Bibliotecă NCBI. Un serviciu al Bibliotecii Naționale de Medicină, Institutele Naționale de Sănătate.

clonorchis

Grupul de lucru IARC pentru evaluarea riscurilor cancerigene pentru oameni. Agenți biologici. Lyon (FR): Agenția Internațională pentru Cercetarea Cancerului; 2012. (Monografiile IARC privind evaluarea riscurilor cancerigene pentru oameni, nr. 100B.)

Agenți biologici.

Opisthorchis viverrini și Clonorchis sinensis au fost luate în considerare de un grup de lucru anterior al IARC în 1994 (IARC, 1994). De atunci, noi date au devenit disponibile, acestea fiind încorporate în Monografie, și luate în considerare în prezenta evaluare.

1. Date de expunere

1.1. Taxonomie, structură și biologie

1.1.1. Taxonomie

Opisthorchis viverrini (O. viverrini) și Clonorchis sinensis (C. sinensis) sunt membri ai genului importanți din punct de vedere patologic Opisthorchis; familie, Opisthorchiidae; comanda, Digenea; clasa, Trematoda; filum, Platyhelminths; și regat, Animalia. Aparțin aceluiași gen (Opisthorchis) dar la diferite specii bazate pe morfologie; cu toate acestea, genul Clonorhis este atât de bine stabilit în literatura medicală încât termenul este păstrat aici.

1.1.2. Structura

Adultul din O. viverrini și C. sinensis au de obicei aproximativ 10-25 mm lungime și 3-5 mm lățime (Liu și Chen, 1998; Sripa și colab., 2007).

Ouăle maronii gălbui, ovoide, au un opercul distinct, care se deschide pentru a elibera miracidul - o larvă complet formată. Ouăle au în medie 29 μm lungime și 17 μm lățime pentru C. sinensis (Liu & Chen, 1998) și 27 μm cu 15 μm pentru O. viverrini (Sadun, 1955) și sunt dificil de diferențiat între aceste două specii (Kaewkes și colab., 1991).

1.1.3. Structura genomului

Structurile genomice ale O. viverrini și C. sinensis nu au fost raportate.

O. viverrini se raportează că are șase perechi de cromozomi, adică 2n = 12 (Roma, 2005), să nu aibă metilații CpG și A, ci să conțină un element ADN foarte repetat, care este foarte specific organismului (Wongratanacheewin și colab., 2003). Variațiile intra și inter-specifice ale secvențelor genetice ale 18S, a doua regiune distanțieră transcrisă intern ITS2, 28S ADNr nuclear și ale ADN-ului citocrom C oxidazei mitocondriale I (mtCOI) ADN sunt scăzute și aproape identice (Ando și colab., 2001). O comparație a secvențelor regiunii ITS2 ale O. viverrini contra C. sinensis arată un meci de 95%; secvențele diferă la 28 de poziții de nucleotide (Park, 2007).

Numărul de cromozomi al C. sinensis este 2n = 56, iar cromozomii pot fi împărțiți în două grupe în funcție de dimensiunile lor, constând din opt perechi de cromozomi mari și 20 de perechi de cromozomi mici. Lungimea totală medie a complementelor diploide ale afecțiunilor hepatice colectate în Republica Democrată Populară Chineză este puțin mai mare decât cea a celor colectate în Republica Coreea (Park și colab., 2000).

1.1.4. Gama de gazdă

Trei familii de melci de apă dulce (Hydrobiidae, Bithyniidae și Melaniidae) sunt primele gazde intermediare (Harinasuta și Harinasuta, 1984; Liu și Chen, 1998). Din acestea, Parafossarulus striatulus, Alocinma longicornis (Hydrobiidae), Bithynia fuchsianuS (Bithyniidae) sunt în prezent considerate a fi de cea mai mare importanță în China în ciclul de viață al C. sinensis (Lun și colab., 2005).

Peste 130 de specii de pești (aparținând a 16 familii) sunt gazde intermediare secundare (Komiya, 1966; Vichasri și colab., 1982; Roma, 1986; Joo, 1988; Liu și Chen, 1998). Peștii din familia Cypriniidae sunt gazdele intermediare majore (Lun și colab., 2005).

