Imagine de microscopie electronică cu scanare (SEM) a nanoparticulelor de chitosan. Clusterele de nanoparticule nu sunt agregate, ci particule individuale care s-au reunit în timpul uscării.

Model de biodistribuire in loco a ICG liber și imobilizat cu CNP la 30 min după administrarea intravenoasă. Diagramele arată procentul de acumulare de fluorofor în organe măsurat ca eficiență totală a radiației ([p/s]/[µW/cm 2]). Procentajul este calculat din media randamentului total radiant (dată în tabel) pentru fiecare organ (n = 3).

Dinamica greutății corporale după administrarea intravenoasă de CNP (% din valoarea inițială). Testul Mann-Whitney a fost utilizat pentru a evalua semnificația diferențelor dintre grupuri. Datele prezentate sunt median ± interval.

Raportul de masă al organelor de șobolan la 14 zile după administrarea intravenoasă a suspensiei CNP. Median ± interval. Raportul dintre masa organelor și greutatea corporală este utilizat în toxicologie pentru a detecta organele țintă ale toxicului. Nu au existat efecte semnificative ale CNP asupra raportului ponderal mediu al organelor.

Dinamica parametrilor hemoglobinei și eritrocitelor la șobolani în diferite momente de timp (0, 1 și 14 zile) după injectarea intravenoasă de CNP (1-4 mg/kg). Datele reprezintă mediana ± intervalul. Aceste date completează rezultatele analizei nivelului de hemoglobină liberă în plasma sanguină a șobolanilor după administrarea CNP. Dacă CNP au cauzat hemoliză și tromboză intravasculară semnificativă, toți parametrii masei eritrocitelor (eritrocite, hematocrit și hemoglobină) pot fi reduse prin interacțiunile CNP - eritrocite, în timp ce MCV se află în intervalul normal în prima zi după administrarea intravenoasă de CNP. Rezultatele analizei hematologice nu au relevat modificări semnificative ale parametrilor sângelui roșu.

Dinamica parametrilor leucocitelor de șobolan. Median ± interval. Modificări ale numărului de celule albe din sânge au fost observate la 1 zi după injectare, care au fost cauzate de o intervenție chirurgicală minoră (venezecție). O creștere a nivelului de globule albe din sânge este un semn al unui răspuns imun sistemic la leziuni ale țesuturilor/organelor sau invaziei. În acest studiu, doza de nanoparticule de chitosan administrată intravenos nu a fost suficientă pentru a provoca o creștere semnificativă a nivelului de globule albe din sânge.

Parametrii biochimici ai sângelui de șobolan la 14 zile după administrarea intravenoasă a CNP. Median ± interval. CNP-urile s-au acumulat mai ales în ficat și într-o măsură mai mică în plămâni. Rinichii, splina și inima au acumulat aproximativ un procent din toate nanoparticulele. CNP ar putea afecta aceste organe și le poate afecta funcțiile. Parametrii biochimici legați de ficat, rinichi și inimă nu au evidențiat semne de rănire sau disfuncționalitate.

Modelul histologic al organelor de șobolan la 14 zile după o singură injecție a unei suspensii CNP-4 (4 mg/kg). Țesuturile au fost colorate cu hematoxilină/eozină.

Grosimea (μm) a septelor alveolare de șobolan la 14 zile după administrarea intravenoasă a suspensiei CNP. Testul Mann - Whitney. Median ± interval.

Plămânii și ficatul șobolanilor la 14 zile după administrarea CNP 4 mg/kg. Analiza imunohistochimiei cu anticorpi la CD68 +. Zonele cu granuloame CD68 + -macrofage.

Ficat de șobolan la 2 ore după administrarea suspensiei CNP (16 mg/kg). Tehnica de colorare a lui Grocott: (a) hepatocite din grupul martor (100 ×), (b) aceleași hepatocite la mărire 1000 ×; (c) grup CNP, lobul hepatic, zona venei centrale, hepatocite cu CNP internalizate (100 ×); (d) aceleași hepatocite la mărire 1000 ×.

Plămânii de șobolan la 2 ore după administrarea suspensiei CNP (16 mg/kg). Tehnica de colorare a lui Grocott a relevat: (a) alveolele plămânului șobolanului de control (400 ×); (b) artera pulmonară de șobolan de control (400 ×); (c) macrofage (săgeți) interstițiale care conțin CNP în septurile alveolare (400 ×); (d) artera pulmonară de șobolan și straturile musculare cu CNP colorate (400 ×).

