Rekha Rajendran

1 Departamentul de Farmacognozie și Fitochimie, Universitatea SRM, Colegiul de Farmacie SRM, Tamil Nadu, India

Ekambaram Krishnakumar

2 Departamentul de biotehnologie farmaceutică, Mohamed Sathak A. J. College of Pharmacy, Tamil Nadu, India

Abstract

Mimosa pudica Lin., Cunoscută sub numele de chue Mue, este o plantă tufoasă și prostată, cu stipule spinoase și capete de flori roz și globoase și crește ca buruiană în aproape toate părțile țării. Este utilizat în mod tradițional pentru diferitele sale proprietăți și, prin urmare, în prezentul studiu, extractul de cloroform din frunzele de Mimosa pudica a fost examinat pentru activitatea sa hipolipidemică. Activitatea hipolipidemică este verificată prin inducerea hiperlipidemiei cu ajutorul dietei aterogene la șobolani albini wistar și s-au determinat nivelurile serice ale diferiților parametri biochimici precum colesterolul total, trigliceridele, LDL, VLDL și colesterolul HDL. Indicele aterogen arată măsura potențialului atero-genic al medicamentelor. Extractul de cloroform a arătat semnificativ (p Cuvinte cheie: Dieta aterogenă, atorvastatină, markeri biologici cloroform, cromatografie în strat subțire

Introducere

Mimosa pudica (Mimosaceae), cunoscută sub numele de chue Mue, este o plantă tufoasă și prostată, cu frunze compuse sensibile la atingere. Are stipule spinoase și capete de flori roz și globuloase și crește ca buruieni în aproape toate părțile țării (1). S-a raportat că frunzele și tulpina plantei conțin o mimosină alcaloidă; frunzele conțin, de asemenea, mucilagiu, iar rădăcina conține taninuri (1). Mimosa pudica este utilizată pentru proprietățile sale anti-hiperglicemiante (2), anti-diareice (3), anti-convulsive (4), citotoxice (5) și hepatoprotectoare (6).

Planta conține și frunze de turgorin.Frunzele și rădăcinile sunt utilizate în tratamentul grămezilor și fistulelor. Pasta de frunze se aplică hidrocelului. Bumbacul impregnat cu suc de frunze este folosit pentru pansamentul sinusurilor. Planta este, de asemenea, utilizată în tratamentul gingiei inflamate și este utilizată ca purificator de sânge (1). În sistemul de medicină ayurvedică și Unani, această plantă a fost utilizată în boli care apar din sânge și bilă corupte, tulburări cardiace, febră bilioasă, grămezi, icter, lepră, ulcere și varicelă mică.

Dislipidemia contribuie la ateroscleroză, o boală în care depozitele de grăsime numite „placă” se acumulează în artere în timp. Dacă placa îngustează arterele, există o probabilitate mare de a suferi de boli de inimă, infarct, boli ale arterelor periferice (flux redus de sânge la nivelul membrelor, de obicei la picioare) și accident vascular cerebral. Persoanele cu diabet sunt mai susceptibile de a dezvolta ateroscleroză, boli de inimă, circulație slabă și accident vascular cerebral decât cele care nu au diabet.

Multe persoane cu diabet au condiții numite „factori de risc” care contribuie la ateroscleroză și la complicațiile acesteia. Acestea includ hipertensiunea arterială, excesul de greutate și nivelurile ridicate de glucoză din sânge. Dislipidemia crește și mai mult riscul de ateroscleroză la persoanele cu diabet. Dislipidemia afectează persoanele cu diabet de tip 2 mai des decât cele cu diabet de tip 1. Cea mai frecventă dislipidemie în diabet este combinația de trigliceride ridicate și niveluri scăzute de HDL. Persoanele cu diabet pot avea, de asemenea, colesterol LDL crescut.

