Molecular
Medicament
Rapoarte

• Ultimii doi ani
• Total

• Anul trecut 0
• Total

• Luna trecuta
• Anul trecut
• Total

• Xuewei Wang
• Fugang Fan
• Qin Cao

Acest articol este menționat în:

Abstract

Introducere

Bolile inflamatorii intestinale (IBD) sunt tulburări inflamatorii gastrointestinale (GI) idiopatice, care constau din boala Crohn (CD) și colita ulcerativă (UC). În prezent se acceptă faptul că modificările microbiotei intestinale, susceptibilitatea genetică, disfuncția reglării imunologice și defectele barierei intestinale sunt implicate în etiopatogeneza IBD (1,2). În general, UC este limitat doar la colon, în timp ce CD poate afecta întregul tract GI. Durerea abdominală, pierderea în greutate și diareea sângeroasă sunt cele mai frecvente simptome ale IBD (3). IBD sunt boli pe tot parcursul vieții, pentru care pacienții necesită adesea tratament farmacologic pe tot parcursul vieții și pot necesita intervenții chirurgicale.

Medicamentele convenționale utilizate pentru tratamentul IBD includ corticosteroizi, medicamente imunosupresoare, antibiotice și agenți biologici, inclusiv factorul de necroză antitumorală-α. Cu toate acestea, utilizarea acestor medicamente este eficientă numai pentru ameliorarea simptomatică temporară și este asociată cu complicații grave și efecte secundare toxice (3-5). Astfel, utilizarea medicamentelor complementare și alternative (CAM), inclusiv acupunctura, homeopatia și medicamentele pe bază de plante, pentru tratamentul pacienților cu IBD este în creștere la nivel mondial, iar procentul pacienților cu IBD care utilizează CAM în America de Nord și Europa a fost estimat la până la 70% (6-9). Medicina tradițională chineză (TCM) este una dintre cele mai dezvoltate ramuri ale CAM în lume (10). Mai multe rapoarte științifice și studii clinice au caracterizat eficacitatea preparatelor pe bază de plante în IBD, prezentând rezultate promițătoare și oferind o perspectivă asupra mecanismelor, care depășesc activitatea lor terapeutică (11-14).

Decoctul modificat de Pulsatilla, conținând șapte plante utilizate în mod obișnuit (Radix Pulsatillae, Cortex Phellodendri, Rhizoma Coptidis, Cortex Fraxini, Sanchi, Radix Paeoniae Rubra și Radix Glycyrrhizae), este formulat utilizând formularea TCM a decoctului de Pulsatilla și adăugând alte trei plante pe bază de plante, Radix Paeoniae Rubra și Radix Glycyrrhizae). Decoctul de Pulsatilla are o varietate de efecte farmacologice, iar ingredientele active din aceste plante pe bază de plante au prezentat efecte hepatice protectoare, antiinflamatoare, antibacteriene, antitumorale și anti-oxidante (15-19). Decoctul modificat de Pulsatilla a fost folosit anterior pentru a trata UC în practica clinică din China, prezentând efecte promițătoare împotriva inflamației și a diareei (20). Deși decoctul modificat de Pulsatilla este o formulă TCM eficientă pentru efectele farmacologice indicate mai sus, rămâne de elucidat posibilul mecanism în tratamentul UC. Astfel, prezentul studiu și-a propus să investigheze eficacitatea terapeutică a decoctului modificat de Pulsatilla împotriva IBD și să elucideze mecanismele moleculare de bază.

Materiale și metode

Inducerea colitei

Pregătirea și administrarea intragastrică a extractelor solubile în apă de decoct modificat de Pulsatilla

Decoctul modificat de Pulsatilla a constat din Radix Pulsatillae (30 g), Cortex Phellodendri (12 g), Rhizoma Coptidis (5 g), Cortex Fraxini (9 g), Sanchi (3 g), Radix Paeoniae Rubra (12 g) și Radix Glycyrrhizae (6 g). Pentru a obține extracte solubile în apă, la aceste plante din plante s-au adăugat volume de apă de 10 ori mai mari, iar amestecurile rezultate au fost apoi încălzite la 90 ° C timp de 1 oră. Această procedură a fost repetată de trei ori, după care toate lichidele de extracție au fost colectate, uscate și depozitate la 4 ° C.

