemoragie intraventriculară, ischemie cerebrală) ar putea fi considerate ca fiind tulburări complexe de dezvoltare, cu contribuții atât din mediu cât și din genă. S-a demonstrat că polimorfismele din metilenetetra-hidrofolat reductază (MTHFR) gena este asociată cu leziuni cerebrale neonatale în prezența hipoxiei perinatale [7].

Având în vedere impactul GDM asupra sistemului de coagulare și transportul oxigenului placentar, influența polimorfismelor genetice asupra fătului și a nou-născutului rămâne încă neclară. Obiectivul studiului a fost de a determina riscul de ischemie cerebrală la sugarii născuți de mame cu diabet zaharat gestațional și MTHFR polimorfism genic.

Metode

Recrutarea subiecților

Un total de 70 de subiecți au fost recrutați (2011-2016) și și-au dat consimțământul în cunoștință de cauză la admiterea la travaliu și la naștere la Institutul de cercetare pentru maternitate și îngrijirea copilului (Ekaterinburg, Rusia) ca parte a investigației în curs a diabetului gestațional aprobat de comitetul de etică instituțional.

Conform criteriilor Asociației Internaționale a Grupurilor de Studiu pentru Diabet și Sarcină (IADPSG) [8], indiferent de vârsta gestațională, diagnosticul GDM în timpul sarcinii se face pe baza glucozei la jeun ≥126 mg/dL; glucoză ≥200 mg/dL, măsurată la 2 ore după o sarcină orală de 75 g glucoză; sau un nivel aleatoriu al glicemiei ≥200 mg/dL, asociat cu simptome clinice.

Pentru confirmarea diagnosticului de GDM s-au folosit valori ale glicemiei la jeun de 92-125 mg/dL sau nivelurile de glucoză de 153-199 mg/dL, măsurate la 2 ore după o sarcină de 75 g de glucoză [9].

Criteriile de excludere pentru acest studiu au fost: diabetul de tip 1 și de tip 2, bolile autoimune și inflamatorii, infecțiile materne sau fetale și anomalia congenitală a fătului.

Toate femeile au fost tratate numai cu controlul dietei pe tot parcursul sarcinii. Toți nou-născuții au fost consultați de un neurolog pediatric în termen de 3 zile de la naștere, iar investigațiile cu ultrasunete cerebrale au fost efectuate cu ajutorul aparatului cu ultrasunete Philips HD 15 (Philips Medical Systems, SUA) cu sondă de 5 MHz.

Femeile cu GDM au fost împărțite în două grupuri, în funcție de existența ischemiei cerebrale (IC) la nou-născuți. Primul grup (principal) conține 31 de femei nou-născuți cu CI, grupul 2d (martor) conține 39 de femei care au născut copii fără CI.

Testele standard de coagulare au fost monitorizate pentru fiecare pacient înainte de travaliu sau cezariană. Probele de sânge venos întreg (3,0 ml) au fost colectate în flacoane conținând 0,3 ml de citrat de sodiu 3,2%. Un mililitru de sânge a fost îndepărtat pentru analiza trombolastografiei (TEG), în timp ce memento-ul a fost utilizat pentru testele PTT și fibrinogen indicate clinic. Determinările TEG au fost efectuate pe analizorul Helena AC-4 (Helena Bioscience Europe, Marea Britanie) conform instrucțiunilor producătorului.

Cele patru variabile măsurate direct au fost: (1) Timp de coagulare (R): timpul de latență până la formarea inițială a fibrinei, (2) Cinetică a cheagurilor (K): viteza la care se atinge un nivel specific de forță a cheagului (20 mm amplitudine) ), (3) Unghiul (α): rapiditatea consolidării cheagului și (4) Amplitudinea maximă (MA): puterea finală a cheagului. În plus, un indice de coagulare (CI) a fost derivat din cele patru variabile măsurate direct. În cele din urmă, LY30 măsoară rata la care amplitudinea scade la 30 de minute după obținerea MA și este reprezentativă pentru descompunerea cheagurilor sau fibrinoliză. De asemenea, s-au efectuat teste standard, incluzând timpul de tromboplastină parțială (PTT), raportul internațional normalizat (INR), timpul de trombină (TB), concentrația fibrinogenului și activitatea fibrinolitică (FA) pentru a evalua eficacitatea cascadei de coagulare. Probele de epiteliu bucal matern au fost genotipate folosind PCR în timp real cu echipamente DT-96, truse și manuale de tehnologie ADN (ADN Technology, Rusia).

analize statistice

Acordul distribuției genotipului cu echilibrul Hardy - Weinberg a fost evaluat folosind testul exact. Un test chi-pătrat a fost utilizat pentru a compara distribuția genotipului și a alelelor între grupuri. Parametrii de coagulare au fost comparați între grupurile de genotip folosind testul Mann-Whitney. Semnificația statistică a fost evaluată la valoarea p Factorii de risc ai ischemiei cerebrale la sugarii născuți de mame cu diabet gestațional

Publicat online:

Tabelul 1. Caracteristicile clinice și demografice ale populației studiate.

