1 Spitalul pentru copii din Universitatea medicală Chongqing, Ministerul Educației Laboratorul cheie de dezvoltare și tulburări ale copilului, Laboratorul cheie de pediatrie din Chongqing, China Baza internațională de cooperare științifică și tehnologică pentru dezvoltarea copilului și tulburări critice, Chongqing, China

asocierea

2 Augusta University, Georgia Prevention Institute, Medical College of Georgia, Augusta, GA, SUA

Abstract

fundal. Prevalența hipertensiunii arteriale la copii crește rapid. Această lucrare urmărește să investigheze asocierea nivelului de vitamina A și ser 25 (OH) D cu hipertensiunea și să exploreze factorii de risc ai hipertensiunii la copii. Metode. 164 de copii (vârsta: 6-12 ani, femei: 49,39%) au fost incluși în acest studiu caz-control. S-au măsurat nivelul seric al vitaminei A și al serului 25 (OH) D, al nivelului de transcripție al RAR și RXR, al receptorului 25 (OH) D și al retinol aciltransferazei (LRAT), un indicator al funcției de stocare a vitaminei A. Rezultate. Nivelul seric al vitaminei A la subiecții hipertensivi nu a fost semnificativ diferit în comparație cu martorul, dar nivelul seric 25 (OH) D a fost semnificativ mai scăzut la subiecții hipertensivi comparativ cu martorul (38,22 ± 12,00umol/L vs. 43,28 ± 12,33 umol/L, P =0,02). Nivelurile de transcriere ale RARα, RARβ, și RARγ nu au fost semnificativ diferite între cele două grupuri; dar LRAT a fost mai mic în grupul hipertensiv decât cel din control (P

1. Introducere

Hipertensiunea este un factor de risc major pentru bolile cardiovasculare și accident vascular cerebral. Este una dintre principalele cauze de deces și invaliditate la nivel mondial. Prevalența hipertensiunii arteriale la copii variază între 3% -12,6% [1, 2] și este încă în creștere în China. Intervențiile pentru stilul de viață sunt recomandate copiilor cu hipertensiune primară, dar tratamentul farmacologic este discutabil pentru copiii cu hipertensiune primară [3]. Mai mult, s-a făcut puțin studiu de intervenție nutrițională la copiii cu hipertensiune arterială primară. Prin urmare, este esențial să investigăm influența nutriției asupra hipertensiunii în copilărie și să dezvoltăm dovezi pentru un tratament alternativ sigur și sigur pentru copiii cu hipertensiune.

2. Metode

2.1. Studiați populația și dimensiunea eșantionului

Pentru a atinge puterea (1-β) de 0,8 sub probabilitatea erorii de tip I (α) de 0,05, cu parametrul VA medie 0,95 umol/L în grupul de caz și 1,05 umol/L în grupul de control, abaterea standard de 0,22 și folosind formula

, au fost necesare cel puțin 76 de probe pentru grupul de caz și respectiv pentru grupul de control. Un total de 164 subiecți cu sex și vârstă (9,81 ± 1,62 ani) au fost selectați dintr-o cohortă stabilită de 6102 copii cu vârste cuprinse între 6-12 ani în 2013 în Chongqing din 6 școli elementare. Criteriile de incluziune pentru grupul hipertensiv au fost copiii cu vârsta cuprinsă între 6 și 12 ani diagnosticați cu hipertensiune arterială [12] și care nu erau sub tratament pentru deficit de VA sau deficit de VD și care nu luau medicamente antihipertensive. Copiii cu boli (de exemplu, diabet, boli cardiovasculare sau cancer) și care iau medicamente care afectează absorbția VA și VD și hipertensiunea arterială secundară au fost excluși din acest studiu. Criteriile de incluziune pentru grupul nonhipertensiv au fost copiii fără hipertensiune sau orice altă boală care afectează absorbția și metabolismul VA și VD. Toate lucrările din acest studiu au fost efectuate în conformitate cu liniile directoare etice din Declarația de la Helsinki din 1964 și modificările ulterioare ale acesteia. Acest studiu a fost aprobat de Comitetul de Revizuire Instituțională al Universității Medicale Chongqing și s-a obținut consimțământul informat în scris de la fiecare copil și de la părinți sau tutori înainte de includerea lor în studiu.