Extractele decoctului (10 mg/g greutate corporală) sau SASP (20 mg/g greutate corporală) au fost administrate intragastric șoarecilor de colită indusă de oxazolonă o dată pe zi timp de 7 zile. SASP a acționat ca un control pozitiv. Ca martor negativ, a fost administrat un volum egal de apă la șoarecii de colită indusă de oxazolonă. Grupul PBS a fost administrat șoareci de colită indusă de oxazolonă

Evaluarea colitei clinice la șoareci

Cei șaptezeci de colite au fost evaluați utilizând un sistem de notare a indicelui activității bolii (DAI) și pierderea în greutate corporală. Scorul DAI a fost calculat ca suma scorului scaunului sângeros (0, scaun normal colorat; 1, scaun maro; 2. scaun roșiatic; 3, scaun sângeros) și scorul scaunului diareic (0, scaun normal; 1, scaun ușor moale; 2, scaun foarte moale; 3, scaun apos). Modificarea greutății corporale a fiecărui șoarece a fost calculată folosind următoarea formulă: Pierderea în greutate (%) = [(greutatea în ziua 1) - (greutatea în fiecare zi)]/greutatea în ziua 1.

Examenul histologic al colonului

După 7 zile, șoarecii au fost sacrificați folosind 0,1 ml de pentobarbital de sodiu 2% și o porțiune de 10 cm din colonul distal a fost îndepărtată de la 4 șoareci din fiecare grupă, spălată cu soluție salină și fixată în 10% formalină tamponată natural. Țesuturile fixe au fost apoi încorporate în parafină (Sigma-Aldrich), tăiate în secțiuni de țesut (5 µm grosime) și colorate cu hematoxilină și eozină (Leica Microsystems, Ltd., Milton Keynes, Marea Britanie) și examinate cu un microscop (Leica Microsystems, Ltd.) și evaluat calitativ cu software-ul Leica QWin 3.1 utilizând următorii parametri: Infiltrarea transmurală a celulelor mononucleare, îngroșarea peretelui colonului, hiperplazia mucoasei, eroziuni, epuizarea celulelor calice și distorsiunea arhitecturală a criptelor.

Analiza reacției în lanț a transcripției cantitative a polimerazei (RT-qPCR)

ELISA

Nivelurile de proteine ​​ale IL-5 și IL-13 în supernatanții lizatului țesutului colonului au fost măsurate folosind kitul ELISA Quantikine Mouse IL-13 și kitul ELISA Quantikine Mouse IL-5 (R&D Systems, Minneapolis, MN, SUA), conform protocolul producătorului. Toate probele au fost analizate în duplicat și normalizate la conținutul total de proteine ​​ale probei, exprimat ca proteină pg/mg.

Analiza Western blot

Analiza datelor

figura 1

Figura 2

Figura 3

Figura 4

Tratamentul de decoct Pulsatilla modificat inhibă activarea căii de semnalizare a factorului nuclear-κB. Expresia IκBα în țesuturile colonului șoarecilor de colită indusă de oxazolonă tratați cu sau fără decoct modificat de Pulsatilla au fost detectate utilizând analiza Western blot. Datele sunt exprimate ca medie ± deviație standard. ** P 1

Baumgart DC și Carding SR: Boală inflamatorie intestinală: Cauză și imunobiologie. Lancet. 369: 1627–1640. 2007. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

Xavier RJ și Podolsky DK: Descoperirea patogeniei bolii inflamatorii intestinale. Natură. 448: 427–434. 2007. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

Baumgart DC și Sandborn WJ: Boala inflamatorie a intestinului: aspecte clinice și terapii stabilite și în evoluție. Lancet. 369: 1641–1657. 2007. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

Nielsen OH: Noi strategii pentru tratamentul bolii inflamatorii intestinale. Front Med (Lausanne). 1: 32014.