Pe lângă ființele umane, alte mamifere care mănâncă pești, de exemplu câini, pisici, porci, nurci, nevăstuici, civete și șobolani de casă pot fi gazde certe, iar unele pot acționa ca gazde de rezervor (Wang, 1983; Lun și colab., 2005; Roma, 2005). Există, de asemenea, dovezi că iepurii, cobaiii, hamsterii, gerbilii, șoarecii și șobolanii sunt sensibili la parazit în laborator (Bhamarapravati și colab., 1978; Wang, 1983; Boonmars și colab., 2009). Pisicile și câinii sunt considerați a fi cele mai importante gazde animale din regiunile endemice din China (Lun și colab., 2005). Spre deosebire de multe alte țări, majoritatea câinilor și pisicilor nu sunt ținute ca animale de companie în China rurală, ci se plimbă liber în sate și, prin urmare, au acces ușor la rămășițele de pește crud sau puțin gătit în deșeurile menajere (Wang, 1983; Jiang, 2001) .

1.1.5. Organe țintă

Fluxurile de ficat adulte se găsesc de obicei în căile biliare intrahepatice de dimensiuni medii sau mici. În infecțiile severe, paraziții adulți pot fi găsiți în vezica biliară, în conducta biliară extrahepatică și în canalul pancreatic (Pungpak și colab., 1985; Roma, 1986, 2005; Lim, 1990; Sripa, 2003). Peste 100 de goluri au fost recuperate din vezica biliară a unui pacient (Evans și colab., 1971) și 5140 și 1348 C. sinensis au fost găsite, respectiv, în canalele biliare și în canalele pancreatice ale unui copil bolnav care a murit de clonorchiasis sinensis (Chen și colab., 1963).

Fiziopatologia și manifestările clinice pentru O. viverrini și C. sinensis și infecția sunt foarte asemănătoare (Lun și colab., 2005; Sripa, 2008).

1.1.6. Ciclu de viață

Ouăle produse de viermii maturi adulți trec pe conducta biliară și sunt excretați în fecale. Dacă ouăle ajung într-un corp de apă dulce (iazuri mici, pâraie și râuri, câmpuri de orez inundate și rezervoare), acestea sunt ingerate de melci, care acționează ca gazde intermediare primare. Reproducerea asexuală în melc are ca rezultat eliberarea zilnică a mii de cercarii, la 1-2 luni după infectarea melcului. Cercariile care înoată liber pătrund în țesutul peștilor de apă dulce, care acționează ca gazdă intermediară secundară și se enchistează pentru a deveni metacercariae complet infecțioase sub pielea peștelui sau în mușchi după 21 de zile.

Oamenii sau alte animale care mănâncă pești sunt infectate prin ingestia de pește de apă dulce crud sau insuficient (sărat, murat sau afumat) care conține metacercariae. După ingestie, metacercaria excită în duoden și urcă pe tractul biliar prin ampula Apei. Maturarea până la vârsta adultă durează aproximativ 1 lună.

Ciclul de viață al afecțiunilor hepatice este prezentat în Fig. 1.1 (pentru o recenzie, vezi Roma, 1986; Sripa și colab., 2007).

Figura 1.1

Ciclul de viață al Clonorchis sinensis și Opisthorchis viverrini

1.1.7. Gene și produse genetice

Laha și colab. (2007) au construit un O. viverrini biblioteca ADNc care acoperă

14% din întregul transcriptom. Aproximativ 20% din contiguri au primit clasificări de ontologie genică. Familiile de proteine ​​frecvent reprezentate includeau pe cele implicate în funcții fiziologice esențiale pentru parazitism, cum ar fi respirația anaerobă, reproducerea, detoxifierea, întreținerea suprafeței și hrănirea. O evaluare a relațiilor evolutive a arătat că O. viverrini a fost asemănător cu alte lovituri de parazit precum C. sinensis și Schistosoma japonicum. În total 164 O. viverrini contigurile conțineau cadre de citire deschise (ORF) cu secvențe de semnal, dintre care multe erau specifice pentru platilhelmint. Mai mult, s-au identificat ORF-uri reprezentând proteine ​​secretate cu roluri cunoscute în tumorigeneză, cum ar fi granulina, serin proteaze asemănătoare calikreinei, fosfolipaza A2 (PLA-2), proteina asemănătoare saponinei și tioredoxin peroxidaza. Aceste proteine ​​ar putea juca un rol în patogeneza O. viverrini-colangiocarcinom indus (Laha și colab., 2007). Profilarea expresiei genice a adultului O. viverrini a fost, de asemenea, construit prin prima analiză în serie de 5 ′ a bibliotecii de expresie genică (5 ′ SAGE), iar proteinele precursoare din vitelină B și mioglobina s-au dovedit a fi cele mai abundente proteine ​​(Chutiwitoonchai și colab., 2008).