Printre medicamentele disponibile pentru tratarea dislipidemiei, statinele sunt adesea prima alegere pentru scăderea nivelului colesterolului total și LDL. Alte medicamente care scad colesterolul includ blocanți ai absorbției colesterolului, sechestranți ai acidului biliar și acid nicotinic. Acestea pot fi utilizate în combinație dacă un singur medicament nu este eficient în atingerea nivelurilor țintă. Fibratele și niacina cu eliberare prelungită pot fi utilizate pentru a reduce trigliceridele sau pentru a crește nivelul colesterolului HDL (7).

Hiperglicemia și dislipidemia sunt factori de risc semnificativi și independenți pentru complicațiile vasculare și sugerează să provoace modificări patologice cardiovasculare în stările diabetice prin următoarele mecanisme moleculare: formarea și acumularea de produse avansate de glicație, stres oxidativ crescut, activarea căii protein kinazei C, activitate crescută a căii hexozaminice, a inflamației vasculare și a afectării acțiunii insulinei în țesuturile vasculare (8).

Deoarece speciile de plante Mimosa pudica au fost revendicate în mod tradițional pentru tratamentul aterosclerozei; prin urmare, în studiul de față, s-a încercat examinarea extractului de plante care este extractul de cloroform din frunzele de Mimosa pudica, pentru ca activitatea hipolipidemică să-și demonstreze afirmația în practica folclorică.

Materiale și metode

Material vegetal

Frunzele de Mimosa pudica au fost procurate de la Thailavaram (lângă Universitatea SRM) în luna februarie 2009. Planta a fost identificată de Dr. D. Narashiman, Centrul de Cercetări Floristice, Departamentul de Biologie a Plantelor Botanice și Biotehnologia Plantelor, Colegiul Creștin Madras, Tambaram, Chennai, Tamilnadu, India. Specimenul de voucher (023/02/09) a fost depus la Departamentul de Farmacognozie și Fito-chimie M. S. A. J College of Pharmacy, India, pentru referință viitoare. S-a avut grijă să colecteze frunzele sănătoase și tinere de Mimosa pudica.

Pregătirea extractului

Frunzele pulverizate grosier (300 g) de Mimosa pudica au fost extrase până la epuizare într-un aparat de soxhlet (9) la 50 o C cu 500 ml de cloroform. Extractul a fost filtrat printr-un dop de bumbac, urmat de hârtie de filtru Whatman (nr. 1) și apoi concentrat utilizând un evaporator rotativ la o temperatură scăzută (40-60 o C) și presiune redusă pentru a furniza cloroform extractiv de 8,20 g.

Analiza fitochimică preliminară

Extractul de cloroform din frunzele de Mimosa pudica a fost apoi supus analizei fitochimice preliminare (10) pentru a evalua prezența diferiților fitoconstituenți; a dezvăluit prezența flavonoidelor, alcaloizilor și glicozidelor. Studiile preliminare ale cromatografiei în strat subțire au confirmat, de asemenea, acești constituenți (11).

Analiza HPTLC

Cincisprezece ofl de extract de cloroform din Mimosa pudica Lin., Au fost reperate pe placă TLC pre-acoperită cu silicagel de dimensiune (10 x 6 cm) (E. Merck) după activare la 105 ° C. Apoi placa pătată a fost dezvoltată într-o cameră pre-saturată care conține sistemul de solvent al toluenului: acetat de etil (3: 1), ca condiții de fază mobilă pentru separare. Placa dezvoltată a fost uscată la aer și scanată sub UV 254 nm folosind densitometrul Camag și s-a înregistrat cromatograma. Apoi placa a fost pulverizată cu reactiv de pulverizare 1% acid sulfuric vanilină și încălzită la 105 ° C în cuptor cu aer cald timp de 5 până la 10 minute pentru a dezvolta culoarea petelor. După dezvoltarea culorii, placa a fost scanată din nou în interval vizibil la 550 nm și cromatograma a fost înregistrată.

