Abstract

Introducere

Obezitatea este o problemă majoră de sănătate, cu o prevalență crescândă în Asia de Sud-Est, Mediterana și Iran (Klein și colab. 2002; Mohamadnejad și colab. 2003). Excesul de greutate și obezitatea sunt printre cele mai frecvente probleme de sănătate la pacienții cu diabet zaharat de tip 2, afectând mai mult de 85% din toate cazurile. Obezitatea, prin creșterea rezistenței la insulină și a concentrației serice de glucoză, adaugă mai multă complexitate progresiei diabetului de tip 2 (Maggio și Pi-Sunyer 1997). Dislipidemia și creșterea țesutului adipos abdominal sunt cele mai frecvente tulburări metabolice la pacienții cu diabet zaharat de tip 2 (Sam și Haffner 2008).

Diferențele rasiale ale obezității în medii comparabile (Wang și Beydoun 2007; Ogden și colab. 2006) sugerează că obezitatea este rezultatul interacțiunilor complexe dintre factorii genetici, comportamentali, sociali și de mediu (Hill 2006; Prentice 2005; Speakman 2004; Ravussin și Bouchard 2000). Nutrigenetica evaluează efectul variațiilor genomului în răspunsul individului la nutrienți (Ordovas și Corella 2004). Studiile polimorfismului cu un singur nucleotid (SNP) oferă un instrument molecular puternic pentru investigarea rolului nutriției asupra sănătății și bolilor, ceea ce duce la determinarea dietelor optime pentru indivizi (Ames 1999). Harta genei obezității arată locii specifici pe toți cromozomii, cu excepția cromozomului Y, care sunt legate de obezitate (Ellsworth și colab. 2005). Există multe gene care reglează echilibrul energetic, apetitul, metabolismul lipidelor și adipogeneza (Martinez și colab. 2008).

O genă notabilă este Apolipoproteina A2, cu multe variante genetice identificate (Fullerton și colab. 2002). APOA2 este a doua proteină cea mai importantă din HDL, cuprinzând aproximativ 20% din proteina totală HDL (Blanco-Vaca și colab. 2001). Studiile anterioare indică o nouă asociere între -256T> C APOA2 polimorfismul și aportul de acizi grași saturați în raport cu IMC și obezitate (Corella și colab. 2007, 2009, 2011).

Un studiu recent a examinat asocierea dintre acest SNP și nivelul seric de leptină și grelină, ca un mecanism eficient care stă la baza obezității. În acest studiu, semnificativ APOA2-S-a observat interacțiunea SFA cu privire la nivelurile de grelină. Grelina serică pentru pacienții cu CC cu aport scăzut de SFA a fost mai mică decât pacienții cu CC cu aport ridicat de SFA și purtători de alele T (TT + TC) (Smith și colab. 2011).

De fapt, dieta este unul dintre cei mai importanți factori de mediu, care interacționează cu genomul pentru a modula riscul de boli. Înțelegerea acestor interacțiuni ne-ar putea conduce la prevenirea bolilor cronice, prin recomandări dietetice (Ordovas și Corella 2004). Datorită puținelor studii în acest domeniu și a niciunei înregistrări în Iran, efectuăm cercetările actuale cu scopul de a investiga distribuția −256T> C APOA2 polimorfism și apoi interacțiunea dintre APOA2 genotipuri și aport de acizi grași saturați în ceea ce privește variabilele antropometrice, nivelurile serice de grelină și leptină la pacienții cu diabet zaharat de tip 2.

Materiale și metode

Proiectarea studiului și subiecte

În acest studiu transversal, care a fost realizat din octombrie 2011 până în iunie 2012, 737 pacienți cu diabet zaharat de tip 2 (290 bărbați și 447 femei) cu vârsta cuprinsă între 35-65 de ani care au fost eșantionați aleatoriu prin Societatea iraniană de diabet, Asociația pentru diabet Gabric, Teheran, Centrul Medical de Est și Centrele de Sănătate din tot orașul.

După o explicație scrisă și verbală a scopului și metodologiei acestui studiu, s-a obținut consimțământul informat de la toți subiecții. Au fost excluși persoanele cu vârsta sub 35 sau peste 65 de ani, pacienții care administrează insulină, femeile însărcinate sau care alăptează și cei care au consumat alcool cu ​​24 de ore înainte de recoltarea probelor de sânge. Acest studiu a fost aprobat de Comitetul de Etică al Universității de Științe Medicale din Teheran.

Evaluarea măsurilor antropometrice și a activității fizice

Greutatea a fost măsurată în starea de post, cu îmbrăcămintea minimă, folosind solzi de șoim Seca, cu o precizie de 100 gr. Înălțimea a fost măsurată folosind un manometru Seca cu o precizie de 0,5 cm. Circumferința taliei a fost măsurată cu o precizie de 0,5 cm de la punctul mediu dintre marginea superioară a creastei iliace și marginea inferioară a pieptului și ultima coastă (Lohman și colab. 1988). Măsurătorile au fost luate de un dietetician. IMC a fost calculat împărțind greutatea (în kg) la pătratul de înălțime (în m).