1.2. Epidemiologia infecției

1.2.1. Prevalență, distribuție geografică

Infecția cu hepatopatie umană este endemică în China, Thailanda, Republica Coreea, Republica Populară Democrată Coreeană, Vietnam, Republica Democrată Populară Lao și Cambodgia. Endemicitate pentru C. sinensis este, de asemenea, suspectat în Federația Rusă de mult râul Amur. Persoane din Singapore și Malaezia cu C. sinensis infecția a fost raportată rar; mulți dintre ei pot fi infectați în timp ce călătoresc în alte țări sau prin consumul de pește importat.

O estimare foarte brută a numărului global de persoane infectate este de ordinul a 45 de milioane, cuprinzând 35 de milioane de infectați C. sinensis (Asociația Coreea pentru Promovarea Sănătății, 2004; Lun și colab., 2005; Fang și colab., 2008) și 10 milioane cu O. viverrini (OMS, 1995; Jongsuksuntigul & Imsomboon, 2003). Distribuția geografică a O. viverrini și C. sinensis este prezentat în Fig. 1.2.

Figura 1.2

Distribuția infecției cu fluke hepatic în Asia

(A) Opisthorchis viverrini

Thailanda este cea mai endemică țară pentru opisthorhiasis datorată O. viverrini. În Thailanda și țările învecinate, opistorhiaza umană este cauzată de O. viverrini. În 1980–81, prevalența în nordul, nord-estul, centrul și sudul Thailandei a fost de 5,6%, 34,6%, 6,3% și respectiv 0,01%, cu o prevalență generală de 14% sau 7 milioane de persoane infectate. Ca rezultat al activităților de control intensiv și continuu, prevalența infecției în nord-estul Thailandei a scăzut la 15,7% în 2001, iar ratele în alte zone au fost următoarele: nordul (19,3%), centrul (3,8%) și sudul (0%), cu o prevalență medie de 9,6% sau 6 milioane de persoane infectate (Jongsuksuntigul & Imsomboon, 2003).

S-a estimat că 1,7 milioane de persoane au fost infectate cu O. viverrini în Laos în 1992 (OMS, 1995), în principal de-a lungul râului Mekong și până în zonele joase printre persoanele cu legături etnice strânse cu majoritatea populației thailandeze de nord-est. Pe baza unui sondaj național realizat în 2000-2002 de elevi din școlile primare care a inclus 17 provincii și municipalitatea Vientiane, prevalența O. viverrini a fost de 10,9% (29846 participanți). Din nou, regiunile de-a lungul râului Mekong precum Khammuane, Saravane sau provincia Savannakhet au arătat o prevalență mai mare a O. viverrini (32,2%, 21,5%, respectiv 25,9%) (Rim și colab., 2003). Mai recent, un sondaj din districtul Saravane a relevat o prevalență ridicată a O. viverrini infecție (58,5%) la 814 persoane din 13 sate (Sayasone și colab., 2007).

Câteva rapoarte oficiale sau date publicate pe O. viverrini infecție în Cambodgia sunt disponibile. Un mic sondaj efectuat la școlarii primari din provincia Kampongcham a arătat o prevalență a Opisthorchis spp. de 4,0% din 251 exemplare fecale din 2002 (Lee și colab., 2002).

Viet Nam a fost raportat ca fiind endemic pentru C. sinensis în partea de nord și O. viverrini în regiunea sudică (De et al., 2003).