Animale

Șobolani albini Wistar cu o greutate de 175-225 g de ambele sexe menținute în condiții standard de creștere (temp 23 ± 2 o C, umiditate relativă 55 ± 10% și 12 ore ciclu întunecat deschis) au fost utilizate pentru screening. Animalele au fost hrănite cu alimente standard de laborator și ad libitum în timpul perioadei de studiu. Experimentele au fost efectuate după ce protocoalele experimentale au fost aprobate de comitetul instituțional de etică a animalelor, India 2009.

Studii de toxicitate

Studiul de toxicitate acută a fost efectuat pentru extractul de cloroform în conformitate cu metoda clasică de toxicitate acută conform orientărilor OECD (12). Femelele de șobolan albino au fost utilizate pentru studiul toxicității acute. Animalele au fost ținute la post peste noapte, oferind doar apă, după care extractul a fost administrat oral la doza de 300 mg/kg și observat timp de 14 zile. Dacă a fost observată mortalitatea la două animale din trei animale, atunci doza administrată a fost atribuită ca doză toxică. Dacă mortalitatea a fost observată la un animal, atunci aceeași doză a fost repetată pentru a confirma doza toxică. Dacă nu a fost observată mortalitatea, procedura a fost repetată pentru alte doze mai mari, cum ar fi 50, 200 și 2000 mg/kg greutate corporală. Animalele au fost observate pentru simptome toxice timp de 72 de ore.

Activitate hipolipidemică (13)

Animalele au fost împărțite în patru grupuri cu șase animale în fiecare grup. Pentru a face hiperlipidemia șobolanului, li s-a dat o dietă aterogenă care conține bază de făină de porumb, lapte praf, unt, sare, ulei de nuci măcinate, zaharoză și amestec de vitamine. În plus, 400 mg pulbere de colesterol/kg greutate corporală au fost dizolvate în ulei de cocos și administrate oral timp de 45 de zile.

Grupa I a fost considerată ca un martor care a primit 0,5% sodiu carboxi metil celuloză; Grupul II a fost considerat un grup aterogen și a primit dieta aterogenă; Grupul III a fost considerat grup de testare și a primit extractul de test care este extract de cloroform de Mimosa pudica la doza de 200 mg/kg greutate corporală pe cale orală împreună cu dieta aterogenă, iar grupul IV a fost considerat grup standard care a primit medicamentul standard Atorvastatin (doza de 1,2 mg/kg greutate corporală pe cale orală) împreună cu dieta aterogenă.

La sfârșitul celei de-a 45-a zile, serul de sânge a fost retras din plexul retro orbital după post peste noapte pentru studiul parametrilor biochimici. Serul a fost estimat pentru colesterolul total, trigliceridele, LDL, VLDL și HDL. Indicele aterogen (AI), care este o măsură a potențialului aterogen al unui agent, a fost calculat folosind următoarea formulă și rezultatele au fost tabelate.

Studii histopatologice

La sfârșitul perioadei de tratament, animalele din toate cele patru grupuri au fost sacrificate și aorta, ficatul, rinichii au fost disecate, spălate, diapozitive cu secțiune de 5 m grosime au fost preparate și colorate cu hemotoxilină-eozină și examinate prin microscopie cu lumină.

analize statistice

Rezultatele au fost prezentate ca medie ± SD. Semnificația diferenței dintre grupuri a fost evaluată utilizând analiza varianței unidirecțională (ANOVA) urmată de testul Dunnet. P Tabelul 1, placa TLC pentru extractul de cloroform este prezentată în Figura 1. Amprenta HPTLC pentru extract de cloroform a arătat 6 vârfuri la lungimea de undă 260 nm și la 550 nm, extractul de cloroform a arătat 7 vârfuri. Înălțimea totală și aria vârfurilor sunt prezentate în Tabelul 1 .

extractului

Plăci TLC pentru extract de cloroform de Mimosa pudica

tabelul 1

Date de amprentă HPTLC pentru extract de cloroform de Mimosa pudica

Extract Lungime de undă (nm) Nr. de vârfuri Înălțime totală Suprafață totală
Cloroform 2606782,832750.1
55071367085680.4

Studii de toxicitate acută

Extractul de cloroform de Mimosa pudica nu a produs simptome toxice sau mortalitate până la nivelul dozei de 2000 mg/kg greutate corporală la șobolani și, prin urmare, extractul a fost considerat sigur și netoxic pentru screening farmacologic ulterior.