Cantitatea de activitate fizică zilnică a fost evaluată prin chestionarul de activitate fizică clasificat în funcție de sarcina echivalentă metabolică (MET) care include nouă niveluri de activitate de la somn/odihnă (MET = 0,9) la activități fizice de intensitate ridicată (MET> 6). Acest chestionar a fost elaborat și validat în studii anterioare din Europa (Aadalh și Jorgensen 2003). În Iran, fiabilitatea și validitatea acestui chestionar au fost confirmate de Kelishadi și colab. (2004). Orele petrecute pentru fiecare activitate fizică au fost înmulțite cu cantitățile lor de MET, iar numerele obținute au fost însumate pentru a calcula valoarea MET/oră/zi (MET h/zi).

Evaluarea aportului alimentar

Aportul alimentar obișnuit al participantului în ultimul an a fost evaluat prin interviuri față în față realizate de un dietetician instruit folosind un chestionar semicantitativ privind frecvența alimentelor pentru 147 de produse alimentare. Validitatea și fiabilitatea chestionarului au fost confirmate anterior în Iran (Esmaillzadeh și colab. 2004). Subiecții au fost rugați să raporteze frecvența consumului de produse alimentare într-o zi, o săptămână, o lună sau un an. Cantitățile enumerate pentru fiecare produs alimentar au fost convertite în grame pe zi folosind Scala manualului de uz casnic (Ghaffarpour și colab. 1999). În cele din urmă, s-au determinat gramele echivalente ale fiecărui produs alimentar. Toate alimentele și băuturile au fost codificate. Pentru a evalua aportul de calorii și nutrienți, a fost utilizat programul Nutritionist-III (N3) conceput pentru alimentele iraniene.

Analiza biochimică

Probele de sânge venos au fost colectate după 12 ore peste noapte. S-au obținut seruri și s-au efectuat evaluări hormonale la 258 de pacienți cu eșantionare simplă aleatorie din fiecare grup de genotip.

Concentrațiile serice de grelină și leptină au fost măsurate prin metoda ELISA (Bioassay Technology Co., China și, respectiv, Mediagnost, Germania).

Analiza genetică

ADN-ul genomic a fost extras din sângele integral folosind metoda sărării (Miller și colab. 1988). Genotiparea APOA2 −265T> C (rs5082) a fost realizată de StepOne Real-Time PCR System (Applied Biosystems, Foster City, CA, SUA; Alvandi și Koohdani 2014).

analize statistice

Testul Kolmogorov - Smirnov a fost utilizat pentru a examina distribuția normală a datelor. Greutatea, IMC și circumferința taliei au fost transformate în jurnal. Testul Chi-pătrat a fost folosit pentru a compara procentele. ANOVA și independent t au fost aplicate teste pentru a compara mijloacele brute. Relația dintre APOA2 polimorfismul și variabilele antropometrice au fost testate într-o analiză a modelului multivariant de covarianță (ANCOVA), controlând factorii de confuzie (vârstă, sex, activitate fizică și aport total de energie). Interacțiunea dintre APOA2 −256T> C polimorfismul și aportul de SFA pentru variabilele antropometrice au fost testate într-un model de interacțiune multivariată ANCOVA, controlând factorii de confuzie (vârstă, sex, activitate fizică și aport total de energie). În plus, ajustarea pentru IMC a fost efectuată atunci când este indicat. Testul Mann-Whitney a fost utilizat pentru a examina relația dintre genotipuri și nivelurile de grelină (variabilă neparametrică). p valoare

Rezultate

Polimorfismul APOA2 a fost genotipat la un total de 737 pacienți (vârsta 54,1 ± 6,5 ani). În această populație, distribuția de -256T> C APOA2 polimorfismul a fost de 38,9, 48,6 și 12,5% pentru genotipurile TT, TC și respectiv CC. Distribuția alelică este conformă cu echilibrul Hardy - Weinberg. Pe baza acestor genotipuri, caracteristicile generale ale indivizilor sunt prezentate în Tabelul 1. Aceste date indică faptul că subiecții CC au fost semnificativ mai în vârstă decât purtătorii de alele T (TT + TC; p = 0,03) și fumatul este semnificativ mai frecvent în grupul cu CCp = 0,03). Nu a fost identificată nicio diferență semnificativă statistic în aportul alimentar între cele două grupuri de genotip (Tabelul 2).

Așa cum se arată în Tabelul 3, nu s-a observat nicio diferență semnificativă în media parametrilor antropometrici ai celor două genotipuri de grup. Deși, greutatea medie, IMC și circumferința taliei au fost mai mari în grupul CC decât grupul TT + TC, dar aceste diferențe nu au fost semnificative statistic. În plus, după ajustarea în funcție de vârstă, sex, fumatul de tutun, activitate fizică și aportul total de energie, nu au fost observate diferențe semnificative.