2.2. Variabile demografice și aportul alimentar

Statutul demografic și socio-economic și informațiile medicale au fost colectate de către asistenții medicali instruiți și coordonatorii studiului printr-un chestionar cuprinzător. Informațiile demografice au inclus sexul, vârsta, starea familiei, greutatea la naștere, alăptarea, hipertensiunea sarcinii și diabetul gestațional. Statutul socio-economic (SES) a fost reprezentat de ocupația tatălui și de nivelul de educație al tatălui, precum și venitul gospodăriei și istoricul bolilor familiale de hipertensiune.

Un chestionar semicantitativ privind frecvența alimentelor a fost utilizat pentru a colecta sondajul dietetic. Alimentele au fost împărțite în 15 categorii, inclusiv cereale, legume, fructe, carne, carne de pasăre, pește și crustacee, ouă, lapte și produse lactate, fasole și produse din fasole, nuci, alge, ulei de gătit, murături, suplimente nutritive și băuturi. Consumul de ulei de gătit a fost măsurat într-o unitate familială, prin colectarea frecvenței de a mânca acasă pentru membrul familiei și a consumului total de ulei de gătit într-o perioadă, apoi a fost estimat aportul mediu de ulei de gătit pe zi. Cantitatea de alimente a fost investigată prin intervievarea părinților despre cantitatea de aport și frecvența pe parcursul unui interval, iar apoi cantitatea totală de alimente a fost calculată în medie cu aportul zilnic. Alimentele standardizate care conțin ustensile (castron, farfurie, cană și lingură etc.) au fost utilizate pentru a afișa greutatea alimentelor pentru a asigura validitatea anchetei.

2.3. Examinare fizică

Măsurătorile antropometrice și alte examinări fizice au fost efectuate de asistenți medicali bine pregătiți. Circumferința taliei a fost măsurată de două ori în centrul ombilicului pe un tricou și valorile au fost mediate. Înălțimea și greutatea au fost, de asemenea, măsurate utilizând un aparat cu ultrasunete medical mobil (modelul este WS-H300D), iar indicele de masă corporală (IMC) a fost calculat ca greutate împărțit la înălțimea pătrată (kg/m 2), ca măsură a adipozității generale, iar scorul Z al IMC a fost calculat utilizând parametrii și formula LMS de la CDC [13]; circumferința taliei a fost utilizată ca o măsură alternativă a adipozității centrale.

Tensiunea arterială (TA) și ritmul cardiac (FC) au fost măsurate în trei ocazii separate, cu participantul în poziția de așezare, cu ajutorul sfigmomanometrului electronic de tip braț OMRON (HEM7051) folosind o manșetă de TA adecvată, plasată pe brațul drept. Măsurătorile TA au fost luate la 11, 13 și 15 minute într-o perioadă de relaxare de 15 minute într-o singură ocazie [14]. Valoarea medie a tuturor celor trei măsurători ale tensiunii arteriale a fost utilizată pentru a reprezenta nivelul tensiunii arteriale sistolice în repaus (PAS) și nivelul diastolic al tensiunii arteriale (DBP). Dacă primul screening al tensiunii arteriale a îndeplinit criteriile de hipertensiune, a doua și a treia măsurare au fost efectuate în următoarele săptămâni. Subiecții au fost diagnosticați cu hipertensiune arterială dacă toate cele trei măsurători ale tensiunii arteriale îndeplinesc criteriile pentru hipertensiune arterială [15]. Pentru a exclude efectele secundare ale hipertensiunii, s-a intervievat istoricul medical și s-a efectuat examenul fizic la subiecții hipertensivi.

