Alireza Nakhaee

2 Departament de Biochimie și

eucalipt

Bita Moodi

3 Centrul de cercetare pentru biologie celulară și moleculară, Facultatea de Medicină, Universitatea de Științe Medicale Zahedan, Zahedan;

Hossein Ali Khazaei

4 Departamentul de Imunologie și Hematologie, Școala de Medicină, Universitatea de Medicină Zahedan

Abstract

INTRODUCERE

Diabetul zaharat este o boală complexă caracterizată prin hiperglicemie și asociată cu insuficiența de insulină sau insensibilitatea organelor țintă la insulină. În diabet, glicemia ridicată produce simptomele clasice ale poliuriei, polidipsiei, polifagiei și complicațiilor diabetului [1]. Diabetul zaharat cauzează diferite disfuncții în organism, inclusiv tulburări vasculare, retinopatie, cardiomiopatie, modifică funcțiile imune, modificări ale funcției intestinale, neuropatie periferică și disfuncții ale sistemului nervos central [2]. Pacienții diabetici sunt, de asemenea, mai susceptibili la infecții microbiene, inclusiv candidoza.

În medicina modernă, nu există încă o terapie eficientă satisfăcătoare pentru tratamentul diabetului zaharat [3]. Medicamentele hipoglicemiante orale sintetice, cum ar fi sulfonilureele și biguanidele, au efecte secundare sau contraindicații nedorite [4]. Chiar și terapia cu insulină are mai multe dezavantaje, cum ar fi rezistența la insulină, anorexia nervoasă, atrofia creierului și ficatul gras după tratamentul cronic [5]. Din aceleași motive, a fost continuată căutarea unor medicamente de origine vegetală mai sigure și mai eficiente pentru tratamentul diabetului [6]. Informațiile etnobotanice indică faptul că mai mult de 800 de plante sunt folosite ca remedii tradiționale pentru tratamentul diabetului, dar doar câteva au fost examinate științific [7].

Eucalyptus globulus (eucalipt) este un copac înalt, cu creștere rapidă, veșnic verde, originar din Tasmania și sud-estul Australiei. De asemenea, crește într-o gamă largă de condiții climatice și este răspândit pe scară largă în provincia Sistan și Baluchestan (Iran). Eucaliptul a fost utilizat ca medicament tradițional pentru tratamentul diabetului zaharat în America de Sud, Africa și Iran [7, 8]. Studiile efectuate pe modele animale cu diabet streptozotocin au confirmat efectele anti-hiperglicemiante [7, 8] și antiinflamatorii [9] ale eucaliptului.

Uleiul și frunzele de eucalipt sunt utilizate în scopuri medicinale. Uleiul de eucalipt este utilizat ca element antimicrobian în diferite tipuri de cremă, săpun și pastă de dinți [10]. Studiile de laborator au arătat că uleiul de eucalipt conține substanțe cu puternice proprietăți anti-bacteriene și anti-fungice [12, 14]. Frunzele de eucalipt conțin și substanțe care au proprietăți anti-bacteriene [15, 16].

Există posibilitatea ca administrarea dietetică a eucaliptului să fie asociată cu o scădere a colonizării candidale la șobolanii normali și diabetici. Din câte știm, nu există date cu privire la efectele dietei și a apei potabile suplimentate cu eucalipt asupra candidozei sistemice la șobolanii diabetici induși de streptozotocină. Prin urmare, acest studiu a fost realizat pentru a evalua efectele anti-candidiale ale eucaliptului la șobolanii normali și diabetici.