(b) Clonorchis sinensis

C. sinensis a fost descoperit pentru prima dată în canalele biliare ale unui tâmplar chinez din Calcutta, India, în 1875. În 1994, arheologii au găsit un număr mare de C. sinensis ouă în conținutul intestinului unui cadavru îngropat în stadiul mijlociu al perioadei statelor luptătoare (475-221 î.Hr.) în Hubei, China (Wu și colab., 1996), indicând faptul că acest parazit a fost prezent în această provincie de mai mult de 2300 de ani. Într-un sondaj de eșantionare la nivel național cu privire la starea epidemiologică a bolilor parazitare din China, au fost anchetate un total de 356629 de persoane, iar în 2065 s-a constatat că sunt infectate cu C. sinensis, cu o rată globală de infecție de 0,58% (Biroul anchetei naționale privind bolile parazitare importante, 2005). Într-un sondaj recent efectuat în zonele endemice chineze, un total de 217829 persoane au fost anchetate, iar 5230 s-au dovedit a fi infectate cu C. sinensis, rezultând o rată de infecție de 2,4%. Din aceasta, o estimare a numărului de persoane infectate în China a fost calculată la 12,5 milioane (Fang și colab., 2008).

C. sinensis este în prezent cel mai răspândit helmint parazit uman din Republica Coreea, așa cum a fost detectat prin examinarea fecală. Nu a existat nicio scădere a ratei medii naționale de infecție a C. sinensis de aproape 30 de ani; rata de detectare a fost de 4,6% în 1971, 1,8% în 1976, 2,6% în 1981, 2,7% în 1986, 2,2% în 1992, 1,4% în 1997 și 2,9% în 2004 și aproximativ 1,3 milioane de persoane în Republica Coreea sunt estimat a fi infectat (Korea Association of Health Promotion, 2004; Rome, 2005). În zonele endemice ale Republicii Coreea, de-a lungul principalelor râuri, au fost raportate valori de prevalență de până la 40% (Roma, 1986, 2005).

Din cauza lipsei datelor disponibile din ancheta lor națională, nu există un număr exact pentru persoanele infectate din Vietnam. Un studiu efectuat pe 1155 de săteni din nordul Vietnamului a raportat o prevalență a C. sinensis infecție de 26% (Dang și colab., 2008).

O prevalență a C. sinensis infecția este suspectată în partea de sud-est a Federației Ruse, în bazinul râului Amur unde, pe baza unor rapoarte rare, a fost estimată la> 20% în unele sate (de exemplu, districtul Nanay) (Semenova și colab., 1995; Dyk și colab., 1997).

1.2.2. Transmiterea și factorii de risc pentru infecție

Gazda definitivă este infectată de infecția hepatică în principal prin ingestia de pește crud (uscat, murat sau sărat) sau pește gătit, care conține metacercariae - acesta este stadiul infecțios în ciclul de viață al afecțiunilor hepatice (Sithithaworn și Haswell-Elkins 2003). Multe anchete arată că oamenii din Thailanda (Kaewpitoon și colab., 2008), Vietnam (Dang și colab., 2008), China (Fang și colab., 2008; Lun și colab., 2005), Laos (Hohmann și colab., 2001) și Republica Coreea (Lim și colab., 2006) au aceste obiceiuri alimentare.

În sudul Chinei și în rândul populației cantoneze din regiunea administrativă specială din Hong Kong, peștele crud este consumat în mod tradițional după ce a fost scufundat în terci de orez. Alternativ, peștele mare este feliat și mâncat cu ghimbir și usturoi cunoscut sub numele de „yushen.”Acest mod de transmisie tinde să crească odată cu înaintarea în vârstă. În schimb, mulți copii din zonele deluroase din Guangdong și estul Chinei, cum ar fi provinciile Jiangsu, Shandong și Anhui, prind adesea pești în timpul jocului și îi prăjesc incomplet înainte de consum. Acest mod de transmisie tinde să scadă odată cu vârsta (Fang et al., 2008).

Populația Republicii Coreea mănâncă pește crud înmuiat în oțet, piure de ardei roșu sau pastă de fasole fierbinte cu vin de orez la adunările sociale. Faptul că bărbații fac acest lucru mai frecvent decât femeile a fost dat drept motiv pentru prevalența mai mare a infecției în rândul bărbaților; cu toate acestea, în zonele puternic endemice, adesea nu se observă diferențe semnificative între sexe. Când peștele este abundent, peștele crud este consumat foarte regulat, spre deosebire de a fi păstrat pentru ocazii speciale (Choi, 1984; Roma, 1986). Vietnamezii mănâncă pește crud în salate (Kiêu și colab., 1990).