2.4. Indicele biochimic

Sângele venos (3 ml) a fost extras dimineața cel puțin 12 ore după post și 24 de ore după reținerea unei diete bogate în grăsimi și dietă picantă pentru fiecare subiect. Serul a fost separat prin centrifugare la 2500 rpm la 4 ° C timp de 10 min. Analizorul biochimic automat a fost utilizat pentru a măsura colesterolul total seric, colesterolul lipoproteic cu densitate ridicată (HDL-C), trigliceridele, colesterolul lipoproteic cu densitate mică (LDL-C) și glicemia în repaus alimentar (FBG). VA a fost măsurat prin cromatografie lichidă de înaltă performanță (HPLC) cu fază mobilă dizolvată (care este alcătuită din 97% metanol și 3% apă). S-au folosit etanol anhidru și n-hexan pentru a extrage retinolul și s-au uscat cu azot. VD a fost, de asemenea, măsurată prin HPLC, după extragerea și filtrarea prin acetonitril și coloană cromatografică.

2.5. Izolarea și analiza ARN-ului

ARN-ul total izolat din leucocitul din sânge periferic a fost utilizat pentru reacția în lanț a polimerazei în timp real (PCR). O probă de 500 ng din ARN-ul total a fost transcris invers în ADNc folosind kitul de reactivi PrimeScript® RT (Takara, Japonia) conform protocolului producătorului. Retinol aciltransferaza (LRAT) a fost un indicator al funcției de stocare a vitaminei A. Exemplele de secvențe pentru receptorul alfa al acidului retinoic uman (RARα), receptorul beta al acidului retinoic (RARβ), receptor de acid retinoic γ(RARγ), LRAT, receptorul vitaminei D (VDR) și β-actina au fost furnizate în tabelul suplimentar 1. Genele țintă au fost amplificate prin PCR în timp real folosind un termociclator CFX Connect Real-Time PCR (BioRad, SUA) și SYBR II Premix Ex TaqTM (Takara, Japonia). PCR s-a efectuat în conformitate cu următorul protocol: 95 ° C timp de 30 s urmat de 40 de cicluri de 95 ° C timp de 5 s și 60 ° C timp de 30 s. Curba de topire a fost analizată și a fost generată o curbă standard specifică pentru fiecare genă în paralel. Fiecare probă a fost cuantificată în triplicat. Rezultatele expresiei genei au fost calculate prin normalizarea concentrației genei țintă la cea a nivelurilor endogene de β-actin folosind CFX Manager Software.

2.6. Criterii de diagnostic

Criteriile de diagnostic ale hipertensiunii arteriale utilizate în acest studiu au fost conform lui Mi Jie [12], care este potrivit pentru caracteristicile de creștere ale copiilor și adolescenților din China. Hipertensiunea arterială a fost definită ca clinică medie măsurată SBP și/sau DBP ≥95 percentilă (în funcție de vârstă, sex și înălțime percentile). Deoarece dispozitivele oscilometrice pot servi mai bine la copiii în curs de dezvoltare (2-12 ani) [16], un sfigmomanometru electronic a fost utilizat pentru a măsura tensiunea arterială în acest studiu.

Nivelul suficient de VA a fost definit ca un nivel seric de retinol nu mai puțin de 1,05μmol/L per mililitru. Nivelul relativ insuficient de VA a fost definit ca un nivel seric de retinol între 0,70μmol/L și 1,05μmol/L. Deficiența VA a fost definită ca un nivel seric de retinol mai mic de 0,70μmol/L per mililitru [17]. Deficitul de VD a fost definit ca un nivel de 25 (OH) D mai mic de 50 nmol pe litru [18].