MATERIALE ȘI METODE

Animale . Studiul a fost efectuat pe șaizeci de șobolani Albino masculi normoglicemici maturi (Rattus norvegicus) din tulpina Wistar, cântărind 200-250 g, adăpostiți separat în cuști (una pe cușcă), cu acces gratuit la apă și alimente. Animalele au fost ținute într-o cameră la 22 ± 2C cu o perioadă fixă ​​de lumină artificială de 12 ore. Toate animalele au fost hrănite cu diete standard pentru rozătoare cu următoarea compoziție (g/g): 20% proteine, 3% grăsimi, 2% fibre, 6% minerale și 69% suplimente de amidon și vitamine (Institutul Pasteur din Iran, Teheran). Acest studiu a fost aprobat de Comitetul Etic al Universității de Științe Medicale din Zahedan (Zahedan, Iran).

P materiale lant. Frunzele uscate de eucalipt au fost obținute dintr-o sursă comercială. Frunzele au fost omogenizate la o pulbere fină și depozitate la temperatura camerei (20 ± 2C) până la utilizare. Pentru dietele de animale, pulberea de eucalipt a fost încorporată într-o dietă pulverizată de șobolani (62,5 g/kg), amestecată bine, apoi s-a adăugat apă distilată și amestecată într-o pastă rigidă [17]. Amestecul a fost apoi peletat și uscat la 45 ° C până la uscare. Dieta de control a fost pregătită prin aceeași metodă pentru a ne asigura că metoda noastră de pregătire a dietei nu a modificat conținutul de vitamine și minerale al dietei. Extractul apos de eucalipt (AEE) a fost preparat prin decoct de 15 minute din materialul sub formă de pulbere, așa cum este descris de Gray și Flatt [17]. Pe scurt, 2,5 g de material pulbere au fost plasate în 100 ml de apă distilată, aduse la fierbere, apoi scoase din sursa de căldură și lăsată să se infuzeze timp de 15 min. Această suspensie a fost filtrată din Whatman nr. 1 și volumul a fost reglat cu apă distilată la 100 ml. Pentru a fi gata de utilizare, 10 ml alicote de AEE au fost diluate de 10 ori cu apă de la robinet (2,5 g/L).

Microorganism. C. albicans (ATCC 10731) a fost cultivat la 37 ° C timp de 24 de ore pe Sabouraud Dextrose Agar (SDA). Caracteristicile morfologice și biochimice ale celulelor de drojdie au fost verificate prin observații microscopice, morfologie colonială pe SDA, formarea tuburilor germinale în ser, formarea de clamidospori pe agar clamidospor și reacții de fermentare a zahărului. La cincisprezece zile după inducerea diabetului, șobolanii din grupele II, III, V și VI au fost inoculați intraperitoneal cu 0,2 ml de 105 CFU (unitate formatoare de colonii) ml -1 suspensie de organism în ser fiziologic steril [18]. Concentrația de Candida albicans a fost confirmată utilizând SDA serial pentru plăci cu diluții de 10 ori din suspensia originală.

Inducerea experimentală a diabetului. Șobolanii din grupele IV-VI au fost injectați cu o soluție de streptozotocină proaspăt preparată (60 mg/kg greutate corporală în NaCI 0,15 M cu tampon citrat de sodiu 100 mM, pH 4,5) [18]. Șobolanii martor (grupele I-III) au fost tratați cu aceeași cantitate de tampon citrat fără streptozotocină. Volumul injecției a fost de 1 ml/kg. Inducerea cu succes a diabetului a fost confirmată prin măsurarea concentrației de glucoză din sânge la post la 48 de ore după injectarea streptozotocinei. Șobolanii cu un nivel de glucoză în sânge de post> 180 mg/dl au fost considerați diabetici și incluși în studiu.

