Hye-Jin Lee

1 Departamentul de Alimentație și Nutriție, Colegiul de Științe ale Vieții și Tehnologie Nano, Daedeok Valley Campus, Universitatea Hannam, 461-6 Jeonmin-dong, Yuseong-gu, Daejeon 305-811, Coreea.

morcovi

Parcul Yoo Kyoung

2 Departamentul de Nutriție Medicală, Școala Absolventă de Științe Medicale Est-Vest, Universitatea Kyung Hee, Gyeonggi 446-791, Coreea.

3 Institutul de Cercetare pentru Nutriție Medicală, Universitatea Kyung Hee, Seoul 130-791, Coreea.

Myung-Hee Kang

1 Departamentul de Alimentație și Nutriție, Colegiul de Științe ale Vieții și Tehnologie Nano, Daedeok Valley Campus, Universitatea Hannam, 461-6 Jeonmin-dong, Yuseong-gu, Daejeon 305-811, Coreea.

Abstract

Introducere

Recent, au fost efectuate studii privind efectul alimentelor antioxidante și alimentelor funcționale pentru sănătate asupra prevenirii și tratamentului diferitelor boli cronice. S-a raportat că astfel de substanțe posedă funcție antioxidantă și normalizează sistemele antioxidante compromise de stresul oxidativ cauzat de radicalii liberi. În special, fumatul determină o creștere anormală a radicalilor liberi, care provoacă o oxidare puternică în organism și dăunează lipidelor, proteinelor sau chiar celulelor. Prin urmare, starea nutrițională antioxidantă este crucială pentru fumători și este esențial să consumați suficienți nutrienți antioxidanți pentru a neutraliza continuu radicalii liberi.

Atunci când apare daune oxidante în mod continuu, provoacă leziuni ale ADN-ului în celule, ceea ce crește riscul de boli precum îmbătrânirea sau cancerul [1,2]. Prin urmare, trebuie efectuate cercetări cu privire la efectele suplimentării alimentelor antioxidante asupra stării nutriționale antioxidante a fumătorului. Recent, Riso și colab. [3] a raportat că purinele oxidate la fumători au fost reduse semnificativ la nivelul nefumătorilor la suplimentarea broccoli. Wang și colab. [4] a raportat, de asemenea, că nivelul radicalului seric a scăzut semnificativ atunci când fumătorii au consumat suc de noni timp de 30 de zile. De asemenea, s-a demonstrat că consumul de 250 g de broccoli de către tinerii fumători pe parcursul a 10 zile protejează împotriva deteriorării ADN-ului [5]. În contrast, un studiu anterior [6] a raportat că suplimentarea legumelor și fructelor mixte nu a avut niciun efect asupra scăderii deteriorării ADN-ului.

Astfel, acest studiu a fost realizat pentru a compara efectele suplimentelor antioxidante de vitamine și legume, prin măsurarea nivelului de deteriorare a ADN-ului limfocitar și a stării nutriționale antioxidante înainte și după suplimentarea cu legume care conțin β-caroten sau aceeași cantitate de vitamină la fumătorii cu daune mari ale ADN-ului peste 8 săptămâni.

Subiecte și metode

Subiecte

Măsurători dietetice

Evaluarea dietetică a fost efectuată printr-un interviu 1: 1 utilizând metoda de rechemare de 24 de ore înainte (0 săptămână) și după (8 săptămâni) suplimentarea cu suc de morcovi și β-caroten. Interviul a fost realizat de departamentul de alimentație și nutriție. Pentru a ajuta la amintirea cantității de alimente consumate, modelul alimentar și cantitatea aproximativă de alimente vizualizate pe o fotografie au fost prezentate în timpul sondajului pentru toate tipurile de alimente. Aportul total de nutrienți a fost estimat folosind programul CAN 2.0 (Nutrition Information Center, Korean Nutrition Society).

