Giulia Vizzari

1 Departamentul de Pediatrie, Spitalul San Paolo, Departamentul de Științe ale Sănătății, Universitatea din Milano, 20142 Milano, Italia; [email protected] (G.V.); [email protected] (M.C.S.); [email protected] (S.V.); [email protected] (G.R.)

circulant

Maria Chiara Sommariva

1 Departamentul de Pediatrie, Spitalul San Paolo, Departamentul de Științe ale Sănătății, Universitatea din Milano, 20142 Milano, Italia; [email protected] (G.V.); [email protected] (M.C.S.); [email protected] (S.V.); [email protected] (G.R.)

Michele Dei Cas

2 Laboratory of Clinical Biochemistry and Mass Spectrometry, San Paolo Hospital, Department of Health Science, Universita ’degli Studi di Milano, 20142 Milano, Italy; [email protected] (M.D.C.); [email protected] (R.P.)

Simona Bertoli

3 Departamentul de știință și tehnologie a alimentelor și microbiologiei (DiSTAM), Centrul internațional pentru evaluarea stării nutriționale (ICANS), Studiile Universității din Milano, Via G. Colombo, 60, 20133 Milano, Italia; [email protected] (S.B.); [email protected] (A.B.)

Sara Vizzuso

1 Departamentul de Pediatrie, Spitalul San Paolo, Departamentul de Științe ale Sănătății, Universitatea din Milano, 20142 Milano, Italia; [email protected] (G.V.); [email protected] (M.C.S.); [email protected] (S.V.); [email protected] (G.R.)

Giovanni Radaelli

1 Departamentul de Pediatrie, Spitalul San Paolo, Departamentul de Științe ale Sănătății, Universitatea din Milano, 20142 Milano, Italia; [email protected] (G.V.); [email protected] (M.C.S.); [email protected] (S.V.); [email protected] (G.R.)

Alberto Battezzati

3 Departamentul de știință și tehnologie a alimentelor și microbiologiei (DiSTAM), Centrul internațional pentru evaluarea stării nutriționale (ICANS), Studiile Universității din Milano, Via G. Colombo, 60, 20133 Milano, Italia; [email protected] (S.B.); [email protected] (A.B.)

Rita Paroni

2 Laboratory of Clinical Biochemistry and Mass Spectrometry, San Paolo Hospital, Department of Health Science, Universita ’degli Studi di Milano, 20142 Milano, Italy; [email protected] (M.D.C.); [email protected] (R.P.)

Elvira Verduci

1 Departamentul de Pediatrie, Spitalul San Paolo, Departamentul de Științe ale Sănătății, Universitatea din Milano, 20142 Milano, Italia; [email protected] (G.V.); [email protected] (M.C.S.); [email protected] (S.V.); [email protected] (G.R.)

Abstract

1. Introducere

Acidul salicilic (SA) este un metabolit cu o structură fenolică produsă de plante ca sistem de apărare împotriva agenților patogeni și a stresului din mediu [1,2]. Salicilații sunt prezenți în cantități apreciabile în fructe și legume, vinuri, ceai, sucuri de fructe, ierburi și condimente. Printr-o revizuire sistematică a literaturii [3], o bază de date privind compoziția alimentelor care descrie valorile medii ale salicilatului pentru 27 de tipuri diferite de fructe; 21 legume; 28 ierburi, condimente și condimente; 2 supe; și au fost construite 11 băuturi. Utilizând această bază de date, aportul total de salicilat într-o populație scoțiană a fost estimat la 4,42 și 3,16 mg/zi, pentru bărbați și, respectiv, pentru femele, cu fructe și legume ca surse majore (25%). Cu toate acestea, SA este mai bine cunoscut ca principalul metabolit și component activ al aspirinei, un medicament antiinflamator.

Utilizarea salicilaților a fost introdusă înainte ca mecanismul lor de acțiune să fie cunoscut. Mecanismul principal este reprezentat de inhibarea ciclooxigenazelor, responsabile de biosinteza prostaglandinelor prin legături slabe. În caz contrar, acidul acetilsalicilic (aspirina) inhibă ciclooxigenazele printr-o legătură covalentă. Acidul salicilic joacă un rol important în metabolismul uman și animal și, deși la om, cea mai mare parte este de origine exogenă, a fost demonstrată și biosinteza endogenă. Principalele efecte ale salicilaților sunt analgezia, activitatea antipiretică și antiinflamatoare. Doza mică de acid acetilsalicilic în administrare cronică are un efect de agregare anti-trombocitelor. Un studiu a arătat că aportul cronic de aspirină cu doze mici este eficient pentru prevenirea bolilor cardiovasculare și a cancerului colorectal [1], deși într-o meta-analiză recentă, nu a fost raportată nicio asociere între consumul de aspirină și cancer [4].

Studii recente au arătat, de asemenea, că concentrații mari de salicilat activează proteina AMPK (adenozin mono-fosfat kinază) (proteina kinază activată AMP), care joacă un rol cheie în reglarea metabolismului și creșterea celulară [5].