Proiectare experimentală. Șaizeci de șobolani au fost împărțiți în șase grupuri următoare (n = 10):

Control normal: șobolani normali care primesc dietă și apă potabilă nesuplimentată, (II) Control + C. albicans: șobolani normali care primesc dietă și apă potabilă nesuplimentată și inoculați cu C. albicans, (III) Control + eucalipt + C. albicans: șobolani normali care primesc dietă și apă potabilă suplimentate cu eucalipt și inoculate cu C. albicans, (IV) Control diabetic: șobolani diabetici care primesc dietă și apă potabilă nesuplimentate, (V) Diabetic + C. albicans: șobolani diabetici care primesc dietă și apă potabilă nesuplimentate și inoculați cu C. albicans, (VI) Diabetic + eucalipt + C. albicans: șobolani diabetici care primesc eucalipt suplimentat cu dietă și apă potabilă și inoculați cu C. albicans. Consumul de alimente și lichide din toate grupurile a fost măsurat zilnic, în timp ce greutatea corporală și glicemia au fost măsurate în fiecare săptămână.

tabelul 1

Efectele eucaliptului administrat în dietă (62,5 g/kg) și a apei potabile (2,5 g/L) asupra greutății corporale, aportului de apă, aportului alimentar și concentrațiilor serice de glucoză la șobolanii normali și diabetici.

Control normalControl +
C. albicansControl
+ eucalipt +C. albicansControlul diabeticuluiDiabetic +
C. albicansDiabetic
+ eucalipt+C. albicansîntre
Grupuri sig.
Ziua de studiu 3091,1 ± 2,787,3 ± 1,488,9 ± 1,7281,4 ± 5,5 a 273,2 ± 5,2229,2 ± 4,1 a 0,047
Greutate corporală (g)
Ziua de studiu 0211,5 ± 4,9206,1 ± 5,2208,3 ± 3,8207,4 ± 3,5208,8 ± 3,0210,3 ± 5,80,225
Ziua de studiu 15288,7 ± 2,4274,9 ± 5,9278,6 ± 6,4215,1 ± 3,8210,1 ± 4,2240,3 ± 6,60,009
Ziua de studiu 30335,0 ± 4,1319,0 ± 7,0320,1 ± 5,8220,4 ± 4,1 a 215,8 ± 3,7270,6 ± 6,9 c 0,045
Aport de apă (ml/zi)
Ziua de studiu 035,7 ± 5,134,0 ± 3,333,5 ± 3,134,2 ± 2,333,5 ± 2,534,0 ± 1,30,216
Ziua de studiu 1545,5 ± 1,845,4 ± 0,944,7 ± 1,188,2 ± 7,991,0 ± 8,365,0 ± 11,20,048
Ziua de studiu 3051,2 ± 2,047,3 ± 1,747,5 ± 1,998,5 ± 3,7 b 102,2 ± 4,670,2 ± 5,3 d 0,009
Consumul de alimente (g/zi)
Ziua de studiu 012,9 ± 1,112,4 ± 0,912,5 ± 1,012,4 ± 0,812,2 ± 0,912,6 ± 0,70,285
Ziua de studiu 1519,2 ± 1,815,7 ± 0,818,8 ± 0,638,3 ± 1,936,9 ± 1,842,2 ± 2,30,009
Ziua de studiu 3023,1 ± 0,721,8 ± 1,023,1 ± 0,644,6 ± 1,1 b 43,2 ± 1,035,5 ± 2,4 zile 0,008
Glucoza serică (mg/dl)
Ziua de studiu 090,6 ± 2,390,3 ± 1,790,9 ± 1,990,2 ± 1,690,7 ± 1,190,5 ± 1,80,142
Ziua de studiu 1590,0 ± 2,288,7 ± 1,189,9 ± 1,6228,2 ± 3,6224,2 ± 4,1180,3 ± 2,80,032

Valorile reprezintă media ± SEM pentru zece șobolani din fiecare grup. Comparațiile au fost făcute prin testul ANOVA unidirecțional. * Medie pentru rinichii dreapta și stânga. a P b P Freeman VS. Glucidele. În: Bishop ML, Fody EP, editori. Clinic ‍Principii chimice Proceduri Corelări. A 5-a ed. Lippincott Williams și Wilkins; 2005. pp. 262–281. [Google Scholar]