Activitate hipolipidemică

O creștere semnificativă a nivelului colesterolului seric, a trigliceridelor, LDL și VLDL s-a găsit la animalele care au primit o dietă aterogenă, iar nivelurile HDL au scăzut. Administrările de extract de cloroform în doza de 400 mg/kg arată o reducere semnificativă a nivelului colesterolului seric, trigliceridelor, LDL, VLDL și creșterea nivelului HDL, care a fost similar cu Atorvastatina standard și sunt aproape aproape de nivelurile de control normal.

O reducere procentuală semnificativă a colesterolului seric, trigliceridelor, LDL, VLDL și creșterea procentuală a HDL în extractul testat a fost, de asemenea, comparabilă cu medicamentul standard. Un efect hipolipidemic puternic al extractului de cloroform a fost evident prin reducerea semnificativă a nivelului colesterolului seric, LDL, VLDL și trigliceridelor la animalele tratate cu colesterol și, de asemenea, creșterea marcată a nivelului HDL (Tabelul 2).

masa 2

Efectul Mimosa pudica asupra parametrilor biochimici

Grupuri de tratament Colesterol total (mg/dl) Trigliceride (mg/dl) HDL (mg/dl) LDL (mg/dl) VLDL (mg/dl)
Controlul I 101,4 ± 0,16121,2 ± 0,8236,3 ± 0,0780,9 ± 0,519,4 ± 0,16
Aterodieta II 242,4 ± 0,31160,8 ± 0,1225,3 ± 0,06135,2 ± 0,1330,6 ± 0,05
Extract de cloroform III 112,6 ± 0,17 ** 112,6 ± 0,42 *** 34,1 ± 0,11 *** 82,9 ± 0,15 ** 18,9 ± 0,09 **
Atorvastatina standard IV 107,1 ± 0,08 *** 107,3 ​​± 0,03 *** 32,2 ± 0,07 *** 85,0 ± 0,25 *** 20,6 ± 0,10 ***

Valori exprimate ca medie ± SEM. Niveluri de semnificație - Grupul II comparativ cu grupele I, III și IV.

Tabelul 3

Indicele aterogen al Mimosa pudica

Grupuri de tratament Indice ateronic (A.I)% Protecție
Controlul I 3.34-
Aterodieta II 6.36-
Extract de cloroform III 2.3363,3%
Atorvastatina standard IV 2.2568%

Secțiunea histopatologică a aortei animalelor hrănite cu aterodietă arată o îngroșare ateromatoasă marcată în intimă. Modificările inflamatorii ateromatoase au fost absente în grupul de control normal și în grupul standard tratat cu medicamente (Figura 2). Secțiunea hepatică a animalelor hrănite cu aterodietă prezintă modificări grase inflamatorii perivenulare marcate, care sunt relativ ușoare în extractul de cloroform (Figura 3). Secțiunea renală a animalelor hrănite cu aterodietă prezintă congestie marcată și formare de picături hialine în tubuli. În timp ce la animalele tratate cu extract standard și cloroform a existat o congestie ușoară, arhitectura rinichiului nu a fost modificată semnificativ (Figura 4). Din aceasta, se confirmă efectul anti-aterosclerotic al Mimosa pudica.

Secțiuni histopatologice ale aortei (intima de îngroșare aterogenă-ateromatoasă)