În ultimii ani, a crescut interesul pentru rolul acidului salicilic ca componentă dietetică bioactivă, cu consecințe asupra sănătății. Este posibil ca efectele benefice ale consumului regulat de fructe și legume la subiecții sănătoși să depindă și de expunerea cronică scăzută la SA. Într-adevăr, vegetarienii au prezentat o SA circulantă mai mare decât non-vegetarieni și niveluri similare cu cele ale subiecților care au luat doze mici de aspirină (75 mg/zi) [6].

Până în prezent, doar un studiu pilot pe această problemă a fost realizat pentru vârstele pediatrice. În special, a fost studiată o asociere între SA serică și consumul de fructe și legume la copiii cu obezitate și copii cu greutate normală, arătând că copiii cu obezitate aveau SA serică mai mică decât copiii cu greutate normală [7].

O epidemie de obezitate infantilă a crescut rapid la nivel mondial și este în zilele noastre una dintre cele mai grave provocări la nivel mondial în materie de sănătate publică. Obezitatea este adesea asociată cu inflamație cronică sistemică de grad scăzut [8] și comorbidități conexe [9].

Scopul acestui studiu a fost de a evalua efectul unei intervenții nutriționale-comportamentale de 1 an asupra nivelurilor serice de SA și de a studia o posibilă asociere între nivelurile de SA și modificările profilului metabolic la copiii cu obezitate.

2. Secțiunea experimentală

Acesta a fost un studiu longitudinal intervențional, non-randomizat, necontrolat (https://clinicaltrials.gov/). Un grup de 51 de copii cu obezitate (28 de băieți și 23 de fete) a fost recrutat consecutiv printre cei admiși cu diagnostic de obezitate de către pediatrii de îngrijire primară la Departamentul de Pediatrie, Spitalul San Paolo, Milano, Italia, între octombrie 2016 și septembrie 2018, conform următoarelor criterii de eligibilitate: vârsta ≥6 ani, greutatea la naștere ≥2500 g și 2 la vârsta de 18 ani [10]. Părinții copiilor eligibili sau tutorele legal au primit o explicație detaliată despre scopul studiului și au semnat un formular de consimțământ. Comitetul de etică al spitalului a aprobat protocolul de studiu și a acordat aprobarea etică.

2.1. Antropometrie și tensiune arterială

La recrutare, un istoric medical a fost colectat de la părinți folosind un chestionar standardizat în timpul unui interviu personal, realizat de același pediatru care se ocupa de examinarea generală a copiilor.

Pediatrul a luat măsurători antropometrice și tensiunea arterială a copiilor, atât la recrutare, cât și la sfârșitul intervenției, asistat de un operator cu experiență. Greutatea corporală și înălțimea au fost măsurate utilizând o scală mecanică a coloanei (seca 711; seca GmbH & KG, Hamburg, Germania) cu o tijă de măsurare integrată (seca 220; seca GmbH & KG). IMC a fost calculat din raportul dintre greutate și înălțime pătrat (kg/m 2). Scorurile z IMC au fost calculate și ajustate în funcție de vârstă și sex utilizând metoda LMS a lui Cole [11] și datele de referință italiene [12].

Circumferința taliei (WC) a fost măsurată folosind banda de măsurare seca 203 (seca GmbH & KG) la cel mai apropiat 0,1 cm la punctul mediu dintre creasta iliacă și marginea inferioară a coastelor la sfârșitul unei expirații normale. Grosimea pliului pielii tricepsului a fost măsurată pe partea stângă a corpului, utilizând calibrul Harpenden Skinfold Caliper (Chasmors Ltd., Londra, Marea Britanie) la jumătatea distanței dintre procesul acromion și procesul olecranon [13]. Raportul talie-înălțime (WHtR) a fost calculat ca circumferința taliei (cm) împărțită la înălțime (cm).

Pentru determinarea FM (masa de grăsime) și a FFM (masa de grăsime liberă), a fost utilizată o scară Tanita pentru evaluarea impedanței corporale. Analizorul de compoziție corporală segmentară Tanita BC 418 MA (Tanita, Japonia) este un dispozitiv BIA (bioimpedentiometrie) cu o singură frecvență care utilizează opt electrozi polari. Acest dispozitiv utilizează un sistem de cântărire cu celule de încărcare într-un singur punct pe platforma de cântare și poate oferi citiri separate ale masei corporale pentru diferite segmente ale corpului, cum ar fi brațul drept, brațul stâng, trunchiul, piciorul drept și piciorul stâng. Un algoritm care încorporează impedanță, vârstă și înălțime a fost folosit pentru a estima% FM și% FFM [14].

Tensiunea arterială a fost măsurată și evaluată în conformitate cu recomandările Grupului de lucru al Programului național de educare a tensiunii arteriale [15].