Tabelul 4 descrie măsurătorile antropometrice medii de APOA2 genotipuri și aportul de SFA. La purtătorii de alele T, nu s-a găsit nicio asociere semnificativă prin greutate, IMC și circumferința taliei între două categorii de aport de SFA (Tabelul 4 Asocierea polimorfismului APOA2 cu variabile antropometrice în diferite categorii de aport de acizi grași saturați

Pe baza rezultatelor din Fig. 1, după ajustarea în funcție de vârstă, sex, fumatul de tutun, activitate fizică și aportul total de energie, IMC și greutate nu au fost diferite la toți subiecții (grup CC și TC + TT) cu aport scăzut de SFA (Fig. 1

aportul

Interacțiunea dintre polimorfismul APOA2 și aportul de acizi grași saturați în ceea ce privește greutatea (A), circumferinta taliei (b) și IMC (c). Mijloacele sunt ajustate în funcție de vârstă, sex, fumatul de tutun, activitate fizică, aportul total de energie (A, c) și indicele de masă corporală (b). p interacțiunile sunt obținute cu modelul de interacțiune multivariat care conține aportul de grăsime ca variabilă categorică și polimorfismul APOA2 și controlul suplimentar pentru covariabilele indicate mai sus. Baruri indică media ± SD

După ajustarea pentru factorii de confuzie, nu a existat nicio interacțiune semnificativă între APOA2 genotipuri și aportul de SFA în raport cu circumferința taliei.

Tabelul 5 arată că concentrația de grelină a fost semnificativ mai mare în grupul CC decât grupul TT + TC (p = 0,03), în timp ce după ajustarea pentru variabilele de confuzie (vârstă, sex, fumatul de tutun, activitate fizică, IMC și aportul total de energie), nivelul seric de leptină nu a fost semnificativ între cele două grupuri. În acest studiu, pe baza aportului de SFA, nu s-a găsit nicio diferență semnificativă între nivelurile medii de hormoni ale participanților și APOA2 genotipuri (datele nu sunt prezentate).

Discuţie

Am găsit o interacțiune semnificativă între aportul de acizi grași saturați și −256T> C APOA2 genotipuri pentru IMC. Rezultatele noastre sunt în concordanță cu rezultatele studiilor anterioare efectuate la cele trei populații americane (Corella și colab. 2009), populația mediteraneană, subiecții indieni chinezi și asiatici (Corella și colab. 2011) care au participat la un studiu național de sănătate din Singapore. Aceste studii au arătat asocierea unui aport ridicat de SFA cu un IMC mai mare și obezitate în genotipul CC.

În populația noastră, frecvența purtătorilor de alele minore homozigote (CC) a fost de 12,5%, în timp ce distribuția genotipului CC a diferit în diferite populații (1-16%; Corella și colab. 2009, 2011; Smith și colab. 2011). În FOS (16%; Corella și colab. 2009), studiul GOLDEN (15%; Corella și colab. 2009) și populația mediteraneană (15%; Corella și colab. 2011), prevalența subiecților CC a fost mai mare decât a noastră și a celorlalți populației, în timp ce frecvența genotipului CC a fost aceeași cu studiul nostru (12%) la populația spaniolă (Smith și colab. 2011).

În studiul actual, am împărțit aportul de SFA în două grupuri (scăzut și ridicat) în conformitate cu studiile anterioare (Corella și colab. 2009). La subiecții cu aport mai scăzut de SFA, după ajustarea în funcție de vârstă, sex, activitate fizică și aportul total de energie, nu a existat nicio asociere semnificativă între greutatea medie sau IMC și APOA2 genotipuri. Cu toate acestea, aceste relații au fost semnificativ diferite la pacienții cu aport ridicat de SFA. După ajustarea în funcție de vârstă, sex, activitate fizică, aport total de energie și IMC, atât în ​​grupurile de aport SFA ridicat, cât și în cel scăzut, o interacțiune semnificativă între circumferința taliei și două grupuri de APOA2 genotipurile nu au fost găsite.

Mecanismul prin care −256T> C APOA2 SNP afectează metabolismul grăsimilor este încă necunoscut. Până în prezent, cercetătorii au descris asta APOA2 transcrierea este controlată de o serie de elemente de reglare A la N în regiunea promotor a genei. Polimorfismul −265T> C este situat în mijlocul elementului D (Chambaz și colab. 1991). Acest element leagă mai mulți factori nucleari diferiți (Cardot și colab. 1994). Se sugerează că factorii de legare nucleară în prezența alelei C au fost asociați cu mai mici APOA2 expresie în celulele hepatice care are ca rezultat reducerea APOA2 concentrația plasmatică (Van’t Hooft și colab. 2001), în timp ce rezultatele acestui studiu indică faptul că diferența probabilă în APOA2 concentrația plasmatică nu a avut niciun efect asupra variabilelor antropometrice, dar modificările stilului de viață, cum ar fi aportul ridicat de SFA, pot modifica căile metabolice necunoscute care duc la creșterea sensibilității la creșterea în greutate și la obezitate.

Acesta este motivul pentru care indivizii cu genotipuri CC, care consumă SFAs C polimorfismul a fost asociat cu niveluri ridicate de grelină serică, dar nu au existat semnificative APOA2-interacțiunile grăsimilor saturate în ceea ce privește variabilele hormonale. Pe baza acestor constatări, recomandările dietetice personalizate pe bază de genotip pentru aportul de SFA ar putea fi utile în prevenirea obezității.