2.7. Analize statistice

Variabilele continue au fost raportate ca medii și abateri standard (SD) dacă variabilele îndeplinesc distribuția normală, iar testul t a fost utilizat pentru a testa semnificația diferenței dintre cele două grupuri. Variabilele continue care nu satisfac distribuția normală au fost exprimate ca X50% (X25%, X75%), iar testul sumelor de rang Wilcoxon a fost utilizat pentru comparație între cele două grupuri. Variabilele categorice au fost raportate ca numere (n) și procente din total (%) și χ Testul 2 a fost folosit pentru a testa diferența dintre două grupuri. Analiza de covarianță a fost utilizată pentru ajustarea covariabilelor, la compararea concentrației de retinol seric, 25 (OH) D și VDR între cele două grupuri. Mai mult, coeficienții de corelație ai tensiunii arteriale cu LRAT, 25 (OH) D și VDR au fost analizați prin analiza corelației. Modelul de regresie logistică multivariat a fost utilizat pentru a identifica asociațiile de hipertensiune și factorii de risc ai AV și VD. Modelul de regresie logistică multivariat a fost utilizat pentru a identifica asociațiile de hipertensiune și factorii de risc ai AV și VD.

3. Rezultate

Caracteristicile generale ale subiecților au fost prezentate în tabelul 1. Vârsta medie a fost de 9,81 ± 1,62 ani și 49,39% au fost femei. Nu există nicio diferență semnificativă în ceea ce privește vârsta, sexul, ocupația tatălui și nivelul de educație al tatălui între grupul hipertensiv și cel de control. Nu există nicio diferență semnificativă în greutatea medie la naștere între cele două grupuri (3373,5 ± 489,0g față de 3284,2 ± 478,9g, P = 0,24). Rata de a fi alăptat nu a prezentat nici o diferență semnificativă (80,00% față de 89,29%, P = 0,09), dar durata alăptării la copiii hipertensivi a fost semnificativ mai mică decât cea din grupul de control (7,11 ± 5,08 față de 8,69 ± 4,93 luni) ., P VariabileTotalHipertensiuneControlP N1648084 Vârstă, ani9,81 (1,62)9,74 (1,77)9,89 (1,45)0,56Sex, n (%) Masculin83 (50,61%)42 (52,50%)41 (48,81%)0,64 Femeie81 (49,39%)38 (47,50%)43 (51,19%)Sarcina și variabilele neonatale Greutatea la naștere, g3327,74 (484,43)3373,50 (489,0)3284,20 (478,90)0,24 Alăptat, n (%) da139 (84,76%)64 (80,00%)75 (89,29%)0,09 Nu25 (15,24%)16 (20,00%)9 (10,71%)Durata alăptării, lună7,92 (5,05)7,11 (5,08)8,69 (4,93)0,04PIH da5 (3,04%)2 (2,50%)3 (3,57%)0,18 Nu159 (96,96%)78 (97,50%)81 (96,43%)Nivelul de educație al părinților 1515 (9,15%)10 (12,50%)5 (5,95%)Variabile antropometrice, medie (SD) SBP, mmHg114,45 (9,04)127,21 (7,87)101,53 (7,69) 2 19,45 (4,59)22,51 (4,39)16,36 (1,94)

vârstă ajustată, sex, IMC, WC, TRIG, HDL-C și LDL-C și

În comparație cu grupul de control, IMC, LDL-C și trigliceride (TRIG) au fost semnificativ mai mari la copiii cu hipertensiune, dar HDL-C a fost semnificativ mai scăzută la copiii cu hipertensiune (toate P
(A)
(b)
(c)
(d)

Asocierea LRAT și VDR cu TA a fost analizată în modelul de regresie logistică multivariabilă din Tabelul 2 și covariabilele scorului Z al IMC, alăptate, WC, HDL-C, LDL-C, LRAT, VDR, nuci, ciuperci și au fost incluse alimente cu alge. Nivelurile serice de VA și LRAT sunt foarte corelate, precum și nivelurile serice de VD și VDR. Prin urmare, doar LRAT și VDR au fost incluse în modelul final. După cum se arată în tabelul 2, WC-urile au fost asociate pozitiv cu TA, dar alăptate, LRAT și HDL-C au fost asociate negativ cu TA. Analiza de corelație a nivelului de expresie a ARNm VDR și LRAT a arătat că LRAT a crescut în funcție de nivelul VDR la copiii cu hipertensiune arterială (R = 0,24, P = 0,03), dar acest lucru nu a fost observat în grupul de control (R = -0,03, P = 0,82).