2.2. Biochimie

Măsurătorile biochimice au fost programate să fie efectuate în decurs de 3 ± 1 zile de la recrutare (linia de bază) și după 12 luni de intervenție. Probele de sânge de post au fost prelevate la 8 h ± 30 min a.m. și imediat analizate la laboratorul de biochimie al spitalului pentru colesterolul total, colesterolul HDL (lipoproteine ​​cu densitate ridicată), colesterolul LDL (lipoproteine ​​cu densitate mică), trigliceridele, insulina și glucoza pe seria de analizoare cobas® 6000, modulele c501 și e601 (Roche Diagnostics GmbH, Hoffmann-La Roche ltd, Mannheim, Germania), care au fost recunoscuți ca furnizând chimie robustă și imunochimie [16]. Evaluarea modelului homeostatic al rezistenței la insulină (HOMA-IR), indicele de verificare cantitativă a sensibilității la insulină (QUICK), funcția celulelor β pancreatice evaluate utilizând HOMA-β%, indicele triglicerid-glucoză (indicele TyG) și indicele aterogen de plasmă au fost calculate respectiv ca: produsul glucozei în post (mmol/L) și insulinei în post (U/mL) împărțit la 22,5 [17]; 1/(log10 insulină plasmatică de repaus alimentar (U/ml) + glucoză log10 (mg/dL)) [18]; (20 insulină de post în (U/ml)/(glucoză de post (mmol/L) - 3,5) [17]; ln (trigliceride de post (mg/dL) glucoză de post (mg/dL)/2) [19,20] și log10 al raportului dintre trigliceridele plasmatice și HDL-colesterol [21,22].

2.3. Ser de determinare a acidului salicilic

Probele de sânge în repaus alimentar au fost luate a doua zi după finalizarea înregistrării dietetice, la 8 h ± 30 min, deoarece s-a observat că SA circulantă este semnificativ legată atât de aportul zilnic de fructe și legume (VF) din întreaga săptămână anterioară, din ultima zi [23]. Măsurarea concentrației serice de SA a fost efectuată utilizând spectrometria de masă în tandem cu cromatografie lichidă de diluție izotopică (ID-LC-MS-MS), optimizând metoda descrisă de Sirok și colab. [24]. Pe scurt, instrumentul era o HPLC Dionex 3000 UltiMate (Thermo Fisher Scientific, Rodano (MI), Italia) conectată la un AB Sciex 3200 QTRAP LC-MS/MS cu ionizare electrospray (ESI) TurboIonSpray ™ (AB Sciex Srl, Milano, Italia). Probele au fost analizate în modul negativ de monitorizare a reacțiilor multiple (MRM) utilizând SA-d4 ca standard intern și separate în izocratic pe o coloană de dimensiune a particulelor de 3 × m inertsil ODS3, 150 × 3,0 mm id (GL Sciences, Tokyo, Japonia) cu o amestec de acetonitril și acid formic 0,1% (80:20, v/v). Faza mobilă a fost livrată la 0,3 mL/min, iar autosamplerul și cuptorul pe coloană au fost menținute la 5 ° C și, respectiv, 20 ° C. Această procedură oferă o sensibilitate ridicată (Limita inferioară de cuantificare, LLoQ 18 nL) și este adecvată pentru studiile populației, deoarece este necesară doar o cantitate mică de ser (≈100 µL).

2.4. Aport alimentar

Aportul alimentar al copiilor a fost evaluat după recrutare utilizând o evidență dietetică de 7 zile. Părinții au primit instrucțiuni orale și scrise complete cu privire la modul de cântărire a alimentelor și înregistrarea acestor date. Aceștia au fost instruiți de un dietetician să cântărească fiecare aliment oferit copilului înainte de consum și resturile și să înregistreze aceste greutăți de fiecare dată. A fost cuantificat aportul de legume, excluzând cartoful și leguminoasele. Retragerea dietetică de 24 de ore a fost, de asemenea, înregistrată la sfârșitul interviului pentru a standardiza dimensiunea obișnuită a porției și pentru a evalua aportul de fructe și legume din ziua anterioară recoltării de sânge. Cuantificarea și analiza aportului de energie și a compoziției nutrienților au fost efectuate cu un program software ad hoc pentru PC (MetadietaVR, 2013; METEDAsrl, via S.Pellico 4, San Benedetto del Tronto, AP, Italia). Aporturile individuale de salicilat, derivate din VV, din ultima zi înainte de proba de sânge au fost estimate utilizând o bază de date dietetică care conținea conținutul mediu de salicilat din 27 de tipuri de fructe și 21 de legume [3], iar pentru acele articole care lipseau, o bază de date dezvoltat în 1985 de Swain și colab. (1985) [25] a fost folosit.

2.5. Intervenţie

masa 2

Metabolizarea glucozei și profilul lipidic la momentul inițial și după 12 luni de intervenție. Valorile sunt medii (SD) și mediane (25-75 centile).