Endocrinologie, diabet, hipertensiune și nutriție, Centrul pentru diabet, Facultatea de Medicină, Universitatea din Geneva, Geneva, Elveția

funcțional

Institutul de Genetică și Genomică din Geneva (iGE3), Geneva, Elveția

C. S., V. P. și P. P. au contribuit în mod egal la manuscris. Căutați mai multe lucrări ale acestui autor

Endocrinologie, diabet, hipertensiune și nutriție, Centrul pentru diabet, Facultatea de Medicină, Universitatea din Geneva, Geneva, Elveția

Institutul de Genetică și Genomică din Geneva (iGE3), Geneva, Elveția

C. S., V. P. și P. P. au contribuit în mod egal la manuscris. Căutați mai multe lucrări ale acestui autor

Endocrinologie, diabet, hipertensiune și nutriție, Centrul pentru diabet, Facultatea de Medicină, Universitatea din Geneva, Geneva, Elveția

Diabetes Center, UCSF, San Francisco, CA, SUA

C. S., V. P. și P. P. au contribuit în mod egal la manuscris. Căutați mai multe lucrări ale acestui autor

Endocrinologie, diabet, hipertensiune și nutriție, Centrul pentru diabet, Facultatea de Medicină, Universitatea din Geneva, Geneva, Elveția

Departamentul de Chirurgie, Centrul de Izolare și Transplant de Celule, Spitalul Universitar din Geneva, Geneva, Elveția

Diabetes Center, UCSF, San Francisco, CA, SUA

Institutul de Genetică și Genomică din Geneva (iGE3), Geneva, Elveția

Departamentul de Medicină și Dezvoltare Genetică, Facultatea de Medicină a Universității din Geneva, Geneva, Elveția

Institutul elvețian de bioinformatică, Geneva, Elveția

Institutul de Genetică și Genomică din Geneva (iGE3), Geneva, Elveția

Departamentul de Medicină și Dezvoltare Genetică, Facultatea de Medicină a Universității din Geneva, Geneva, Elveția

Institutul elvețian de bioinformatică, Geneva, Elveția

Endocrinologie, diabet, hipertensiune și nutriție, Centrul pentru diabet, Facultatea de Medicină, Universitatea din Geneva, Geneva, Elveția

Institutul de Genetică și Genomică din Geneva (iGE3), Geneva, Elveția

Corespondență cu: Charna Dibner, Departamentul de Endocrinologie, Diabet, Nutriție și Hipertensiune, Facultatea de Medicină, Universitatea din Geneva, Aile Jura 4‐774, Rue Gabrielle - Perret - Gentil, 4, CH - 1211 Geneva 14, Elveția.

Endocrinologie, diabet, hipertensiune și nutriție, Centrul pentru diabet, Facultatea de Medicină, Universitatea din Geneva, Geneva, Elveția

Institutul de Genetică și Genomică din Geneva (iGE3), Geneva, Elveția

C. S., V. P. și P. P. au contribuit în mod egal la manuscris. Căutați mai multe lucrări ale acestui autor

Endocrinologie, diabet, hipertensiune și nutriție, Centrul pentru diabet, Facultatea de Medicină, Universitatea din Geneva, Geneva, Elveția

Institutul de Genetică și Genomică din Geneva (iGE3), Geneva, Elveția

C. S., V. P. și P. P. au contribuit în mod egal la manuscris. Căutați mai multe lucrări ale acestui autor

Endocrinologie, diabet, hipertensiune și nutriție, Centrul pentru diabet, Facultatea de Medicină, Universitatea din Geneva, Geneva, Elveția

Diabetes Center, UCSF, San Francisco, CA, SUA

C. S., V. P. și P. P. au contribuit în mod egal la manuscris. Căutați mai multe lucrări ale acestui autor

Endocrinologie, diabet, hipertensiune și nutriție, Centrul pentru diabet, Facultatea de Medicină, Universitatea din Geneva, Geneva, Elveția

Departamentul de Chirurgie, Centrul de Izolare și Transplant de Celule, Spitalul Universitar din Geneva, Geneva, Elveția

Diabetes Center, UCSF, San Francisco, CA, SUA

Institutul de Genetică și Genomică din Geneva (iGE3), Geneva, Elveția

Departamentul de Medicină și Dezvoltare Genetică, Facultatea de Medicină a Universității din Geneva, Geneva, Elveția