În Thailanda și regiunea de câmpie a Laosului, se remarcă trei tipuri de preparate de pește nefiert (Sadun, 1955; Sithithaworn & Haswell-Elkins, 2003):

Koi pla este probabil cel mai infecțios fel de mâncare, urmat de pești conservați pentru 6-eteno-2'-deoxiadenozină (εdA) și 3,N 4-eteno-2'-deoxicitidina (εdC) - a fost măsurată în probe de urină colectate de la voluntari sănătoși și O. viverrini-subiecți thailandezi infectați. Nivelurile medii de εdA și εdC excretate au fost de 3-4 ori mai mari în urina de O. viverrini-pacienți infectați și corelat cu un nivel crescut de malondialdehidă urinară, nitrat/nitrit urinar și fosfatază alcalină plasmatică. După eliminarea fluke-ului prin tratament cu praziquantel, nivelul celor două etenoaducte, malondialdehidă, azotat/nitrit și fosfatază alcalină a scăzut. ADN-urile ADN eteno-promutagenice despre care se crede că derivă din celulele epiteliale ale căilor biliare pot crește riscul de a dezvolta colangiocarcinom în O. viverrini-pacienți infectați. Acest studiu evidențiază potențialul biomarker al nivelurilor urinare de εdA și εdC ca markeri de risc neinvazivi pentru dezvoltarea colangiocarcinomului legat de opistorhiază (Dechakhamphu și colab., 2008).

[Grupul de lucru a menționat că toate studiile descrise mai sus se referă la O. viverrini; studii privind deteriorarea ADN ca răspuns la C. sinensis infecția nu a fost disponibilă grupului de lucru.]

4.3. Mutația genetică, metilarea și expresia modificată în colangiocarcinom

4.3.1 O. viverrini-zone endemice

Diferențe în Ki-RAS statutul mutațional a fost descris atunci când se compară colangiocarcinomul de la pacienții japonezi (unde infecțiile cu fluke sunt foarte rare) cu cele de la colangiocarcinom care apar la pacienții care trăiesc în zone endemice din Thailanda pentru O. viverrini (incidența Ki-RAS mutația a fost mai mare la pacienții thailandezi) (Kiba și colab., 1993). Hipermetilarea promotorului enzimei de reparare a nepotrivirii ADN-ului hMLH1 a fost, de asemenea, arătată la un alt grup de pacienți thailandezi (Limpaiboon și colab., 2005). Cu toate acestea, aceste studii nu au documentat în mod specific starea de infecție cu fluke hepatic la cele două grupuri de pacienți.

Profilarea transcripțională a microangheriei genice a colangiocarcinomului de la pacienții japonezi față de thailandezi (din nou, fără o anumită cunoaștere a statutului de fluke hepatic) a condus Jinawath și colab. (2006) să propună o semnătură a O. viverrini-colangiocarcinom asociat cu o expresie crescută a genelor implicate în metabolismul xenobiotic (UGT2B11, UGT1A10, CHST4, SULT1C1) în cazuri din Thailanda, dar o expresie mai scăzută a genelor legate de semnalizarea factorului de creștere (TGFBI, PGF, IGFBP1, IGFBP3).

4.3.2. Studii pe animale experimentale

Puține mutații ale Ki-RAS genă au fost observate în O. viverrini–Colangiocarcinoamele induse de NDMA la hamsteri (Tangkawattana și colab., 2008), dar TP53 supraexpresia a fost raportată în aproape toate O. viverrini-colangiocarcinoamele induse de hamster (Tesana și colab., 2000).

Loilome și colab. (2006) au investigat mecanismul molecular al O. viverrini–Colangiocarcinogeneza indusă de NDMA la hamsteri utilizând afișarea diferențială de fluorescență-PCR și a găsit 23 de transcrieri reglate în sus și unul în reglare descendentă între 149 de benzi amplificate diferențial. Printre genele reglate în sus în ficat s-a aflat sub-unitatea de reglare a protein kinazei A de transducție a semnalului Iα (Prkar1α), care a fost semnificativ mai mare în colangiocarcinom și leziunea sa precursoră în comparație cu epitelii normali de ficat și vezica biliară normală (P Sud-estul Asiei J Trop Med Sănătate Publică. 2001; 32 Supliment 2: 17-22. [PubMed: 12041584]