Abstract

Introducere

Ateroscleroza este o boală multifactorială și progresivă bine cunoscută, contribuită prin oxidarea lipoproteinelor cu densitate mică (LDL), disfuncție endotelială și stres oxidativ (Rashidi și colab. 2017). Bolile cardiovasculare reprezintă> 30% din decesele din întreaga lume (Bader 2010). Ateroscleroza este esențială pentru bolile cardiovasculare, inclusiv angina instabilă, moartea subită cardiacă, accidentul vascular cerebral, infarctul miocardic și tromboza periferică (Xu și colab. 2018). Un studiu anterior a arătat că procesul complex de boală al aterosclerozei se datorează interacțiunii dintre inflamație și perturbări (van Diepen și colab. 2013). Un alt studiu a arătat că inflamația și dislipidemia sunt mecanismele principale implicate în fiziopatologia aterosclerozei (Singh și colab. 2002). Un studiu suplimentar a arătat că nivelurile crescute de colesterol total, trigliceride plasmatice (TG) și colesterol LDL sunt trăsături caracteristice ale hiperlipidemiei (Tonstad și Despres 2011). Obezitatea, dislipidemia și hipertensiunea arterială declanșează mai multe evenimente inflamatorii, care determină formarea celulelor spumante și recrutarea monocitelor la leziunile aterosclerotice (Libby și colab. 2002). Mai mult, interacțiunile dintre evenimentele inflamatorii și metabolismul lipidelor agravează dezvoltarea aterosclerozei (van Diepen și colab. 2013).

prezintă

Myricitrin este un flavonoid bine-cunoscut obținut din câteva plante, cum ar fi Eugenia uniflora, Pouteria gender și Manilkara zapota (Asano et al. 2007), iar studiile anterioare au arătat efectele anxiolitice și antinociceptive ale myricitrinului (Pereira și colab. 2011). Sun și colab. (2013) au raportat efectul protector al miricitrinei împotriva apoptozei celulelor endoteliale vasculare indusă de stresul oxidativ. Efectul inhibitor al miricitrinei împotriva aterosclerozei timpurii și a deteriorării endoteliale induse de stresul oxidativ la șoarecii ApoE -/-. Qin și colab. (2015) au arătat un efect protector al miricitrinei împotriva apoptozei celulelor endoteliale induse de LDL oxidat și a potențialei sale activități terapeutice împotriva bolilor cardiovasculare. Pe baza acestor rapoarte anterioare, prezentul studiu a investigat potențialul anti-hiperlipidemic și anti-aterosclerotic al miricitrinei la șobolanii hipercolesterolemici induși de dietă.

Materiale și metode

Șobolani și dietă

Șobolani albini masculi au fost obținuți de la casa de animale a Spitalului Afiliat al Universității Qingdao, Qingdao, China. Fiecare șobolan cântărea 190–210 g. Șobolanii au cântărit 190-210 g, iar șobolanii au fost ținuți în cuști standard din polipropilenă de șobolan (435 × 290 × 150 mm; șase șobolani pe cușcă) și au fost menținuți în condiții standard de 12 h lumină/12 h întuneric la o umiditate relativă de 60 ± 5 % și temperatura de 25 ± 0,5 ° C cu alimente și apă furnizate ad libitum. Toate experimentele pe animale au respectat liniile directoare ale Departamentului de Anestezie, Spitalul Afiliat al Universității Qingdao, Nr. 16 Jiangsu Road, districtul Shinan, Qingdao, China, care a aprobat toate protocoalele de îngrijire a animalelor și experimentale. Operația la animale a fost efectuată sub anestezie și s-au făcut toate eforturile pentru a reduce suferința. Toți șobolanii au fost menținuți în condiții adecvate, în conformitate cu standardele etice pentru bunăstarea animalelor. O dietă bogată în colesterol (HCD) a fost pregătită prin adăugarea a 96 g de alimente standard de laborator la 1 g de colesterol și 3 g de ulei de porumb (Huseini și colab. 2015).