Institutul elvețian de bioinformatică, Geneva, Elveția

Institutul de Genetică și Genomică din Geneva (iGE3), Geneva, Elveția

Departamentul de Medicină și Dezvoltare Genetică, Facultatea de Medicină a Universității din Geneva, Geneva, Elveția

Institutul elvețian de bioinformatică, Geneva, Elveția

Endocrinologie, diabet, hipertensiune și nutriție, Centrul pentru diabet, Facultatea de Medicină, Universitatea din Geneva, Geneva, Elveția

Institutul de Genetică și Genomică din Geneva (iGE3), Geneva, Elveția

Corespondență cu: Charna Dibner, Departamentul de Endocrinologie, Diabet, Nutriție și Hipertensiune, Facultatea de Medicină, Universitatea din Geneva, Aile Jura 4‐774, Rue Gabrielle - Perret - Gentil, 4, CH - 1211 Geneva 14, Elveția.

Abstract

Pentru a determina impactul unui ceas funcțional al insulelor umane asupra secreției de insulină și a transcrierii genelor.

Metode

S-a obținut o întrerupere eficientă a ceasului circadian în celulele insulelor pancreatice umane prin eliminarea mică a ARN-ului CEAS. Funcția secretorie a insulelor umane a fost evaluată în prezența sau absența unui ceas circadian funcțional prin teste de secreție de insulină stimulate și prin monitorizare continuă non-stop a secreției bazale de insulină. Analiza transcrierii pe scară largă a fost realizată prin secvențierea ARN, urmată de analiza cantitativă RT-PCR a țintelor selectate.

Rezultate

Perturbarea ceasului circadian a dus la o scădere semnificativă a secreției de insulină acută și cronică stimulată de glucoză. Mai mult, secreția de insulină bazală de către celulele insulelor umane sincronizate in vitro a prezentat un model circadian, care a fost perturbat la întreruperea ceasului. Analiza secvențierii ARN a sugerat modificări în 352 niveluri de transcriere după întreruperea ceasului circadian. Dintre aceștia, regulatorii cheie ai căii secreției de insulină (GNAQ, ATP1A1, ATP5G2, KCNJ11) și transcrieri necesare pentru maturarea și eliberarea granulelor (VAMP3, STX6, SLC30A8) au fost afectate.

Concluzii

Folosind abordarea noastră experimentală recent dezvoltată pentru întreruperea eficientă a ceasului în celulele insulelor pancreatice umane, arătăm pentru prima dată că este necesar un ceas funcțional cu celule β pentru o secreție de insulină bazală și stimulată. Mai mult, întreruperea ceasului are un impact profund asupra transcriptomului insulei umane, în special asupra genelor implicate în secreția de insulină.

Numărul de ori citat conform CrossRef: 49

  • Naureen Javeed, Matthew R Brown, Kuntol Rakshit, Tracy Her, Satish K Sen, Aleksey V Matveyenko, Citokină Proinflamatorie Interleukină 1β Întrerupe funcția ceasului circadian β-celular și reglarea secreției de insulină, Endocrinologie, 10.1210/endocr/bqa0, 162, 1, (2020).
Descrierea numelui de fișier
dom12616-sup-0001-AppendixS1.docxWord 2007 document, 147,7 KB Anexa S1. Fișier text care descrie metode suplimentare, legende la cifre suplimentare și tabele suplimentare.
dom12616-sup-0002-FigureS1.pdfPDF document, 100,9 KB Figura S1. Reprezentarea tipurilor de celule endocrine în celulele insulei umane disociate.
dom12616-sup-0003-FigureS2.pdfPDF document, 70,8 KB Figura S2. CEAS knockdown reduce secreția de insulină stimulată în celulele insulelor umane.
dom12616-sup-0004-FigureS3.pdfPDF document, 111,8 KB Figura S3. Validarea dovezii de principiu a datelor de secvențiere a ARN prin analiza qRT - PCR.

Vă rugăm să rețineți: editorul nu este responsabil pentru conținutul sau funcționalitatea oricăror informații de susținere furnizate de autori. Orice întrebări (altele decât conținutul lipsă) ar trebui să fie adresate autorului corespunzător pentru articol.