Am analizat frecvența determinării genotipului care conține alelele „de risc” în funcție de locusurile polimorfe ale genelor care codifică proteinele în cascadă de coagulare F5: 1691 G> A, F2: 20210 G> A, FGB: 455 G> A, PAI-1: 5 G> 4 G, ITGA2: 807 C ≫ T, ITGB3 1565 T ≪ C, MTR 2756 A> G, MTRR 66 A> G, MTHFR 677С> Т и MTHFR 1298 A> C.

Am observat că a existat o frecvență crescută (74,2%) a genotipului MTHFR cu polimorfism 1298 A> C. Alela variantă 1298 C în starea homo- și heterozigot a fost găsită la toate femeile din primul grup. La toate femeile din grupul 2d genotipul MTHFR 1298AA a fost determinat.

Datele de coagulare la femeile din ambele grupuri studiate prezentate în Tabelul 2.

Publicat online:

Tabelul 2. Parametrii TEG și cascada de coagulare la femeile din grupurile studiate.

Testele de coagulare relevă starea de hipercoagulare la femeile din primul grup cu alele 1298C MTHFR genă în comparație cu femeile din grupul 2. Creșterea conținutului de fibrinogen (6,09 ± 0,11 g/l față de 5,77 ± 0,19 g/l) a fost prezentată la femeile din grupul 1. La aceste femei s-a determinat activarea cascadei de coagulare internă ( PTT a fost de 28,4 ± 0,4 s față de 31,0 ± 0,5 s în grupul 2). A existat, de asemenea, o inhibare semnificativă a activității fibrinolitice serice la femeile din grupul 1 (Tabelul 2).

Caracteristicile structurale și cinetice ale formării cheagurilor conform rezultatelor TEG au fost crescute la femeile din primul grup. Atât indicii R, cât și K au scăzut semnificativ la femeile din acest grup (Tabelul 2) ceea ce înseamnă creșterea vitezei de formare a cheagurilor la femeile cu alelă polimorfă 1298С MTHFR genă. De asemenea, atât unghiul α cât și amplitudinea maximă a cheagului au fost crescute la femeile din grupul 1. Aceste modificări ale parametrilor TEG au dus la o creștere semnificativă a indicelui de coagulare (3,4 ± 0,2 la femeile din primul grup față de 2,5 ± 0,2 la femeile din grupul 2d).

Discuţie

Producția și activarea factorilor protrombotici și fibrinolitici sunt echilibrate foarte bine în timpul sarcinii normale. S-a arătat că nivelurile plasmatice ale factorilor de coagulare, precum fibrinogenul și alți factori, cresc în timp ce fibrinoliza este inhibată datorită structurii compacte și rezistenței înnăscute a moleculei de fibrină la liza în diabetul zaharat [10]. GDM poate fi destul de similar cu o formă mai ușoară a sindromului metabolic. Deoarece masa corporală este mai mare la femeile cu GDM în comparație cu femeile sănătoase, rezistența la insulină poate fi declanșată la subiecții gravide, ducând la diabet gestațional.

Una dintre cele mai importante măsuri în evaluarea cascadei de coagulare este PTT. Există studii care arată că PTT scăzut susține starea de hipercoagulabilitate atât în ​​timpul sarcinii normale, cât și în GDM [11]. S-a stabilit că numărul de PTT și trombocite a fost semnificativ mai mic în al treilea trimestru al sarcinii normale [12]. Cu toate acestea, un alt grup a raportat că ambii parametri nu au fost modificați la femeile cu GDM [13]. În constatările noastre, PTT a fost mai mic în primul grup decât în ​​2d. Credem că aceste date acceptă starea hipercoagulabilă în GDM. Mai mult, nu a existat o creștere compensatorie a activității fibrinolitice la femeile din primul grup cu alele 1298С MTHFR genă.

Am constatat că greutatea medie la naștere a sugarilor născuți de mame GDM cu gena MTHFR polimorfă a fost mai mică decât la nou-născuții femeilor din grupul 2d. S-ar putea sugera un anumit grad de disfuncție placentară ca urmare a tulburărilor de coagulare la femeile din primul grup.

În acest studiu, am examinat asocierea dintre MTHFR polimorfismul genelor la femeile GDM și ischemia cerebrală a nou-născuților lor. Rezultatele noastre au indicat o frecvență crescută a CI și 1298С MTHFR genotip alelelor la femeile cu GDM. Maternă MTHFR mutația genică are un impact semnificativ asupra descendenților. S-a raportat că mutația homozigoză în MTHFR gena a fost asociată cu o frecvență crescută a întârzierii creșterii fetale și a leziunilor cerebrale neonatale [14].

Există o ipoteză că leziunile cerebrale neonatale sunt secundare interacțiunii stimulilor epigenetici și genomului [15]. Programarea epigenetică este activă în timpul sarcinii, iar procesele epigenetice răspund la stimulii de mediu, de la restricții nutriționale materne la hipoxie și hiperglicemie [16].

Prin urmare, predispoziția genetică (alela polimorfă 1298C MTHFR poate reprezenta un factor de risc potențial pentru ischemie cerebrală la nou-născuții născuți de mame cu diabet zaharat gestațional.

Tabelul 1. Caracteristicile clinice și demografice ale populației studiate.

* Semnificație statistică p Tabelul 2. Parametrii TEG și cascada de coagulare la femeile din grupurile studiate.