Abstract

S-au studiat 100 nm și o sarcină slab pozitivă asupra coagulării sângelui, a activității metabolice a cardiomiocitelor cultivate, a toxicității generale, a biodistribuției și a modificărilor reactive ale organelor de șobolan ca răspuns la administrarea lor intravenoasă unică în doze de 1, 2 și 4 mg/kg. Nanoparticulele de chitosan (CNP) au un efect citotoxic mic și au un efect antiplachetar și anticoagulant slab. Administrarea intravenoasă a CNP nu provoacă modificări hemodinamice semnificative, iar la 30 de minute după administrarea CNP, acestea se acumulează în principal în ficat și plămâni, fără a provoca hemoliză și leucocitoză. Toxicitatea nanoparticulelor de chitosan s-a manifestat printr-o întârziere pe termen scurt dependentă de doză a creșterii în greutate cu recuperarea ulterioară, în timp ce în perioada de observație de 2 săptămâni nu s-au observat semne de durere și suferință la șobolani. Granuloamele găsite în plămâni și ficat indică biodegradarea lentă a nanoparticulelor de chitosan. În general, rezultatele obținute indică o toleranță bună la administrarea intravenoasă a unei suspensii de chitosan nemodificat în intervalul de doze studiat. Vizualizați textul integral

biologică

Imagine de microscopie electronică cu scanare (SEM) a nanoparticulelor de chitosan. Clusterele de nanoparticule nu sunt agregate, ci particule individuale care s-au reunit în timpul uscării.

Model de biodistribuire in loco a ICG liber și imobilizat cu CNP la 30 min după administrarea intravenoasă. Diagramele arată procentul de acumulare de fluorofor în organe măsurat ca eficiență totală a radiației ([p/s]/[µW/cm 2]). Procentul se calculează din media randamentului total radiant (dată în tabel) pentru fiecare organ (n = 3).

Dinamica greutății corporale după administrarea intravenoasă de CNP (% din valoarea inițială). Testul Mann-Whitney a fost utilizat pentru a evalua semnificația diferențelor dintre grupuri. Datele prezentate sunt median ± interval.

Raportul de masă al organelor de șobolan la 14 zile după administrarea intravenoasă a suspensiei CNP. Median ± interval. Raportul dintre masa organelor și greutatea corporală este utilizat în toxicologie pentru a detecta organele țintă ale toxicului. Nu au existat efecte semnificative ale CNP asupra raportului ponderal mediu al organelor.

Dinamica parametrilor hemoglobinei și eritrocitelor de șobolan la diferite momente de timp (0, 1 și 14 zile) după injectarea intravenoasă de CNP (1-4 mg/kg). Datele reprezintă mediana ± intervalul. Aceste date completează rezultatele analizei nivelului de hemoglobină liberă în plasma sanguină a șobolanilor după administrarea CNP. Dacă CNP-urile au cauzat hemoliză și tromboză intravasculară semnificativă, toți parametrii masei eritrocitelor (eritrocite, hematocrit și hemoglobină) pot fi reduse prin interacțiunile CNP-eritrocite, în timp ce MCV se află în intervalul normal în prima zi după administrarea intravenoasă de CNP. Rezultatele analizei hematologice nu au relevat modificări semnificative ale parametrilor sângelui roșu.

Dinamica parametrilor leucocitelor de șobolan. Median ± interval. Modificări ale numărului de celule albe din sânge au fost observate la 1 zi după injectare, care au fost cauzate de o intervenție chirurgicală minoră (venezecție). O creștere a nivelului de globule albe din sânge este un semn al unui răspuns imun sistemic la leziuni ale țesuturilor/organelor sau invaziei. În acest studiu, doza de nanoparticule de chitosan administrată intravenos nu a fost suficientă pentru a provoca o creștere semnificativă a nivelului de globule albe din sânge.

Parametrii biochimici ai sângelui de șobolan la 14 zile după administrarea intravenoasă a CNP. Median ± interval. CNP-urile s-au acumulat mai ales în ficat și într-o măsură mai mică în plămâni. Rinichii, splina și inima au acumulat aproximativ un procent din toate nanoparticulele. CNP ar putea afecta aceste organe și le poate afecta funcțiile. Parametrii biochimici legați de ficat, rinichi și inimă nu au evidențiat semne de rănire sau disfuncționalitate.

Modelul histologic al organelor de șobolan la 14 zile după o singură injecție a unei suspensii CNP-4 (4 mg/kg). Țesuturile au fost colorate cu hematoxilină/eozină.

Grosimea (μm) a septelor alveolare de șobolan la 14 zile după administrarea intravenoasă a suspensiei CNP. Testul Mann - Whitney. Median ± interval.

Plămânii și ficatul șobolanilor la 14 zile după administrarea CNP 4 mg/kg. Analiza imunohistochimiei cu anticorpi la CD68 +. Zonele cu granuloame CD68 + -macrofage.

Ficat de șobolan la 2 ore după administrarea suspensiei CNP (16 mg/kg). Tehnica de colorare a lui Grocott: (a) hepatocite din grupul martor (100 ×), (b) aceleași hepatocite la mărire 1000 ×; (c) grup CNP, lobul hepatic, zona venei centrale, hepatocite cu CNP internalizate (100 ×); (d) aceleași hepatocite la mărire 1000 ×.

Plămânii de șobolan la 2 ore după administrarea suspensiei CNP (16 mg/kg). Tehnica de colorare a lui Grocott a relevat: (a) alveolele plămânului șobolanului control (400 ×); (b) artera pulmonară de șobolan de control (400 ×); (c) macrofage (săgeți) interstițiale care conțin CNP în septurile alveolare (400 ×); (d) arterele pulmonare de șobolan și straturile musculare cu CNP colorate (400 ×).