Chestionarul privind frecvența alimentelor a fost utilizat pentru a analiza conținutul de flavonoide și carotenoide consumate de subiecți peste o lună. Baza de date a conținutului de flavonoide și carotenoide din alimente a fost menționată la conținutul de izoflavonă din alimente [11] publicată de USDA-Iowa State University/SUA, baza de date a izoflavonelor [12] din Coreea de către Kim și Yoon și flavonoidul conținutul pe aliment raportat în cercetările precedente de Hertog și colab. [13-15] și Bilyk și colab. [16,17]. Un chestionar pentru ancheta semicantitativă a frecvenței suplimentării alimentare [18] elaborat de acest laborator în 2001 a fost distribuit celor 50 de fumători. Cantitatea medie de flavonoizi și carotenoizi luată în fiecare zi de subiecți a fost calculată utilizând baza de date a conținutului de flavonoizi a fiecărui aliment după calcularea cantității medii zilnice de hrană pentru fiecare individ prin înmulțirea cantității de 1 dată de alimentare și a valorii frecvenței de hrănire pentru fiecare subiect de anchetă.

Supliment de suc de morcovi și vitamine antioxidante

tabelul 1

Conținutul de nutrienți din sucul de morcovi

Analiza sângelui

Sângele a fost extras pentru subiecți înainte (0 săptămână) și 8 săptămâni după suplimentarea cu suc de morcovi, β-caroten și placebo. Probele de sânge integral care au fost extrase de la subiecții anchetei după post au fost plasate într-un tub steril heparinat de 10 ml (Becton Dickinson Co.) și aduse la laborator. O parte din sângele întreg a fost plasat separat pentru analiza cometei pentru a măsura deteriorarea ADN-ului. Sângele rămas a fost centrifugat la 1.000 rpm timp de 15 minute pentru a colecta PDP (plasmă bogată în trombocite) pe partea de sus pentru analiza vitaminei C, apoi a fost centrifugat din nou la 3.000 rpm timp de 30 de minute pentru a colecta PDP (plasmă deficitară în trombocite) pentru separarea plasmei sanguine. Plasma din sânge a fost împărțită pentru fiecare element de analiză și menținută la -80 80 în congelator până la utilizare. Eritrocitele au fost centrifugate de 3 ori cu soluție salină tamponată cu fosfat izo-osmotic (pH 7,4) timp de 10 minute la 3.000 rpm. Suspensia de eritrocite și plasma au fost împărțite pentru fiecare analiză și menținute la -80 ℃ într-un congelator până la utilizare.

Determinarea deteriorării ADN-ului prin testarea cometei alcaline

Determinarea enzimelor antioxidante

Analiza catalazei, glutation peroxidazei (GSH-Px) și superoxidului dismutazei (SOD) în celulele roșii din sânge a fost efectuată după cum urmează. După tratarea celulelor roșii din sânge cu peroxid de hidrogen, cantitatea de peroxid de hidrogen redusă a fost măsurată la 240 nm timp de 30 de secunde cu ajutorul unui spectrofotometru UV/VIS [21]. GSH-Px catalizează reacția oxidantă a glutationului de către peroxid (t-butihidroperoxid). În reacția din aval, glutationul oxidat este restabilit în glutation în prezența glutation reductazei și a NADPH. Glutation peroxidaza a fost analizată prin măsurarea concentrației reduse de NADPH după restaurare la 340 nm timp de 90 de secunde folosind un spectrofotometru UV/VIS [22]. Pentru SOD, s-au adăugat etanol și cloroform după ce suspensia de celule roșii a fost hemolizată cu apă distilată, care a fost centrifugată la 3.000 U/min timp de 2 minute. Pirogalolul a fost adăugat la soluții de concentrații diferite și a fost măsurat la 320 nm timp de 180 de secunde folosind un spectrofotometru UV/VIS [23].

