Prof. Dr. Idris Mehmetoglu

factor

Biyokimya AD, Facultatea de tip Meram

42080 Konya (Turcia)

Articole similare pentru „”

  • Facebook
  • Stare de nervozitate
  • LinkedIn
  • E-mail

Abstract

Obiectiv: Am măsurat albumina modificată de ischemie (IMA), starea antioxidantă totală (TAS), starea oxidantă totală (TOS) și nivelurile de proteină C reactivă (hsCRP) cu sensibilitate ridicată la subiecții obezi și cu greutate normală pentru a investiga dacă IMA poate fi utilizat ca biomarker al stresului oxidativ și al inflamației și dacă IMA a fost sau nu un factor determinant al obezității. Metode: Studiul a fost efectuat pe 92 de subiecți obezi (20 bărbați, 72 femei) cu vârsta de 38 ± 11 ani și 78 de martori cu greutate normală (19 bărbați, 59 femei) cu vârsta de 37 ± 11 ani. S-au măsurat nivelurile serice de lipide, IMA, TAS, TOS și hsCRP ale subiecților. Rezultate: IMA (p 2 = 0.139, p 2 = 0.136, p 2 = 0.120, p

Introducere

Obezitatea este acumularea excesivă de grăsime corporală care prezintă un risc pentru sănătate, ducând la reducerea speranței de viață [1,2]. Pe lângă faptul că servește ca depozit de energie pentru lipide, țesutul adipos este acum recunoscut ca fiind un participant activ la homeostazia energetică și la funcțiile fiziologice, cum ar fi imunitatea și inflamația. Se știe că țesutul adipos exprimă și secretă o varietate de produse cunoscute sub numele de „adipokine”, inclusiv leptina, adiponectina și rezistina, precum și citokinele și chemokinele, cum ar fi factorul de necroză tumorală-alfa și interleukina-6. Eliberarea adipokinelor duce la o stare subinflamatorie cronică care ar putea juca un rol central în dezvoltarea rezistenței la insulină și a diabetului zaharat de tip 2 (DM) și poate fi, de asemenea, responsabilă pentru riscul crescut de boli cardiovasculare (BCV) asociat cu obezitatea [3]. ]. Într-adevăr, s-a raportat că persoanele obeze au o morbiditate și o mortalitate substanțial crescute din DM de tip 2 [2], cancer [4] și aproape toate formele de BCV [5].

Ischemia, hipoxia, acidoza și formarea radicalilor liberi pot modifica capacitatea capătului amino terminal (N-terminal) al moleculei de albumină de a lega metale de tranziție precum cobalt, cupru și nichel [6,7,8]. Multe studii au evaluat utilitatea clinică a albuminei modificate cu ischemie (IMA) la pacienții cu suspiciuni de sindroame coronariene acute [8] și ischemie miocardică [9]. De asemenea, sa raportat că IMA crește în bolile legate de obezitate, cum ar fi sindromul metabolic [10], hipercolesterolemia [11] și DM de tip 2 [12].

Stresul oxidativ poate apărea din cauza supraproducției de oxidanți, scăderii apărării antioxidante sau unei combinații a acestor factori. Sistemul antioxidant natural este format din enzime antioxidante și numeroși compuși antioxidanți și protejează moleculele funcționale și structurale împotriva speciilor reactive de oxigen (ROS). Generarea ROS poate modifica cel puțin tranzitor regiunea N-terminală a albuminei pentru a produce niveluri crescute de IMA [7]. Măsurarea stării antioxidante totale (TAS) este un indicator simplu al activității tuturor antioxidanților, în timp ce starea oxidantului total (TOS) este un indicator al stresului oxidativ total [13,14].

Recent, s-a demonstrat că obezitatea reduce capacitatea albuminei de a lega cobaltul, rezultând niveluri mai ridicate de IMA [15,16]. Cu toate acestea, nu există niciun studiu care să investigheze asocierea dintre stresul oxidativ și biomarkerii inflamației, cum ar fi TAS, TOS și proteina C-reactivă de înaltă sensibilitate (hsCRP) la persoanele obeze.

Prin urmare, am investigat modul în care stresul oxidativ și inflamația afectează formarea noului marker de diagnostic IMA prin măsurarea nivelurilor serice de IMA, TAS, TOS și hsCRP și corelațiile dintre acestea la subiecții obezi. În plus, am încercat să aflăm dacă IMA a fost sau nu un factor determinant al obezității. Astfel, ne-am propus să explorăm baza moleculară și complicațiile obezității și să contribuim la strategiile de prevenire și tratament ale obezității.

Participanți și metode

Subiecte

92 de subiecți obezi (20 bărbați, 72 femei) cu vârsta cuprinsă între 20-65 ani (medie 38 ± 11 ani) și 78 martori cu greutate normală (19 bărbați, 59 femei) cu vârsta cuprinsă între 19-68 ani (medie 37 ± 11 ani) au fost înrolați în studiul. Caracteristicile antropometrice și clinice ale grupurilor sunt prezentate în tabelul 1. Subiecții potențiali au fost excluși de la participarea la studiu dacă s-a observat oricare dintre următoarele afecțiuni: DM, boli hepatice cronice, hipertensiune arterială, cancer, boli inflamatorii, dislipidemie gravă sau antecedente de CVD. Presiunea arterială sistolică mai mare de 140 mm Hg și tensiunea arterială diastolică mai mare de 90 mm Hg au fost definite ca criterii de hipertensiune arterială [17]. Controalele au fost persoanele cu greutate normală, în funcție de vârstă, cu un IMC între 18,5 și 24,9 kg/m2 și fără plângeri sau descoperiri patologice de laborator.