Grupuri experimentale

Șobolanii au fost împărțiți în următoarele grupuri: fals (alimente standard), martor (1% HCD), 1 μM myricitrin (91255, Număr CAS 17912-87-7, Sigma-Aldrich, Shanghai) + 1% HCD, 10 μM myricitrin + 1% HCD, 100 μM myricitrin + 1% HCD și controlul pozitiv (10 mg/kg greutate corporală atorvastatină). Myricitrin a fost dizolvat în ser fiziologic și șobolanilor martor li s-a dat volum egal de ser fiziologic. Fiecare grup conținea șase șobolani. Doza a fost administrată șobolanilor prin gavaj oral timp de 45 de zile consecutive.

Markeri biochimici

Sângele a fost colectat la sfârșitul tratamentului prin puncție cardiacă folosind o seringă (5 ml) cu un ac de calibru 23. Animalele au fost apoi anesteziate folosind xilazină (10 mg/kg greutate corporală) și clorhidrat de ketamină (100 mg/kg greutate corporală) și eutanasiate prin decapitare. Nivelurile de colesterol din sânge, TG, LDL și lipoproteine ​​cu densitate mare (HDL) în ser au fost determinate folosind un kit de testare comercial (Huseini și colab. 2015).

Stresul antioxidant și oxidativ

Activitățile de catalază, superoxid dismutază și glutation peroxidază au fost determinate în conformitate cu Kaddour și colab. (2016). Glutationul redus (GSH), speciile reactive de oxigen (ROS) și nivelurile de peroxidare a lipidelor au fost, de asemenea, determinate așa cum s-a descris anterior (Arutyunyan și colab. 2016).

Analiza histopatologică

Șobolanii au fost anesteziați utilizând xilazină (10 mg/kg greutate corporală) și clorhidrat de ketamină (100 mg/kg greutate corporală) și au fost sacrificați prin decapitare. Aorta a fost apoi separată de diafragmă și împărțită în segmente distale, medii și proximale. Segmentele au fost deshidratate folosind o serie gradată de alcool/xilen și apoi încorporate în parafină. Blocurile de parafină au fost tăiate în secțiuni groase de 4 mm 2 și colorate cu hematoxilină și eozină. Secțiunile colorate au fost caracterizate în termeni de prezență a unui miez lipidic extracelular, dungi grase și celule de spumă. Gradele de ateroscleroză și leziuni vasculare au fost determinate cantitativ pe baza zonei de leziune folosind un analizor de imagine (Kumar și colab. 2005).

analize statistice

Datele sunt exprimate ca medie ± deviație standard (SD). Rezultatele au fost comparate utilizând o analiză unidirecțională a varianței urmată de testul post hoc al lui Tukey. Diferența dintre probele martor și cele tratate a fost semnificativă la P

Rezultate

Șobolanii hrăniți cu 1% HCD au prezentat o creștere substanțială a nivelurilor de LDL, HDL, colesterol și TG. Cu toate acestea, șobolanii suplimentați cu 1, 10 și 100 μM myricitrin au prezentat o reducere semnificativă a nivelurilor de colesterol de 14,9%, 32,3% și respectiv 62,3% (Tabelul 1, P Tabelul 1 Efectul myricitrinului asupra profilului lipidic în repaus și a procentului suprafeței peretelui aortic (mm 2) după 45 de zile de dietă cu colesterol ridicat (HCD) hrăniți șobolani tratați cu myricitrin la doze de 1, 10 și 100 μM

Șobolanii hrăniți cu 1% HCD au arătat o creștere substanțială a nivelurilor LDL. Cu toate acestea, șobolanii suplimentați cu 1, 10 și 100 μM myricitrin au arătat o reducere semnificativă a nivelurilor LDL de 4,3%, 31,9% și respectiv 77,7% (Tabelul 1, P 50% (Fig. 1 și 2, P FIG. 1