Danese S: ​​Terapii noi pentru bolile inflamatorii intestinale: De la bancă până la pat. Bun. 61: 918-932. 2012. Vezi articolul: Google Scholar

Hilsden RJ, Verhoef MJ, Rasmussen H, Porcino A și DeBruyn JC: Utilizarea medicamentelor complementare și alternative de către pacienții cu boală inflamatorie intestinală. Inflamm intestin Dis. 17: 655-662. 2011. Vizualizați articolul: Google Scholar

Langmead L și Rampton DS: articol de recenzie: Terapii complementare și alternative pentru boala inflamatorie intestinală. Aliment Pharmacol Ther. 23: 341–349. 2006. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

Rahimi R, Mozaffari S și Abdollahi M: Despre utilizarea medicamentelor pe bază de plante în gestionarea bolilor inflamatorii intestinale: o revizuire sistematică a studiilor la animale și la oameni. Dig Dis Sci. 54: 471–480. 2009. Vizualizați articolul: Google Scholar

Jackson LN, Zhou Y, Qiu S, Wang Q și Evers BM: produse de medicină alternativă ca strategie de tratament nouă pentru bolile inflamatorii intestinale. Sunt J Chin Med. 36: 953–965. 2008. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

Sałaga M, Zatorski H, Sobczak M, Chen C și Fichna J: medicamente din plante chinezești în tratamentul IBD și al cancerului colorectal: o recenzie. Opțiuni Curr Treat Oncol. 15: 405–420. 2014. Vezi articolul: Google Scholar

Li R, Alex P, Ye M, Zhang T, Liu L și Li X: un medicament pe bază de plante vechi cu o aplicație terapeutică potențial nouă în bolile inflamatorii intestinale. Int J Clin Exp Med. 4: 309-319. 2011.PubMed/NCBI

Cao YB, Zhang JD, Diao YY, Yan L, Wang DJ, Jia XM, Gao PH, Cheng MH, Xu Z, Wang Y și Jiang YY: Efectele granulelor Changtai, un medicament tradițional chinez compus, asupra acidului trinitrobenzenic sulfonic cronic- colită indusă la șobolani. World J Gastroenterol. 11: 3539–3543. 2005. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

Sandborn WJ, Targan SR, Byers VS, Rutty DA, Mu H, Zhang X și Tang T: extract de Andrographis paniculata (HMPL-004) pentru colita ulcerativă activă. Sunt J Gastroenterol. 108: 90–98. 2013. Vezi articolul: Google Scholar:

Zhang F, Li Y, Xu F, Chu Y și Zhao W: Comparația Xilei-san, un medicament din plante chinezesc și dexametazona în proctita ulcerativă ușoară/moderată: un studiu clinic randomizat dublu orb J Altern Complement Med. 19: 838–842. 2013. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

Hu Y, Chen X, Duan H, Hu Y și Mu X: Decoctul Pulsatilla și ingredientele sale active inhibă secreția de NO, ET-1, TNF-alfa și IL-1 alfa în celulele endoteliale microvasculare intestinale de șobolan induse de LPS. Functia Cell Biochem. 27: 284–288. 2009. Vizualizați articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

Cheng L, Zhang M, Zhang P, Song Z, Ma Z și Qu H: Complexare de argint și spectrometrie de masă tandem pentru diferențierea saponinelor triterpenoide de la rădăcinile Pulsatilla Chinensis (Bunge) Regel. Spectrul de masă comun comun rapid. 22: 3783–3790. 2008. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