Determinarea profilelor lipidice plasmatice

Conținutul de lipide plasmatice, colesterol total și trigliceride au fost analizate cu ajutorul analizorului fotometric auto (ERBA CHEM-PRO), din plasmă care a fost păstrată într-un congelator de -80 ℃. Probele au fost incubate cu 1 ml de soluție enzimatică furnizată în kit (Somang Pharmaceutical Co., Ltd.) și au reacționat timp de 5 minute într-o baie de apă cu temperatură constantă. HDL-colesterolul a fost analizat cu ajutorul analizorului fotometric auto (ERBA CHEM-PRO). În aceste experimente, s-au amestecat 0,2 ml de plasmă sanguină cu 0,2 ml de reactiv de precipitare, incubat la temperatura camerei timp de 5 minute, centrifugat timp de 10 minute, amestecat cu 0,1 ml de soluție superioară 0,1 ml și 3 ml de soluție de enzimă și a reacționat timp de 5 minute într-o baie de apă cu temperatură constantă la 37 ° C. LDL-colesterolul a fost calculat folosind ecuația Friedewald [24].

analize statistice

Toate datele au fost introduse într-un sistem de baze de date Excel al MS, iar sarcinile statistice au fost efectuate folosind pachetul de statistici SPSS-PC + (versiunea 17.0). Eroarea medie și standard (SE) a fost obținută pentru fiecare element, apoi diferența medie între cele 3 grupuri a fost verificată de Duncan după ANOVA unidirecțională, iar semnificația statistică a fost evaluată la nivelul α = 0,05. Semnificația comparației medii înainte și la 8 săptămâni după fiecare supliment de suc de morcovi, vitamină antioxidantă și placebo a fost testată folosind un test t asociat. De asemenea, s-au efectuat teste chi-pătrat în funcție de frecvența fumatului și a consumului de alcool.

Rezultate

Caracteristici generale ale subiectelor

Tabelul 2 prezintă rezultatele sondajului privind caracteristicile generale și obiceiurile de viață, inclusiv fumatul și măsurătorile corporale (înălțime, greutate, IMC, WHR și procentul de grăsime corporală). Vârsta medie a subiecților a fost de 36,5, ceea ce nu a fost semnificativ diferit între fiecare grup. În plus, nu a existat nicio diferență semnificativă în înălțime, greutate, IMC, WHR și gradul de obezitate, care a fost măsurată pe baza procentului de grăsime corporală. Obiceiul mediu de fumat pe zi a fost de 16,4 ± 1,2 în grupul cu suc de morcovi, 19,0 ± 2,3 în grupul cu β-caroten și 16,5 ± 2,6 în grupul cu placebo. În plus, perioada medie de fumat (exprimată ca ani de pachet) pentru grupul cu suc de morcovi, grupul β-caroten și grupul placebo a fost de 17,2 ± 2,4 ani, 14,74 ± 1,9 ani și respectiv 15,3 ± 2,6 ani. Anul pachet calculat pe baza unui pachet (20 de țigări) timp de 1 an, la luarea în considerare a cantității de fumat și a perioadei de fumat, a fost de 15,02 ± 2,1 pentru grupul cu suc de morcovi, 16,18 ± 4,1 ani pentru grupul β-caroten și 14,62 ± 4,35 ani pentru grupul placebo (Tabelul 2). Procentul de subiecți care au consumat alcool a fost de 98%, iar aportul de alcool a fost de 35,8 ± 6,2 ml/zi în grupul cu suc de morcovi, 23,8 ± 5,3 ml/zi în grupul β-caroten și 42,1 ± 13,5 ml/zi în grup placebo (Tabelul 2). În studiul obiceiurilor de exercițiu, 56,25% (n = 27) s-au exercitat în mod regulat 1

De 2 ori pe săptămână și 43,75% (n = 21) se exercită rar. Timpul de exercițiu a fost de 18,81 minute/zi pentru grupul cu suc de morcovi, 18,21 minute pentru grupul β-caroten și 19,90 minute/zi pentru grupul placebo (Tabelul 2). Nu au existat diferențe semnificative înainte și 8 săptămâni după experiment în ceea ce privește greutatea, IMC, WHR etc. a tuturor grupurilor. Presiunile sanguine diastolice și sistolice, de asemenea, nu au prezentat diferențe semnificative după intervenție.

masa 2

Indici antropometrici, fumatul și obiceiurile de băut ale subiecților