SESAU 95

4. Discutie

Acest studiu a demonstrat că serul LRAT a fost puternic corelat cu tensiunea arterială la copii, iar serul 25 (OH) D și receptorul său VDR la copiii cu hipertensiune au fost mai mici decât cei din grupul de control. Rezultatele au arătat că durata mai lungă a alăptării și HDL-C mai mare au fost factorii de protecție ai hipertensiunii, iar obezitatea abdominală a fost asociată cu un risc crescut de hipertensiune într-un model de regresie logistică multivariabilă.

Rezultatele au arătat, de asemenea, că serul 25 (OH) D și receptorul său VDR au avut o relație negativă cu tensiunea arterială. Serul 25 (OH) D și VDR la copiii cu hipertensiune arterială au fost mai mici decât cei din grupul de control în analizele de regresie univariate și multivariate. Mai mult, deficitul de 25 (OH) D a fost invers asociat cu nivelul de hipertensiune, indicând faptul că epuizarea vitaminei D exacerbează hipertensiunea prin influențarea VDR [23, 24]. Acest rezultat este în concordanță cu studiul de cohortă la adulți, care a constatat o asociere inversă între plasma 25 (OH) D și hipertensiune arterială [8, 25].

Este pentru prima dată când s-a găsit relația negativă a LRAT și VDR cu hipertensiunea infantilă, sugerând că suplimentarea VA și VD la copiii cu hipertensiune poate juca roluri importante în protecția cardiovasculară. Totuși, acest studiu are și unele limite. Deoarece nu am efectuat un studiu prospectiv de cohortă pentru a investiga gradul de deteriorare a deficitului de VA și VD la organul țintă al hipertensiunii, nu a putut verifica ipoteza etiologică a VA și VD asupra hipertensiunii copiilor.

5. Concluzii

Dintre copiii cu vârsta cuprinsă între 6-12 ani, nivelul LRAT seric, nivelul 25 (OH) D și nivelul VDR au fost asociate negativ cu nivelul tensiunii arteriale. Aceste rezultate sugerează că îmbunătățirea aportului nutrițional VA și VD poate fi o intervenție potențială de utilitate ca ipoteze pentru studii ulterioare. În plus, am constatat că durata mai lungă a alăptării a fost asociată cu scăderea nivelului tensiunii arteriale, sugerând că avocatul alăptat la sân a fost o metodă potențială de control al nivelului tensiunii arteriale chiar și în copilărie. În plus, WC mai mari au fost legate de nivelul de tensiune arterială deteriorat la copii, sugerând că prin creșterea exercițiilor fizice și a unei diete sănătoase pentru a controla obezitatea au fost metode valide de control al tensiunii arteriale din copilărie.

Disponibilitatea datelor

Datele utilizate pentru a susține concluziile acestui studiu sunt incluse în articol. Cererile de acces la aceste detalii și date trebuie adresate către Xiaohua Liang (E-mail: [email protected]).

Conflicte de interes

Autorii declară că nu au conflicte de interese.

Contribuțiile autorilor

Xiaohua Liang, Yisong Huang, Jie Chen și Tingyu Li au conceput și conceput experimentele; Min Chen și Ping Qu au efectuat experimentele; Xiaohua Liang, Guang Hao și Yisong Huang au analizat datele și au scris lucrarea; și toți autorii au examinat și aprobat în mod critic lucrarea finală.

Mulțumiri

Această lucrare a fost susținută de Fundația Națională pentru Științe Naturale din China [Grant nr. 81502826], China Postdoctoral Science Foundation [Grant nr. 2014M562289] și proiecte finanțate de cercetare postdoctorală Chongqing [Grant nr. Xm2014129]. Autorii ar dori să recunoască sprijinul de laborator al Ministerului Educației Laboratorul cheie pentru dezvoltarea copilului și tulburări și a întregului personal din cele șase școli elementare.

Materiale suplimentare

STable 1. Exemple de comenzi. STABILĂ 2. Aporturi dietetice, mediană (P25, P75), g. (Materiale suplimentare)

Referințe