Tan B, Ma Y, Shi R și Wang T: Cuantificarea simultană a trei alcaloizi ai Coptidis Rhizoma în urina de șobolan prin cromatografie lichidă de înaltă performanță: Aplicare la studiul farmacocinetic. Eliminarea medicamentelor Biopharm. 28: 511-516. 2007. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

Chan CO, Chu CC, Mok DK și Chau FT: Analiza conținutului de berberină și alcaloizi totali în cortexul felodendri prin spectroscopie în infraroșu apropiat (NIRS) comparativ cu cromatografia lichidă de înaltă performanță cuplată cu detectare spectrometrică ultra-vizibilă. Anal Chim Acta. 592: 121–131. 2007. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

Shi Z, Zhu X și Zhang H: extracție mediată de micelă și preconcentrare a punctului de nor pentru analiza aesculinei și aesculetinului în Cortex fraxini prin HPLC. J Pharm Biomed Anal. 44: 867–873. 2007. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

Muluye RA, Bian Y și Alemu PN: Efecte antiinflamatorii și antimicrobiene ale ierburilor chineze de curățare a căldurii: o revizuire actuală. J Tradit Complement Med. 4: 93–98. 2014. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

Heller F, Fuss IJ, Nieuwenhuis EE, Blumberg RS și Strober W: colita oxazolonică, un model de colită Th2 asemănătoare colitei ulcerative, este mediată de celule NK-T producătoare de IL-13. Imunitate. 17: 629–638. 2002. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

Comitetul Consiliului Național de Cercetare (SUA) pentru actualizarea Ghidului pentru îngrijirea și utilizarea animalelor de laborator: Ghid pentru îngrijirea și utilizarea animalelor de laborator. Ediția a VIII-a. National Academies Press; Washington, D.C., SUA: 2011

Schmittgen TD și Livak KJ: Analiza datelor PCR în timp real prin metoda comparativă C (T). Nat Protoc. 3: 1101–1108. 2008. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

León AJ, Gómez E, Garrote JA, Bernardo D, Barrera A, Marcos JL, Férnandez-Salazar L, Velayos B, Blanco-Quirós A și Arranz E: Niveluri ridicate de citokine proinflamatorii, dar nu markeri de leziuni tisulare, în intestinele neafectate zone de la pacienții cu IBD. Mediatori Inflamm. 2009: 302009. Vizualizați articolul: Google Scholar

Imbert V, Rupec RA, Livolsi A, Pahl HL, Traenckner EB, Mueller-Dieckmann C, Farahifar D, Rossi B, Auberger P, Baeuerle PA și Peyron JF: Fosforilarea cu tirozină a I kappa B-alfa activează NF-kappa B fără proteolitic degradarea I kappa B-alfa. Celulă. 86: 787–798. 1996. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

Kojima R, Kuroda S, Nakamaru K și Hatakeyama S: Colită indusă de oxazolonă la șoareci BALB/C: O nouă metodă de evaluare a eficacității agenților terapeutici pentru colita ulcerativă. J Pharmacol Sci. 96: 307-313. 2004. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

Svartz N: Salazopyrin un nou preparat de sulfanilamidă: A. Rezultate terapeutice în poliartrita reumatică. B. Rezultate terapeutice în colita ulcerativă. C. Manifestări toxice în tratamentul cu preparat de sulfanilamidă. Acta Med Scand. 11: 557–590. 1942.

Kornbluth A și Sachar DB; Comitetul pentru parametrii de practică al Colegiului American de Gastroenterologie: ghiduri de practică pentru colita ulcerativă la adulți: Colegiul american de gastroenterologie, comitetul pentru parametrii de practică. Sunt J Gastroenterol. 105: 501-523; test 524. 2010. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

Khor B, Gardet A și Xavier RJ: Genetica și patogeneza bolii inflamatorii intestinale. Natură. 474: 307-317. 2011. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

Strober W și James SP: baza imunologică a bolii inflamatorii intestinale. J Clin Immunol. 6: 415–432. 1986. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