tabelul 1

Caracteristicile antropometrice și clinice ale participanților grupați în funcție de IMC a

IMC a fost măsurat la toți participanții ca criteriu al obezității. IMC a fost obținut prin împărțirea greutății unei persoane (în kg) la pătratul înălțimii sale (în m). Subiecților li se cerea să poarte doar haine ușoare și să stea drepți, desculți și în largul lor atunci când erau măsurați. Atât cântarele, cât și stadiometrul au fost calibrate înainte de utilizare. Subiecții cu un IMC între 25 și 29,9 kg/m 2 au fost considerați ca supraponderali, iar cei cu un IMC ≥ 30 kg/m 2 au fost considerați obezi [1]. Circumferința taliei a fost utilizată ca indicator central al adipozității, luând în considerare valori mai mari de 80 și 94 cm pentru femeie și, respectiv, pentru bărbat [18]. Circumferințele taliei participanților au fost măsurate cu o bandă moale la jumătatea distanței dintre coasta inferioară și creasta iliacă. Circumferința șoldului a fost măsurată în cea mai lată parte a regiunii gluteale.

Protocolul de studiu a fost aprobat de Comitetul de Etică al Școlii de Medicină Meram, Universitatea din Selcuk, Konya, Turcia. Toți subiecții au fost informați cu privire la detaliile studiului și s-a primit consimțământul scris al fiecărui pacient.

Probele de sânge venos au fost extrase după o stare de post peste noapte. Probele de sânge au fost procesate pentru analiză de rutină, iar serurile au fost congelate la –80 ° C în decurs de 2 ore de la colectarea probelor pentru testarea ulterioară a IMA, TAS și TOS. Nivelurile de lipide din sânge, hsCRP și glucoză au fost măsurate prin metode de rutină pe un autoanalizator (Beckman Coulter, Fullerton, CA, SUA), iar nivelurile de insulină au fost determinate prin metoda de chemiluminescență de rutină pe un analizor E170 (Roche Diagnostics, Rotkreuz, Elveția) pe în aceeași zi de colectare a probelor. Evaluarea modelului de homeostazie a rezistenței la insulină (HOMA-IR) a fost utilizată pentru a detecta gradul de rezistență la insulină și a fost calculată prin ecuațiile date de Mathews și colab. [19].

Măsurarea nivelurilor IMA

Nivelurile IMA au fost măsurate printr-un test colorimetric dezvoltat de Bar-Or și colab. [9] pe baza măsurării cobaltului nelegat după incubarea cu serul pacientului. Creșterea cantităților de IMA are ca rezultat o legare mai redusă a cobaltului și mai mult rest de cobalt nelegat disponibil pentru complexul cu un cromogen (ditiotreitol (DTT)), care poate fi măsurat fotometric. Procedura a fost următoarea:

50 de clorură de cobalt 1% s-au adăugat la 200 ml de ser, s-au amestecat ușor și s-au incubat timp de 10 minute pentru a permite legarea adecvată de cobalt-albumină. S-au adăugat 50 pl de DTT, la o concentrație de 1,5 mg/ml, ca agent de colorare; reacția a fost oprită 2 minute mai târziu prin adăugarea a 1,0 ml de NaCI 0,9%. Produsul colorat a fost măsurat la 470 nm și comparat cu o probă serică-cobalt fără DTT; rezultatele au fost raportate în unități de absorbție (ABSU). Coeficientul de varianță (CV) intra-test și inter-test pentru IMA a fost calculat prin repetarea eșantionului pacientului în opt teste în duplicat și s-a constatat că este de 6,5% și respectiv 8,7%.

Măsurarea TAS

TAS de ser a fost determinat folosind un kit disponibil comercial (Rel Assay Diagnostic, Lot: RL015, Gaziantep, Turcia) care a fost bazat pe albirea culorii caracteristice a unui 2,2'-azino-bis (3-etilbenz-) mai stabil. cation radical radical tiazolină-6-sulfonic) (ABTS) de către antioxidanți [13]. Rezultatele au fost exprimate în echivalenți mmol Trolox/l. CV-urile intra-test și inter-test pentru TAS au fost de 1,3%, respectiv 1,5%. Sensibilitatea testului a fost 0,04 mmol echivalenți Trolox/l.

Măsurarea TOS

TOS-ul serului a fost determinat utilizând un kit disponibil comercial (Rel Assay Diagnostic, Lot: RL015) care a fost bazat pe oxidarea complexului feros ion-O-dianisidină la ion feric de către oxidanții prezenți în probă. Reacția de oxidare este îmbunătățită de moleculele de glicerol, care sunt prezente abundent în mediul de reacție. Ionul feric face un complex colorat cu xilenol portocaliu într-un mediu acid. Intensitatea culorii, care poate fi măsurată spectrofotometric, este legată de cantitatea totală de molecule oxidante prezente în probă. Testul este calibrat cu peroxid de hidrogen (H2O2) și rezultatele sunt exprimate în termeni de echivalenți µmol H2O2/l [14]. CV-urile intra-test și inter-test pentru TOS au fost mai mici de 3%. Sensibilitatea testului a fost de 1,13 umol H2O2 echivalenți/l.

Analize statistice

Tabelul 3

Corelații ale markerilor de stres oxidativ și ale variabilelor antropometrice cu profil lipidic și hsCRP a grupelor a