Fuss IJ, Neurath M, Boirivant M, Klein JS, de la Motte C, Strong SA, Fiocchi C și Strober W: Disparate CD4 + lamina propria (LP) profile de secreție de limfokine în bolile inflamatorii intestinale Celulele LP ale bolii Crohn manifestă secreție crescută de IFN-gamma, în timp ce celulele LP colite ulcerative manifestă secreție crescută de IL-5. J Immunol. 157: 1261–1270. 1996. PubMed/NCBI

Heller F, Florian P, Bojarski C, Richter J, Christ M, Hillenbrand B, Mankertz J, Gitter AH, Burgel N, Fromm M, și colab., apoptoza și restituirea celulelor. Gastroenterologie. 129: 550–564. 2005. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

Hering NA, Fromm M și Schulzke JD: Determinanți ai funcției barierei colonice în boala inflamatorie intestinală și terapeutice potențiale. J Fiziol. 590: 1035-1044. 2012. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

Suzuki T: Reglarea permeabilității epiteliale intestinale prin joncțiuni strânse. Cell Mol Life Sci. 70: 631-659. 2013. Vezi articolul: Google Scholar

Turner JR: Funcția de barieră a mucoasei intestinale în sănătate și boală. Nat Rev Immunol. 9: 799–809. 2009. Vizualizați articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

Weber CR, Raleigh DR, Su L, Shen L, Sullivan EA, Wang Y și Turner JR: Activarea kinazei lanțului ușor al miozinei epiteliale induce expresia interleukinei mucoasei 13 pentru a modifica selectivitatea ionilor de joncțiune strânsă. J Biol Chem. 285: 12037–12046. 2010. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

Prasad S, Mingrino R, Kaukinen K, Hayes KL, Powell RM, MacDonald TT și Collins JE: Procesele inflamatorii au efecte diferențiale asupra claudinelor 2, 3 și 4 din celulele epiteliale colonice. Laboratorul Invest. 85: 1139–1162. 2005. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

Schreiber S, Nikolaus S și Hampe J: Activarea bolii inflamatorii intestinale a factorului nuclear kappa B. Bun. 42: 477–484. 1998. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

Neurath MF, Becker C și Barbulescu K: Rolul NF-kappaB în răspunsurile imune și inflamatorii din intestin. Bun. 43: 856–860. 1998. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

Ma TY, Iwamoto GK, Hoa NT, Akotia V, Pedram A, Boivin MA și Said HM: Creșterea indusă de TNF-alfa în permeabilitatea joncțiunii strânse epiteliale intestinale necesită activarea NF-kappa B. Am J Physiol Gastrointest hepatic Physiol. 286: G367 - G376. 2004. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI

Beutheu Youmba S, Belmonte L, Galas L, Boukhettala N, Bôle-Feysot C, Déchelotte P și Coëffier M: Metotrexatul modulează joncțiunile strânse prin căile NF-κB, MEK și JNK. J Pediatr Gastroenterol Nutr. 54: 463–470. 2012. Vezi articolul: Google Scholar

Articole similare

August 2016
Volumul 14 Numărul 2

Tipăriți ISSN: 1791-2997
ISSN online: 1791-3004

• Hipoxemia intermitentă ușoară la șoarecii neonatali determină deficit neurofuncțional permanent și alb
• EXPRESIA MLX SE MODIFICĂ ÎN FEMEI ȘASE LUNI DUPĂ CHIRURGIE BARIATRICĂ Oliveira Scripta Scientifica
• Membrana globulară a grăsimii din lapte reduce creșterea în greutate la șoareci - Consorțiul internațional de genomică a laptelui
• Algoritmul modificat al volumului de prostată îmbunătățește estimarea volumului transrectal în SUA la bărbații care prezintă pentru
• Markeri pentru prezicerea morții ca rezultat al șoarecilor utilizați în cercetarea bolilor infecțioase